鸡羽根管作为组织工程支架材料的初步研究

目的 了解鸡羽根的结构特点,观察其在活体组织内的降解情况及其对周围组织的影响,为其作为组织工程备选支架材料提供依据.方法 健康鸡羽根,采用序贯的、不同程度(轻、中、重)理化处理程序,得到3种鸡羽根角蛋白(CCK-Ⅰ、CCK-Ⅱ、CCK-Ⅲ),光学显微镜/扫描电镜观察其形态结构.大鼠背部肌组织内植入鸡羽根角蛋白片(实验组)和未处理鸡羽根片(对照组),以及坐骨神经束间植入鸡羽根角蛋白丝(实验组)和未处理羽根丝(对照组),于不同时间点取材,观察其降解情况和组织相容性.结果 (1)光镜:鸡羽根管壁从内到外依次为4个致密层:嗜碱性均质状粗线,3～5层的嗜酸性角质层,60～100层含大量色素颗粒的环行角蛋白束和10～20层含少量色素颗粒的角蛋白束.扫描电镜:未处理的鸡羽根结构致密,管壁平整,无孔洞;处理后结构较疏松,可见大小、深浅不等的孔洞.(2)肌组织内植入:第8周材料呈细丝状或散在细颗粒状,部分被降解吸收,仍有少量炎性细胞,可见多核巨细胞;第12周材料降解为细小碎片.对照组各时间段材料结构完整.(3)神经束间植入:引起的组织反应与细胞类型同肌组织内植入组,神经组织无变性、坏死.结论 未处理的鸡羽根由多层致密的角蛋白束构成,含色素颗粒和少量基质.处理后表面出现许多孔洞,结构疏松,且体内可降解,其降解产物不引起机体组织的变性、坏死.鸡羽根有可能成为组织工程化器官或组织构建的备用支架材料.     

主动脉平滑肌细胞在三维培养中产生弹性纤维的研究

目的 研究主动脉平滑肌细胞(ASMC)在仿真皮替代物的三维培养中是否能产生弹性纤维。方法 取1周龄SD大鼠胸主动脉,进行原代和传代培养,以α肌动蛋白免疫细胞化学染色鉴定平滑肌细胞。然后,将ASMC与胶原、甲壳素及糖胺多糖组合形成的凝胶混合,进行三维培养;培养1周和2周后,用Gomori醛复红染色和弹性蛋白免疫细胞化学染色,检测ASMC胶原凝胶。结果传代细胞经α肌动蛋白免疫细胞化学染色鉴定,98％以上为ASMC。培养1周和2周的ASMC胶原凝胶中,均显示有弹性纤维存在。结论 ASMC在仿真皮替代物的三维培养中能够产生弹性蛋白,并形成弹性纤维。     

小鼠肝脏细胞摄取Pu的动态研究—电镜和X射线微区分析术的观察

在给小鼠１次静脉注射氯化Ｐｕ（６０ｍｇ／ｋｇ体重）后５ｍｉｎ至４８ｈ内的９个间期应用电镜结合Ｘ射线微区分析术，对Ｐｕ在肝细胞与枯否细胞中的运转进行了追踪观察。在５ｍｉｎ～２ｈ，两种细胞均以胞吞方式摄取肝血窦中含Ｐｕ微粒，在胞质中形成吞噬体。在吞噬体内，微粒群处于由稀疏至密集的浓缩过程，小吞噬体互相融合。这种胞吞作用在枯否细胞极为活跃，在肝细胞则较微弱。在４～４８ｈ，许多枯否细胞的胞质几乎被吞噬体充     

创伤修复过程中的血管再生与碱性成纤维细胞生长因子表达

应用免疫组织化学法动态追踪了大鼠创伤组织修复过程中的血管再生与碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的表达状态。结果显示,创伤组织中仅少部分内皮细胞呈bFGF阳性，而密集的成纤维细胞以及巨噬细胞均呈bFGF阳性。提示局部高浓度的bFGF可能是刺激内皮细胞增殖并导致血管再生的重要因素。     

主动脉平滑肌细胞的三维培养研究

目的：研究主动脉平滑肌细胞（aortic smooth muscle cell,ASMC)在三维培养中是否仍能产生弹性蛋白。方法：取一周龄SD大鼠胸主动脉，经原代、传代培养后，和胶原、血清及培养 液混合形成ASMC胶原凝胶，进行三维培养；培养2周后用Gomori醛复红弹性纤维染色和弹性蛋白免疫组织化学染色，检测细胞胶原凝胶中所产生的弹性纤维，并进行电镜观察。结果：传代细胞经α肌动蛋白免疫组织化学染色鉴定，98％以上为ASMC。培养2周的ASMC胶原凝胶切片用二种染色方法均可显示有弹性纤维存在，电镜观察细胞超微结构呈典型的合成表型。结论：ASMC在三难培养中能够产生弹性蛋白，并形成弹性纤维。     

主动脉平滑肌细胞的三维培养研究

目的研究主动脉平滑肌细胞(aortic smooth muscle cell,ASMC)在三维培养中是否仍能产生弹性蛋白。方法取一周龄SD大鼠胸主动脉,经原代、传代培养后,和胶原、血清及培养液混合形成ASMC胶原凝胶,进行三维培养;培养2周后用Comori醛复红弹性纤维染色和弹性蛋白免疫组织化学染色,检测细胞胶原凝胶中所产生的弹性纤维,并进行电镜观察。结果传代细胞经α肌动蛋白免疫组织化学染色鉴定,98％以上为ASMC。培养2周的ASMC胶原凝胶切片用二种染色方法均可显示有弹性纤维存在,电镜观察细胞超微结构呈典型的合成表型。结论 ASM在三难培养中能够产生弹性蛋白,并形成弹性纤维。     

弹性蛋白免疫组织化学染色与醛复红弹性纤维染色方法的比较

传统的显示弹性纤维的Gomori醛复红染色法(简称醛复红法)步骤简单、结果稳定,故使用较为广泛。弹性蛋白免疫组织化学染色法特异性强,但需要昂贵的抗体,且操作过程耗时长。我们发现,这两种方法的染色结果具有相同性,又具有一定的差异,特作此比较。     

鸡羽根角蛋白管毒性作用的研究

目的 观察鸡羽根角蛋白管作为组织工程材料的毒性作用.方法 分别制备不同处理强度的3种鸡羽根角蛋白管的浸提液并测定其化学成分.采用皮肤致敏实验(大鼠)、皮内刺激实验(家兔)、小鼠全身急性毒性实验以及体外细胞毒性实验观察鸡羽根角蛋白管浸提液的体内和体外毒性作用.结果 鸡羽根在浸出液中释放的主要物质为中等分子量的肽类物质,大分子蛋白释放不多.皮肤致敏实验和皮内刺激实验显示对浸提液不引起皮肤及皮内红斑、水肿和坏死现象.小鼠全身急性毒性实验中,腹腔注射浸提液的小鼠未出现死亡、衰竭、发绀、震颤、严重的腹膜刺激、眼睑下垂及呼吸困难等毒性症状.体外细胞毒性实验示浸提液细胞毒性接近于0级.结论 鸡羽根角蛋白管可被水解,释放一些肽类物质,其浸提液对皮肤无致敏作用,皮内刺激反应弱,不引起全身急性毒性症状,无细胞毒性.     

黄韧带的弹性改变和钙化

黄韧带组织成分的70%～80%为弹性纤维,因此赋予脊柱以良好的弹性.在衰老、损伤、异常含量的微量元素及遗传等因素作用下,黄韧带中出现弹性纤维变性减少,胶原纤维增多,钙盐结晶沉积,以致骨化.