细胞信号转导JAK-STAT途径的研究进展

细胞信号转导JAK-STAT途径是当前分子生物学研究领域的主题之一。对其深入研究,将为揭示细胞因子对免疫功能的调节、血细胞生成以及神经和胚胎发育中所发挥的既特异又具多效性的生物学功能,提供了分子生物学机理。本文以IFNγ为例,阐述了JAK-STAT途径的信号转导机制,并对T细胞和神经细胞在相关细胞因子作用下,通过不同的JAK-STAT途径出现的生理效应及由抗原(抗sIg Fab)所引发的BCR偶联发现的迟发型JAK-STAT途径作了介绍。     

流式细胞术检测恶性肿瘤患者T淋巴细胞活化抗原的临床意义

目的 研究恶性肿瘤患者的免疫状态及其治疗前后的变化。方法 在荧光单抗直接标记后,用流式细胞术检测５２例癌症病人外周血的淋巴细胞标志抗原和Ｔ淋巴细胞活化抗原,并对其中１５例免疫增强剂治疗前后的抗原表达结果进行比较。结果 恶性肿瘤患者的ＣＤ３＾＋、ＣＤ４＾＋细胞及ＣＤ４＾＋／ＣＤ８＾＋比值较对照组显著减少（Ｐ〈０．０５或０．０１）,而ＣＤ８＾＋细胞显著增多（Ｐ〈０．０１）。１５例治疗后ＣＤ３＾＋、ＣＤ     

大萼香茶菜甲素对白血病细胞株Kasumi-1体外作用的研究

目的：观察大萼香茶菜甲素（macrocalyxin A,MA）体外对Kasumi-1细胞增殖、分化、凋亡的作用。方法：以不同质量浓度的（4、8、12、16μg/mL）MA体外作用于Kasumi-1细胞,运用细胞计数、MTT比色法检测细胞生长抑制率;细胞形态学、细胞免疫表型CD11b、CD13检测研究细胞分化;细胞形态学、Hoechst 33258荧光染色、DNA梯度电泳观察细胞凋亡;DNA亚二倍体及Annexin-V/PI双标记检测细胞凋亡率;质谱分析技术检测用药前后细胞小分子蛋白变化。结果：MA对Kasumi-1细胞有明显的抑制增殖作用,呈现作用时间和剂量的量效关系。较低浓度MA可以诱导细胞分化,CD11b表达明显上升,且有剂量量效关系;高浓度促进细胞凋亡,细胞瑞氏染色后出现典型的凋亡小体,亚G1峰显著增加,Annexin-V＋/PI-表达升高,Hoechst33258荧光染色出现凋亡特征性改变,琼脂糖电泳观察到DNA＂梯状条带＂。质谱分析显示,药物作用组与空白组对照分析出现13个差异蛋白峰,质荷比集中在1053-8581之间。结论：MA能抑制Kasumi-1细胞增殖,促进细胞分化,诱导细胞凋亡的作用。     

表达载体pRSET C重组rhTNF—β的表达及其纯化

将ｈＴＮＦ－β Ｎ端缺失２３个氨基酸的基因,克隆在表达载体ｐＲＳＥＴ Ｃ的６个组氨酸序列和肠激酶酶切位点序列的下游,以重组质粒转化大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）,经ＩＰＴＧ诱导,ｒｈＴＮＦ－β获得了高表达,表达量占细胞总蛋白的２６％,其表达产物大部分以可溶性形式形成。菌体裂解上清经０．４５μｍ的滤膜过滤后,用固定化金属配体亲和柱层析,纯度可达９５％左右;经肠激酶酶切后,具有ＴＮＦ－β的细胞毒活性,此活     

哮喘患者白细胞表面分化抗原23的表达与IgE的相关性研究

目的研究哮喘的发病机制,探讨哮喘患者白细胞表面分化抗原(CD)23的表达及与血清IgE的相关性.方法用流式细胞术检测22例典型哮喘、18例咳嗽变异型哮喘、20例喘息性支气管炎、20例肺炎和25名正常对照者的外周血淋巴细胞CD19阳性、CD23阳性、CD23和CD19双阳性细胞(CD19+、CD23+、CD19+/CD23+)的百分率,同时用免疫化学发光法检测血清IgE水平,并进行相关性研究.结果典型哮喘、咳嗽变异型哮喘患者外周血淋巴细胞CD19+、CD23+、CD19+/CD23+的百分率和血清IgE分别为(13.56±5.87)%、(26.56±7.61)%、(12.86±5.01)%、(12.67±7.56)μmol/L和(13.10±5.15)%、(24.66±8.15)%、(12.10±4.97)%、(9.45±4.16)μmol/L,明显高于正常对照组(7.95±3.65)%、(14.92±3.02)%、(6.82±2.95)%、(3.10±1.68)μmol/L和肺炎组(P<0.01),CD19+、CD23+、CD19+/CD23+与血清IgE水平呈显著正相关.喘息性支气管Ⅰ组外周血淋巴细胞CD19+、CD23+、CD19+/CD23+及血清IgE也显著高于正常对照组和肺炎组及喘息性支气管炎Ⅱ组,喘息性支气管炎Ⅱ组的上述指标与正常对照组和肺炎组差异无显著性.结论淋巴细胞CD23的表达和血清IgE在哮喘的发病机制中发挥重要的作用,两者密切相关.部分喘息性支气管炎的发病机理与哮喘相同.测定淋巴细胞CD23的表达对于早期判断喘息性支气管炎的预后具有重要的临床意义.     

ITP患者血小板自身抗体的检测及治疗中中性粒细胞变化的意义

目的探讨特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者血小板自身抗体（PAIgG、PAIgM）水平和治疗中中性粒细胞减少的意义。方法应用流式细胞仪（FCM）检测本院46例ITP患者及29例正常对照组血小板相关抗体（PAIgG、PAIgM）水平并观察患者使用免疫球蛋白前后中性粒细胞的变化。结果ITP组PAIgG、PAIgM明显高于正常对照组（P〈0．05或P〈0．01），其中27例免疫球蛋白治疗后中性粒细胞显著减少（P〈0．01）。结论PAIgG、PAIgM水平是辅助诊断ITP的一种可靠方法，丙种球蛋白治疗后中性粒细胞下降易误诊为骨髓疾病的早期症状，临床上应注意鉴别。     

胃癌组织中CD44的表达水平及其临床意义研究

目的测定细胞粘附分子CD44在胃癌组织中的表达水平并探讨其临床意义。方法 应用流式细胞免疫学方法测定40例手术切除的新鲜胃癌组织及正常胃粘膜组织中CD44的表达水平。结果 胃癌组织及正常胃粘膜组织中均有CD44表达，但胃癌组织中阳性细胞数百分比较正常胃粘膜组织明显增高(P＜0.05)；CD44的表达水平与肿瘤侵润深度、淋巴结转移、远处转移有关(均P＜0.05)，且与肿瘤pTNM分期关系密切(P＜0.05)。结论测定胃癌组织中CD44的水平对判断胃癌侵润、转移及病期进展情况有一定的帮助，CD44高水平表达常提示胃癌恶性程度较高且病期较晚，临床上对CD44水平高的病例应采取更加积极有效的治疗措施。     

乙肝患者外周血ICAM-1的检测意义

探讨乙肝患者外周血中性粒细胞细胞间粘附分子-1(ICAM-1)的变化及其意义。应用流式细胞仪检 测28例慢性轻度肝炎,24例慢性中、重度肝炎,28例肝硬化患者外周血ICAM-1的表达,同时Beckman公司生化仪 CX4测定了ALT。肝炎和肝硬化患者外周血中性粒细胞的ICAM-1表达和血清ALT水平都显著高于正常对照组。 实验组中两两比较发现慢性轻度肝炎与慢性中、重度肝炎、肝硬化ICAM-1、ALT之间有明显差异,肝硬化患者与慢 性中、重度肝炎之间无明显差异。同时发现ICAM-1的过度表达与血清ALT的活性呈正相关。ICAM-1水平可作 为反映肝炎后肝病患者肝损害程度的指标之一。     

人脐血造血细胞扩增后表面标志的动态研究

目的 探讨脐血造血细胞体外扩增及其移植的最佳时机。方法 用粒细胞集落刺激因子、粒－巨噬细胞集落刺激因子、重组人白细胞介素３、重组白细胞介素６、干细胞因子和红细胞生成素长期培养脐血造血细胞,并对其表面标志及细胞增殖周期进行动态分析。结果 脐血中ＣＤ３＾＋细胞、ＣＤ４＾＋／ＣＤ４５ＲＯ＾＋和ＣＤ８＾＋／ＣＤ４５ＲＯ＾＋细胞培养３ｄ稍有增加,培养７ｄ达高峰,１４ｄ显下降,培养２１ｄ时处于更低水平。ＣＤ     

四嗪二甲酰胺对肺癌细胞株A549的体内外作用

为了观察四嗪二甲酰胺(ZGDHu-1)体外抑制肺癌细胞株A549增殖、诱导细胞凋亡和体内抗肿瘤活性的作用及其机制，将不同浓度的ZGDHu-1与A549细胞在体外培养，用台盼蓝染色、SRB法、5′-溴-2′脱氧尿苷-ELISA法，观察ZGDHu-1对A549细胞增殖的作用；用细胞形态学、DNA凝胶电泳、DNA含量及细胞周期分析、Annexin V/PI双标记、Hoechst 33258荧光染色等技术检测细胞凋亡。腹腔注射ZGDHu-1后观察其对裸鼠移植瘤生长的抑制作用。用RT-PCR和流式细胞术观察A549细胞bcl-2，bax，p53基因和蛋白质的表达改变。结果表明，ZGDHu-1能抑制A549细胞的增殖和活力，呈现作用时间和剂量的依赖关系。A549细胞经ZGDHu-1作用后，大部分细胞阻滞于G₂-M期；出现DNA片段化，亚G₁峰显著增加，Annexin V+/PI-表达升高，Hoechst 33258荧光染色后出现凋亡细胞的特征性改变等。ZGDHu-1以10，20及40 mg·kg^-1剂量给裸鼠体内用药14 d后，移植瘤生长抑制率分别为43.7%，56.9%和60.0%。A549细胞经ZGDHu-1作用后，bcl-2基因和蛋白有所下调，但主要是上调bax基因和蛋白，导致bax/bcl-2比值明显增高，p53基因和蛋白表达也上调，均呈现剂量依赖性。ZGDHu-1在体内能明显抑制移植瘤的生长，体外通过诱导细胞凋亡抑制A549细胞增殖，其机制可能与上调bax和p53基因的表达有关。