薄层层析法测定安心注射液中关附甲素的含量

薄层层析法测定安心注射液中关附甲素的含量邱宁婴，叶敬辉，袁绍莉，刘静涵（中国药科大学分析计算中心；植物化学教研室，南京２１０００９）关键词安心注射液；关附甲素；薄层层析法关附甲素（ＧｕａｎｆｕｂａｓｅＡ）为黄花乌头［Ａ－ｃｏｎｉｔｕｍｃｏｒｅａｎｕｍ...     

抗心律失常新药关附甲素血浓度测定的方法学研究

抗心律失常新药关附甲素(Guan-fu base A,GFA)为一种 C_(20)-二萜类生物碱,1966年由我国首次从黄花乌头(Aconitum coreanum(Levl.)Raipaics)的块根中分离得到。GFA与三氟醋酐(TFAA)反应,迅速定量地生成关附甲素双-三氟乙酸酯(GFA-TFAA),其结构经 GC-MSD 分析得到证实。GC-ECD 法对 GFA 的检测线性范围宽(10—20000ng/ml,r=0.9984),血浆中平均回收率为97.52%。日间及日内差的变异系数分别为9%及7%以下。该法用于 GFA 的临床前药理研究。GFA 三种剂量静脉给药6小时内的家兔血药浓度范围是:0.338±0.014至13.459±5.392μg/ml(10mg/kg),0.133±0.038至2.546±0.480μg/ml(2mg/kg)以及45.25±10.34至535.86±24.36 ng/ml(0.4 mg/kg)。     

96例儿童弱视立体视治疗分析

目的 总结96例弱视儿童的立体视状况，探讨治疗方法。方法 应用包括传统遮盖法，后像法，红光闪烁法，同视机，弱视刺激治疗仪多种方法综合治疗。结果 通过治疗，96例患者基本治愈59例（62%）好转34例（35%），无效3例（3%），总有效率97%。结论 综合疗法治疗弱视，建立立体视是有效的。     

应用SPA的ELISA检测血清胰岛素抗体

应用SPA代替抗人IgG第二抗体的ELISA测定血清胰岛素抗体(IA)。经正交试验分析,受检血清稀释度是影响IA测定的主要因素。选用胰岛素包被浓度为10μg/ml,受检血清1:2.5稀释时,IA测定可获较满意的结果。竞争性结合抑制试验表明IA测定具有特异性。血清稀释试验提示OD值大小反映了IA滴度高低。28例正常人血清IA测定结果OD正常值范围(X±2SD)为0.05～0.25。使用胰岛素的DM病例均为阳性,而未使用胰岛素病例未发现IA阳性。本文认为应用该法测定IA是一种稳定、特异、简便的方法。     

健康教育路径对独居代谢综合征患者自我效能和生活质量的影响

目的 探讨健康教育路径护理对独居代谢综合征患者自我效能和生活质量的影响.方法 采用便利抽样法选110例独居代谢综合征患者作为研究对象.对照组采用传统的代谢综合征教育方法进行干预,观察组在传统教育方法干预的基础上接受健康教育路径护理.采用慢性病自我效能量表评价患者的自我效能、生活质量指数评定量表(QOL)对患者的生活质量进行评价.结果 干预前后,观察组患者组内BMI、空腹腰围、FPG、HbAlc、PBG2h、HDL-C、自我效能和生活质量差异有统计学意义;干预前后,对照组患者组内BMI、空腹腰围、FPG、HbAlc、PBG 2 h、自我效能和生活质量差异有统计学意义;干预后,观察组患者的BMI、空腹腰围、HbAlc、HDL-C、自我效能和生活质量的改善程度优于对照组,差异有统计学意义.结论 对于独居代谢综合征患者,健康教育路径理能够改善患者的糖代谢和脂代谢指标,提升患者的自我效能和生活质量.     

肝组织中HBV cccDNA荧光定量聚合酶链反应检测法的建立

目的 建立和优化一种灵敏、特异的检测肝组织中乙型肝炎(乙肝)病毒(HBV)共价闭合环状DNA(cccDNA)荧光定量聚合酶链反应(荧光定量PCR).方法 设计检测HBV DNA(tDNA)和cccDNA特异性引物及探针,用3.44×10⁰-3.44×10⁹copies/μl含HBV全基因组序列(C基因型)质粒作为标准品,建立荧光定量PCR检测标准曲线.取33例乙肝肝癌患者肝组织标本、13例慢性乙肝患者肝活检组织标本和10例非乙肝患者肝组织标本,验证该法灵敏度和特异度.提取肝组织中DNA,取一部分进行质粒安全ATP依赖的DNA酶(PSAD)酶切;另一部分不酶切作为tDNA和β-globin检测样本,分别进行HBV cccDNA、tDNA和p-globin定量检测,以β-globin为参比,对每个细胞的HBV cccDNA和tDNA含量进行标准化.结果 检测肝组织中HBV cccDNA和tDNA定量的线型范围均为3.44 × 10⁰-3.44×10⁹ copies/μl.检测HBV cccDNA和HBV DNA下限均为3.44×10⁰copies/μl.33例乙肝肝癌患者和13例慢性乙肝患者的肝组织中HBV cccDNA最低含量分别为0.003 copies/cell和0.031 copies/cell;检测10份非乙肝肝癌患者的肝组织标本均为阴性.应用PSAD消化肝组织中提取的DNA可减少假阳性,提高cccDNA检测法特异度达7.24× 10²倍.对2例乙肝肝癌患者的肝组织标本重复检测5次,Ct值的变异系数为0.224%～0.609%.结论 该方法灵敏度和特异度高,重复性好,可用于检测肝组织中HBV cccDNA.     

肝组织中HBV cccDNA荧光定量聚合酶链反应检测法的建立

Objective To establish and optimize a sensitive and specific quantitative realtime polymerase chain reaction(PCR)method for detection of hepatitis B virus covalently closed circular DNA(HBV cccDNA)in liver tissue. Methods Specific primers and probes were designed to detect HBV DNA(tDNA)and cccDNA. A series of plasmids(3.44 × 100-3.44 × 109 copies/μl)containing a full double-stranded copies of HBV genome(genotype C)were used to establish the standard curve of real-time PCR. Liver samples of 33 patients with HBV related hepatocellular carcinoma(HCC), 13 Chronic hepatitis B patients(CHB)and 10 non-HBV patients were collected to verify the sensitivity and specificity of the assay. A fraction of extracted DNA was digested with a Plasmid-Safe ATP-dependent Dnase(PSAD)for HBV cccDNA detection and the remaining was used for tDNA and β-globin detection. The amount(copies/cell)of HBV cccDNA and tDNA were measured by a real-time PCR, using β-globin housekeeping gene as a quantitation standard. Results The standard curves of real-time PCR with a linear range of 3.44 × 100 to 3.44 × 109 copies/μl were established for detecting HBV cccDNA and tDNA, and both of the lowest detection limits of HBV cccDNA and tDNA were 3.44 × 100 copies/μl. The lowest quantitation levels of HBV cccDNA in liver tissues tested in 33 HBV related HCC patients and 13 CHB patients were 0.003 copies/cell and 0.031copies/cell, respectively. HBV cccDNA and tDNA in liver tissue of 10 non-HBV patient appeared to be negative. The true positive rate was increasing through the digestion of HBV DNA by PSAD, and the analytic specificity of cccDNA detection improved by 7.24 × 102 times. Liver tissues of 2 patients were retested 5 times in the PCR for detecting cccDNA and the coefficience of variations on cycle threshold (Ct)were between 0.224%-0.609%. Conclusion A highly sensitive and specific quantitative real time PCR method for the detection of HBV cccDNA in liver tissue was established and could be used for clinical and epidemiological studies.     

分析小青龙汤(加减)、穴位敷贴联合治疗哮喘临床疗效

目的对哮喘患者采取小青龙汤(加减)、穴位敷贴联合治疗,并观察其临床疗效。方法选取2016年1月至2018年1月,到我院进行治疗的90例支气管哮喘患者,将其分为两组。对照组45例,采取常规西医治疗;观察组45例,采取小青龙汤+穴位敷贴治疗。结果观察组治疗有效率为97.78%,对照组为80%,差异明显(P0.05);观察组患者咯痰、夜间憋喘、喘息、双肺哮鸣音等症状的控制时间均明显短于对照组(P0.05)。结论对哮喘患者采取小青龙汤(加减)、穴位敷贴联合治疗,能够提高治疗效果,缩短临床症状控制时间,具有推广价值。     

冲洗对屠宰猪加工卫生质量影响的试验研究

本试验对10头白毛猪于放血后,剥皮后和劈半后进行水冲洗前后,分别在其体表和背部、腹部和肛口周围等部位取样进行细菌总数测定,以观察其水冲洗的卫生效果。 结果表明:在猪只的整个屠宰加工过程中,经过放血后,剥皮后以及劈半后,进行三次水冲洗,其体表细菌总数可减少100—1000倍,对提高猪白条肉的加工卫生质量有很好的效果。