急性肝衰竭大鼠肝匀浆蛋白诱导骨髓间充质干细胞向肝细胞的分化

目的 研究D-氨基半乳糖/内毒素介导的急性肝衰竭大鼠肝匀浆蛋白对骨髓间充质干细胞(BMSCs)分化的影响.方法 将D-氨基半乳糖/内毒素腹腔注射制备而成的肝衰竭大鼠肝匀浆蛋白加入培养液中培养BMSCs,通过观察BMSCs形态以及检测ALB、AFP、糖原、尿素氮的合成来观察它对细胞分化的影响.结果 肝衰竭大鼠肝匀浆按分子量的大小可以分为6个部分,其中4个部分的蛋白可以导致BMSCs转变成较为典型的多角型、卵圆形细胞,并且这些细胞中的AFP、ALB、糖原染色、培养液中尿素氮浓度也有明显增加,以第3、第4部分蛋白更为显著.结论 急性肝衰竭模型肝匀浆蛋白可以促进BMSCs向肝细胞样细胞分化,其中以第3、第4波峰蛋白更为显著.     

一氧化氮及内皮素在肝硬化患者肝损害中的作用及对肝门脉血流动力学的影响

目的: 探讨一氧化氮(NO)、内皮素(ET)对肝硬化患者肝损害及门脉血流动力学的影响。方法: 对51例肝硬化患者(其中Child-PughA、B、C级分别为19、21、11例)和31名正常对照分别用硝酸还原酶及放射免疫法检测血浆中NO、ET水平;用彩色多普勒检测受试对象门脉血流动力学的变化及用自动分析生化仪检测受试对象肝功能。结果: 肝硬化各组(Child-PughA、B、C级)血浆中NO、ET水平明显高于对照组(P<0.01);肝硬化各组患者血浆中NO、ET水平随肝功能恶化逐渐升高,各级之间比较差异均有统计学意义(P<0.01);在肝硬化患者血浆中NO/ET较对照组升高(P<0.01);NO/ET在Child-PughA、C级间差异有统计学意义(P<0.01),但在Child-PughB、C级间差异无统计学意义(P>0.05);肝硬化各组的门静脉血流量(PVBF)、脾静脉血流量(SVBF)显著高于对照组(P<0.01),肝硬化组Child-PughC级升高更明显,Child-PughC级与ChildPughA级比较差异有统计学意义(P<0.01),而Child-PughC级与B级比较差异无统计学意义(P>0.05);肝硬化组血浆中NO、ET含量与PVBF、SVBF呈显著正相关,而对照组与上述各递质间无直线相关关系。肝硬化有腹腔积液组患者NO、ET含量明显高于对照组(P<0.01)和无腹腔积液组(P<0.05)。结论: 肝硬化患者血浆中NO和ET水平可反映肝硬化的严重程度,对肝功能预测有重要意义。NO、ET在肝硬化门脉血流动力学紊乱的形成机制起着重要作用。     

CD40表达及其配体血清水平的动态变化对慢加急性肝衰竭预后的评估价值

目的研究慢加急性肝衰竭(ACLF)不同病程CD40L血清水平以及外周血单个核细胞(PBMCs)CD40表达的动态变化,旨在探讨CD40L血清水平及单核细胞上CD40的表达对慢加急性肝衰竭病情的预测价值。方法采用流式细胞术(FACS)分别对慢加急性肝衰竭早期(ACLF-E)和晚期(ACLF-L)组(25例)、慢性乙型肝炎(CHB)组(28例)、肝炎肝硬化(LC)组(13例)及健康对照(HC)组(20例)的PBMCs上CD40的表达进行检测,同时血清中可溶CD40L(即sCD154)的水平采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定。结果与HC组比较,CHB组、LC组、ACLF-E组及ACLF-L组PBMCs的CD40表达水平呈逐渐增加趋势,ACLF-E组增加尤其明显;ACLF-E组中血清可溶性CD40L浓度也明显高于HC组、CHB组、LC组及ACLF-L组;ACLF死亡组病程早期与晚期CD40及CD40L表达的水平均高于存活组。结论血清CD40L浓度及CD40表达与ACLF病情及预后密切相关,血清CD40L水平及PBMC上CD40表达水平可以作为ACLF病情评估和预后判断的重要标志之一。     

D-半乳糖胺和脂多糖介导大鼠急性肝衰竭的机理研究

目的研究D-半乳糖胺和脂多糖导致大鼠急性肝衰竭的发病机理。方法8周龄雄性SD大鼠,使用D-半乳糖胺(D-GalN,1250mg/kg)和脂多糖(LPS,200μg/kg)腹腔注射建立急性肝衰竭模型,并研究肝衰竭大鼠血清和肝匀浆的各种生化指标及肝组织的病理学改变。结果使用1250mg/kg的D-GalN和200μg/kg的LPS腹腔注射能够导致大鼠出现急性致死性的肝损伤,大鼠血清中TNF-α、IL-1β显著升高;大鼠肝组织中GSH、GR和SOD降低,MDA、NO、T-NOS和iNOS升高;与正常大鼠的肝匀浆蛋白分离图相比,肝衰竭大鼠肝匀浆蛋白的1峰升高较明显,5峰、6峰降低较明显。结论使用1250mg/kg的D-GalN和200μg/kg的LPS腹腔注射能够制备急性肝衰竭大鼠模型,其发病机理可能与D-GalN和LPS能够促进炎症细胞因子TNF-α、IL-1等大量的产生,促进机体过度的氧化反应及氧化产物的产生,导致肝组织中某些分子量范围内蛋白的增加及另外一些分子量范围内蛋白的减少有关。     

D-半乳糖胺和脂多糖介导大鼠急性肝衰竭的机理研究

目的研究D-半乳糖胺和脂多糖导致大鼠急性肝衰竭的发病机理。方法8周龄雄性SD大鼠,使用D-半乳糖胺（D-GalN,1250mg／kg）和脂多糖（LPS,200μg／kg）腹腔注射建立急性肝衰竭模型,并研究肝衰竭大鼠血清和肝匀浆的各种生化指标及肝组织的病理学改变。结果使用1250mg／kg的D-GalN和200μg／kg的LPS腹腔注射能够导致大鼠出现急性致死性的肝损伤,大鼠血清中TNF-α、IL-1β显著升高;大鼠肝组织中GSH、GR和SOD降低,MDA、NO、T—NOS和iNOS升高;与正常大鼠的肝匀浆蛋白分离图相比,肝衰竭大鼠肝匀浆蛋白的1峰升高较明显。5峰、6峰降低较明显。结论使用1250mg／kg的D—GalN和200μg／kg的LPS腹腔注射能够制备急性肝衰竭大鼠模型,其发病机理可能与D—GalN和LPS能够促进炎症细胞因子TNF—α、IL-1等大量的产生。促进机体过度的氧化反应及氧化产物的产生,导致肝组织中某些分子量范围内蛋白的增加及另外一些分子量范围内蛋白的减少有关。     

干细胞移植在肝衰竭治疗的现况及前景

肝衰竭是在多种致病因素作用下的一种免疫炎症性疾病,西欧国家主要是酒精性和药物性肝病;肝衰竭根据发病缓急分为急性肝衰竭（ALF）和慢性肝衰竭（CLF）.在亚洲以常见的重型病毒性肝炎为典型代表,病情凶险,预后极差,死亡率达到80％[1].在中国,引起肝脏功能损伤的常见疾病是病毒性肝炎,其中以乙型肝炎最为常见;我国是乙型肝炎大国,乙型肝炎病毒表面抗原阳性率占人群总数的10％ ～ 19％[2],在我国慢性乙型重型肝炎（CSHB）严重危害人民身体健康.     

慢性丙型肝炎患者对NS3／4A蛋白酶抑制剂预存耐药的研究

目的对我国南方184例无抗病毒治疗史的慢性丙型肝炎患者进行NS3／4A蛋白酶抑制剂相关耐药位点检测。方法NS3／4A蛋白酶抑制剂相关的耐药位点分析采用自行设计型别特异性引物行巢式PCR．PCR产物经纯化后采用直接测序法鉴定。结果184例样本中有162例扩增成功,其中125例（77．16％）患者共检出266个变异位点。HCVlb型A156S变异率为18．33％,V170I为16．67％;HCV2a型V36L、Q80G、V170I变异率为100％,A156S为64．29％;HCV6a型Q80K变异率为95．45％,V170I为98．86％。结论未使用抗病毒药的慢性丙型肝炎患者对NS3／4A蛋白酶抑制剂也存在预存耐药,变异率因HCV基因型而不同。1b型发生变异较少,HCV2a型及6a型普遍发生变异。     

慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA载量与肝组织病理改变的分析

[目的]探讨慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA载量与肝组织病理改变的关系.[方法]158例慢性乙肝患者根据血清HBeAg分为HBeAg阳性组和阴性组,回顾性分析血清HBV DNA载量与肝组织病理炎症分级、纤维化分期之间的关系.[结果]HBeAg阳性组105例与HBeAg阴性组53例血清HBV DNA载量(lg copies/mL)分别为6.6±1.9和4.8±2.5,二者相比P=0.000.HBeAg阳性组肝组织炎症活动度Go～1 6例、G2 74例、G3-4 25例,其血清HBV DNA载量(lg copies/mL)分别为5.6±1.1、6.5±2.0、7.0±1.5,三者血清HBV DNA载量无差异(P=0.250);肝组织纤维化程度S0～1 23例、S2 56例、S3-4 26例,其血清HBV DNA载量(lg copies/mL)分别为6.6±1.8、6.6±2.0、6.6±1.6,三者血清HBV DNA载量无差异(P=0.996).HBeAg阴性组肝组织炎症活动度G0-1 8例、G2 17例、G3-4 28例,其血清HBV DNA载量(lg copies/mL)分别为2.1±1.9、4.7±2.2、5.6±2.3,G2、G3-4者血清HBV DNA载量较G0-1者高(P=0.001),G2与G3-4者血清HBV DNA载量无差异(P=0.332);肝组织纤维化程度S0～1 10例、S2 25例、S3～4 18例,其血清HBV DNA载量(lg copies/mL)分别为2.7±3.2、5.1±1.8、5.4±2.4,S2、S3～4者血清HBV DNA载量较S0-1者高(P=0.005),S2与S3～4者血清HBV DNA载量无差异(P=0.745).[结论]HBeAg阳性乙肝患者血清HBV DNA载量与肝组织炎症及纤维化程度无关.HBeAg阴性乙型肝炎患者血清HBV DNA载量较高者其肝组织炎症及纤维化程度均较高.     

一氧化氮及内皮素对肝硬化患者动脉血氧分压的影响

目的探讨一氧化氮(NO)、内皮素(ET)对肝硬化患者动脉氧分压(PaO2)的影响。方法用硝酸还原酶法检测51例肝硬化组(其中Child-PughA、B、C级分别为19、21、11例)和31例对照组血浆中NO水平;放射免疫法检测受试对象血浆中ET水平;分别用自动血气分析仪检测动脉血氧水平和自动生化分析仪检测受试对象肝功能状态。结果肝硬化A、B、C三组动脉血氧分压(PaO2)显著低于对照组(31例)[分别为(79.43±6.33)mmHg(、78.88±8.99)mmHg及(72.60±5.27)mmHg对(88.33±6.60)mmHg(P<0.01)];肝硬化低氧血症组血浆中NO、ET水平及NO/ET值较非低氧血症组均明显升高。结论肝硬化患者动脉血氧分压与血浆中NO和ET水平及NO/ET值有明显负相关性,血浆中NO、ET及NO/ET的失衡在肝性低氧血症发病机制中有着重要作用。