CD_4~+CD_(25)~+调节性T细胞及其在GVHD和GVT中的作用

正常机体的免疫系统在有病原体或是肿瘤细胞出现时能够有效地产生免疫应答，同时对其自身组织抗原产生免疫耐受，以避免自身免疫性疾病的发生。免疫耐受是保持机体内环境稳定的一个重要机制，它包括中枢耐受和外周耐受。近几年来，人们发现在T细胞中存在着一种特殊作用的调节细胞，即CD4^＋CD25^＋调节性T细胞，它能抑制效应性T细胞的免疫反应，在主动诱导外周免疫耐受过程中承担着重要作用。     

活化性杀伤细胞免疫球蛋白样受体阳性的NK细胞对靶细胞的杀伤作用

Objective To study the killing effects of the killer cell immunoglobutin-like receptors (KIR) KIR2DS1-positive natural killer (NK) cells against acute, myeloid leukemia (AML) target cells, and to explore the KIR, human leucocyte antigen-Cw, and Cw loci (HLA-Cw) of NK cells, and, HLA-Cw of target cells mismatches destruction mechanism. Methods High-purified NK cells separated by DNYAL bead negative selection from healthy donor peripheral blood were taken as effector cells, and the freshly isolated bone marrow mononuclear cells from newly diagnosed AML patients as target cells. The anti-CD158a, CD158b monoclonal antibody was used to block inhibitory KLR receptors of NK cells (such as: KIR2DL1, KIR2DL2, KIR2DL3). The NK cells cytotoxicities against target cells before and after KIR blockades were detected by MTT reduction assay in vitro. Polymerase chain reaction and sequence specific primers (PCR-SSP) genotyping techniques were used to detect HLA-Cw, KIR gene of the healthy donors and patients. NK cells and target cells were divided into group C1 (expressing HLA-Cw 01, 03, 07, 08, 12, 14, 16 alleles), C2 group (expressing HLA-Cw 02, 04, 05, 06, 15, 17, 18 alleles) and the C1/C2 group (co-expressing the alleles in C1 group and C2 group) based on HLA-Cw. Results The purity of NK cells analyzed by flow cytometry was (90.8±6.08)%, and the killing effects of NK cells were significantly enhanced after inhibitory KIR blockades (t=-3.00, P=0.005). The cell lysis in C1 group, KIR2DS1+ NK cells against C2 group target cells (57.37±1.40)% was significantly higher than that against C1 group (44.19±4.67) % and C1/C2 group (36.77±6.56)% target cells (F= 11.87, P = 0.021), furthermore the differences in cell lysis among the above three groups become more evident after the inhibitory KIR blockades (F = 18. 72, P=0. 009). Conclusions The activity of NK cells was increased after the inhibitory KIR blockades, and the killing activities of KIR2DS1+ NK cells were higher than KIR2DS1 NK cells. The incompatibility between KIR, HLA-Cw of NK cells and HLA-Cw of target cells mediated NK alloactivation, realizing "missing self" recognition, and enabling NK cells cytotoxieity against targets.     

癌性胸水肿瘤浸润淋巴细胞的增殖力、表型和杀伤细胞活性的研究

探讨癌性胸水中肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)的生物学特性,便于更好地应用于临床.用低浓度白细胞介素2(IL-2)诱导培养癌性胸水TIL,按常规法计数TIL细胞增殖量,采用流式细胞仪分析TIL细胞表型及MTT法检测其杀伤细胞活性.经低浓度IL-2(10U/ml)诱导培养TIL21d后,TIL增殖倍数为2130±1140,大于1000倍占72%.CD3无显著性变化(P>0.05),CD4,CD8有显著性差异(P<0.01),而CD4/CD8     

冻融抗原负载树突状细胞诱导细胞毒性T淋巴细胞特异性杀伤急性白血病细胞的实验研究

我们应用基因重组人白介素 4 (rhIL 4 ) ,基因重组人粒 /单细胞集落刺激因子 (rhGM CSF)联合培养体系自健康志愿者骨髓单个核细胞诱导产生DC ,使其负载急性髓系白血病 (AML)细胞冻融抗原 ,体外诱导细胞毒性T细胞 (CTL) ,观察负载AML细胞冻融抗原后DC的状态对所激发的T淋巴细胞表型及功能的影响及CTL对AML细胞特异性杀伤活性。我们发现负载AML冻融抗原后DC的CD1a、CD83、CD86、CD11C、HLA DR表达率为较培养前明显增高 (P <0 .0 1) ,且负载AML冻融抗原的DC诱导的CTL中CD3 CD8 T细胞比例 ,较诱导前明显增高 (P <0 .0 1) ,而负载AML细胞冻融抗原的DC诱导CTL对AML细胞有较强的杀伤作用 ,明显强于加或不加IL 2培养的T细胞对照组 (P <0 .0 1) ,而对K5 6 2细胞无明显的杀伤活性。通过以上实验我们认为经rhGM CSF ,rhIL 4培养产生的DC为CD14CD1a DC ,能诱导CTL对AML细胞产生明显的特异性杀伤作用 ,另外 ,负载AML细胞冻融抗原DC诱导的CTL中CD3 CD8 T细胞比例明显增高 ,提示CD8 T细胞在抗肿瘤免疫中具有极其重要的作用。     

乳腺癌患者T细胞亚群的变化及其意义

为研究乳腺癌患者的细胞免疫状态,应用流式细胞仪检测了３２ 例乳腺癌患者的 Ｔ 细胞亚群,并与良性疾病患者对比分析。结果：乳腺癌患者 Ｃ Ｄ３ 、 Ｃ Ｄ４ 较对照组明显降低（ Ｐ＜ ０ ．００５） , Ｃ Ｄ８ 较对照组明显升高（ Ｐ＜０ ．００５） , Ｃ Ｄ４／ Ｃ Ｄ８ 比值明显低于对照组（ Ｐ＜ ０ ．０１） ,而乳腺癌转移组与非转移组之间 Ｃ Ｄ３ 、 Ｃ Ｄ４ 、 Ｃ Ｄ８ 、 Ｃ Ｄ４／ Ｃ Ｄ８ 比值无明显差异。提示乳腺癌患者细胞免疫功能显著低下,但转移组与非转移组之间无明显差异。     

CD4＋CD25＋CD127^lowTregs及TGF-β在多发性骨髓瘤患者外周血的表达分析

目的：初步探讨CD4＋CD25＋/highCD127lowT调节性T细胞（Tregs）及TGF-β在不同病程阶段多发性骨髓瘤（MM）患者外周血中的表达水平,并研究患者血清TGF-β水平是否与CD4＋CD25＋/highCD127lowTregs具有相关性。方法：流式细胞术（FCM）检测50例MM患者及30例健康志愿者外周静脉血CD4＋CD25＋/highCD127lowTregs细胞的比例并分析比较。ELISA法定量检测血清TGF-β的表达水平。结果：（1）化疗后组CD4＋CD25＋CD127low、CD4＋CD25highCD127lowT细胞的比例均显高于初诊组及正常对照组;初诊组与正常对照组的CD4＋CD25＋CD127lowT细胞相比无统计学意义,但其CD4＋CD25highCD127lowT细胞明显高于正常对照组。（2）化疗后稳定期CD4＋CD25＋CD127lowT细胞与活动期没有差异,但其CD4＋CD25highCD127lowT细胞明显低于活动期。（3）MM各组TGF-β水平均较对照组明显升高,但各组比较无统计学意义。（4）TGF-β与CD4＋CD25＋CD127^low、CD4＋CD25highCD127lowT细胞的表达水平均不成相关性。结论：CD4＋CD25＋/highCD127low调节性T细胞MM患者外周血中比例明显升高,且化疗及疾病进展程度可能影响其在外周血的比例。TGF-β可能不是导致其比例增加的直接原因。     

树突状细胞扩增抗原特异性CD4+ CD25+调节性T细胞研究进展

CD4+CD25+调节性T细胞(Tr)是同时具有免疫低反应性和免疫抑制性功能两大特征的T细胞.研究证实,CD4+ CD25+ Tr在抑制器官特异性自身免疫性疾病及GVHD是抗原特异性的,因此,应用器官特异性而不是多克隆性的Tr将大大促进以Tr为基础的免疫治疗.而具有调节活性的CD4+ CD25+ Tr仅占人类外周血CIM+ T细胞的1%～2%,因此,研究体外大量扩增的方法 对于以Tr基础的治疗至关重要.研究表明,树突状细胞(DC)作为机体强有力的专职抗原递呈细胞可以扩增具有抗原特异性的CD4+ CD25+ Tr且能增加后者的抑制活性,这为治疗自身免疫性疾病及GVHD提供了新的治疗前景.     

浅谈正确使用抗生素

抗生索能选择性地抑制或杀灭细菌等病原微生物,有良好的抗菌作用,能防治多种感染性疾病,然而,抗生素也会引起种种不良反应,有的还相当严重,例如,链霉素可引起耳聋,在少数情况下,抗生素也会致人于死地,对青霉素过敏的病人,在接受青霉素治疗时,可能发生过敏性休克而死亡,因此,在注射青霉素前必须先作皮肤过敏试验,反应阳性者禁用.……     

浅谈儿童感冒的合理用药

感冒是儿童的常见病、多发病,其中80%-90%是由病毒引起的,其余可能是细菌、其他微生物等感染或病毒感染后继发的细菌感染所致.     

脑血管病患者血小板膜糖蛋白CD_(62P)、CD_(63)的变化

目的 :探讨CD62P 和CD63 与脑血管病发生发展的关系。方法 :应用流式细胞术、以单克隆抗体作分子探针 ,检测脑血管病患者248例及正常对照者38例外周血CD62P 和CD63 的变化。结果 :脑血管病组与正常对照组差异有高度显著意义(P<0.01) ,脑血管病不同病程的差异有显著意义(P<0.05) ,不同病变部位的差异无显著意义。结论 :检测脑血管病患者CD62P、CD63 的变化对诊断、治疗和预防有重要意义。