人体蝇蛆病三例临床分析

蝇蛆病由蝇类幼虫寄生于人体组织或腔道内而致。病例 1患者女性 ,4 1岁 ,1997年 8月因工作原因于青海省牧区生活半月余 ,与牛、羊有密切接触史。 1997年 12月30日因胸、腰部皮下游走性钻痛感 2天而入院就诊。体征 :患者胸、腰部有多处抓痕 ,其膝关节外侧有一个核桃大小皮下结节 ,质韧 ,边界不清 ,无压痛及红肿 ,结节中央部有一针孔样窦道。血常规 :血WBC 7 6× 10 9/L ,中性 5 4× 10 9/L ,淋巴 1 5× 10 9/L ,嗜酸细胞计数 6 80 /mm3 。入院第二天 ,从右膝外皮下结节挤出一条乳白色虫体 ,长约 1 5cm ,鉴定为蝇类幼虫 ,诊断为皮下蝇蛆病…     

内眼手术眼部消毒前、后睑缘、结膜囊细菌培养分析

目的：通过对内眼手术眼局部消毒处理前后。睑缘、结膜囊细菌培养的分析。寻找出一种无菌、抑菌、无毒、无刺激的冲洗液。方法：白内障、青光眼患者60例（60眼）手术当日做术眼清洗处理前及清洗消毒处理后睑缘、结膜囊的普通细菌培养。结果：清洗处理前。60眼进行睑缘细菌培养,24眼有菌生长（阳性率40%）;清洗消毒处理后,7眼仍有菌生长（29.1%),清洗处理前,结膜囊细菌培养,17眼有菌生长（阳性率28.3%);清洗消毒后,5眼仍有菌生长（29.4%)。讨论：配制具有清洁、抑菌作用的冲洗液冲洗结膜囊,及具有去污、去脂、无菌、无菌、无刺激的皮肤清洁剂,可以进一步提高手术野及无菌率,保证手术的安全性和可靠性。     

疟原虫表观遗传学研究进展

疟原虫的生活史包括配子体、裂殖子、环状体等多个阶段,先后寄生在多种类型的宿主细胞才完成完整的生命周期。在这些生活史中的不同虫期,疟原虫表现出明显的表型差异;在应对生存环境的改变时,其基因表达能够很精确地做出应对。近年来诸多研究表明,无论是这些生命阶段的转换,还是对宿主的适应,疟原虫表观遗传学方面的调控都起了很大的作用。对疟原虫表观遗传学的研究,有利于深入了解疟原虫与宿主的相互作用机制,对防治疟疾工作具有重要意义。本文从组蛋白修饰、DNA甲基化、非编码RNA编辑等方面介绍目前疟原虫表观遗传学研究进展。     

2～3岁语言发育迟缓儿童的语言能力与父母述情障碍的关系

目的：探究2～3岁语言发育迟缓儿童的语言能力水平与父母述情障碍的关系。方法：选取2021年1月至6月于温州医科大学附属第二医院就诊的59例2～3岁语言发育迟缓儿童和其父母为研究对象,采用一般资料问卷、语言发育迟缓检查法、Gesell婴幼儿发展量表和多伦多述情障碍量表进行调查。结果：Pearson相关分析发现,父母的述情障碍得分与儿童语言发育迟缓（动作课题、符号理解、语言表达）得分呈显著负相关（P<0.05）。回归分析结果显示,父母的述情障碍越高,儿童语言发育迟缓（符号理解能力、动作性课题能力）能力越差（β=0.62,P<0.01;β=-0.60,P<0.01）。结论：父母的述情障碍越严重,儿童的语言发育迟缓程度越高。     

生长素诱导的蛋白敲减系统在刚地弓形虫Chinese 1虫株中的应用及验证

目的应用生长素诱导的蛋白敲减(AID)系统调控刚地弓形虫Chinese 1虫株中荧光蛋白的表达。方法人工合成3′端融合有标签FLAG的植物生长素受体--运输抑制剂响应蛋白1(TIR1)的核苷酸序列TIR1-FLAG,将其连接至pTub-e GFP-CAT载体中,构建pTub-TIR1-FLAG-CAT表达质粒;表达质粒经电穿孔转染至弓形虫Chinese 1虫株TgCtwh3,经氯霉素筛选和极限稀释后筛选单克隆虫株。PCR扩增及蛋白质免疫印迹(Western blotting)检测单克隆虫株中TIR1基因的插入和相应蛋白的表达,将验证正确的阳性克隆命名为TIR1虫株。构建表达荧光蛋白mCherry-Ty-AID报告基因的表达质粒pTub-mCherry-Ty-AID-DHFR,并通过电穿孔转染将其整合至TIR1虫株基因组中,乙胺嘧啶筛选后极限稀释筛选获得稳定表达mCherry-AID的虫株,命名为TIR1:m Cherry-AID虫株。将TIR1:mCherry-AID虫株的虫体分为吲哚乙酸(IAA)调控组和对照组,IAA调控组加IAA至终浓度500μmol/L,对照组加等量乙醇,培养3 h后,分别以抗TgGAP45和抗Ty-1抗体为一抗,间接免疫荧光试验(IFA)和Western blotting分析IAA调控下mCherry荧光蛋白的表达情况。结果PCR扩增结果显示,在1816 bp处有一条特异性扩增条带。Western blotting分析结果显示,抗FLAG-Tag抗体可识别TIR1虫株中相对分子质量(Mr)约70000的蛋白;Ty-1抗体可在TIR1:mCherry-AID虫株的对照组中检测到约Mr58000的特异性条带,与理论上C端融合了AID的mCherry-Ty蛋白大小相同;在IAA调控组中未检测到特异性条带。IFA结果显示,TIR1:mCherry-AID虫株对照组可见红色荧光蛋白,IAA调控组未检测到mCherry蛋白。结论应用AID系统可成功调控弓形虫Chinses 1虫株中mCherry荧光蛋白的表达。     

刚地弓形虫TgPRF的原核表达、多克隆抗体制备与应用

目的 原核表达弓形虫TgPRF蛋白,制备多克隆抗体并评价其作为内参抗体的可行性。方法 以刚地弓形虫RH株速殖子cDNA为模板,PCR扩增TgPRF编码基因,克隆至pGEX-4T-1载体,转化至大肠埃希氏菌（Escherichia coli）BL21。经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE分析重组蛋白表达情况。利用GST标签亲和层析法纯化重组蛋白。以纯化后蛋白为抗原免疫新西兰大白兔,制备抗TgPRF多克隆抗体。收集弓形虫RH株速殖子,以制备的多克隆抗体为一抗,Western blotting检测抗体特异性及效价。收集ATc调控下不同时间点的弓形虫iKO-Ty-TgAPH虫株速殖子进行Western blotting,以抗Ty和抗TgPRF抗体为一抗,检测TgAPH和TgPRF表达量的变化。结果 SDS-PAGE显示：TgPRF在诱导4 h后表达量趋于饱和,相对分子量为52 ku,且呈可溶性表达。弓形虫RH株速殖子总蛋白进行的Western blotting显示：抗TgPRF多克隆抗体可识别内源性的TgPRF,且该多克隆抗体稀释至1∶10 000时仍可见明显条带;iKO-Ty-TgAPH虫株速殖子总蛋白进行的Western blotting显示：TgAPH的表达量随ATc作用时间的增加呈递减趋势,而TgPRF表达量基本维持恒定。结论 本实验制备的抗TgPRF多克隆抗体特异性和效价良好,可作为衡量弓形虫特定蛋白表达量的内参抗体,也可直接检测内源性TgPRF的表达。     

62例输入性疟疾病原学特点分析

目的分析境外输入性疟疾疟原虫病原学特点。方法对62例北京友谊医院北京热带医学研究所2015年1—12月所确诊的输入性疟疾患者进行疟原虫虫种及感染阶段鉴定,计算红细胞感染率,并分析45例恶性疟患者红细胞感染率与血小板计数的关系。结果 62例患者通过血涂片确诊,恶性疟45例(72.5%),间日疟8例(12.9%),三日疟4例(6.5%),卵形疟5例(8.1%);50例(80.7%)可见环状体,8例(12.9%)可见大滋养体,2例(3.2%)可见裂殖体,2例(3.2%)可见配子体;31例红细胞感染率<2%,8例≥5%。恶性疟患者红细胞感染率越高,血小板计数越低。结论境外输入性疟疾病原学表现复杂,以恶性疟为主。感染疟原虫的定性与定量测定对于临床诊治均具有重要意义。     

棘阿米巴角膜炎的诊断和治疗探讨

目的 探讨棘阿米巴角膜炎的临床与实验室诊断方法,寻找有效滴眼液用以治疗。方法 观察分析２５例棘阿米巴角为感染各阶段的临床表现,通过角膜细胞学检查、阿米巴分离培养、角膜活检及组织病理学检查确诊,检测药物对棘阿米巴的抗原虫作用及临床疗效。结果感染自角膜上皮层开始,进行性侵入基质致盲。细胞泞凶世囊和／或滚养体（８８．９％）。棘阿米巴培养阳性率５７．９％。洗必泰、甲硝唑滴眼液治疗棘阿米巴角膜炎有良效。抗     

基于CLINPROT技术鉴定弓形虫感染的血清分子标志物

目的旨在通过液体蛋白芯片-MS/MS技术(即CLINPROT技术)发现并鉴定弓形虫感染的血清分子标记物,并分析其应用于临床检测的敏感性和特异性。方法运用CLINPROT技术对弓形虫感染患者的血清样本进行分析,并进一步采用蛋白电泳、质谱鉴定等方法对筛选的蛋白分子进行鉴定,最后通过ELISA方法对其在健康正常人和弓形虫感染患者的血清样品中的表达情况进行了检测,并采用ROC曲线评价了其临床应用价值。结果通过CLINPROT技术,发现了一个在弓形虫感染的血清样本中特异性上调的蛋白,进一步通过蛋白电泳和质谱鉴定方法,发现该特异性上调蛋白为SAA;采用ROC曲线分析显示,其敏感性和特异性分别为84.1%和80%。结论可将CLINPROT技术应用于弓形虫感染血清分子标记物的寻找和鉴定;可将SAA蛋白用作为弓形虫感染的血清分子标志物。