活化性杀伤细胞免疫球蛋白样受体阳性的NK细胞对靶细胞的杀伤作用

Objective To study the killing effects of the killer cell immunoglobutin-like receptors (KIR) KIR2DS1-positive natural killer (NK) cells against acute, myeloid leukemia (AML) target cells, and to explore the KIR, human leucocyte antigen-Cw, and Cw loci (HLA-Cw) of NK cells, and, HLA-Cw of target cells mismatches destruction mechanism. Methods High-purified NK cells separated by DNYAL bead negative selection from healthy donor peripheral blood were taken as effector cells, and the freshly isolated bone marrow mononuclear cells from newly diagnosed AML patients as target cells. The anti-CD158a, CD158b monoclonal antibody was used to block inhibitory KLR receptors of NK cells (such as: KIR2DL1, KIR2DL2, KIR2DL3). The NK cells cytotoxicities against target cells before and after KIR blockades were detected by MTT reduction assay in vitro. Polymerase chain reaction and sequence specific primers (PCR-SSP) genotyping techniques were used to detect HLA-Cw, KIR gene of the healthy donors and patients. NK cells and target cells were divided into group C1 (expressing HLA-Cw 01, 03, 07, 08, 12, 14, 16 alleles), C2 group (expressing HLA-Cw 02, 04, 05, 06, 15, 17, 18 alleles) and the C1/C2 group (co-expressing the alleles in C1 group and C2 group) based on HLA-Cw. Results The purity of NK cells analyzed by flow cytometry was (90.8±6.08)%, and the killing effects of NK cells were significantly enhanced after inhibitory KIR blockades (t=-3.00, P=0.005). The cell lysis in C1 group, KIR2DS1+ NK cells against C2 group target cells (57.37±1.40)% was significantly higher than that against C1 group (44.19±4.67) % and C1/C2 group (36.77±6.56)% target cells (F= 11.87, P = 0.021), furthermore the differences in cell lysis among the above three groups become more evident after the inhibitory KIR blockades (F = 18. 72, P=0. 009). Conclusions The activity of NK cells was increased after the inhibitory KIR blockades, and the killing activities of KIR2DS1+ NK cells were higher than KIR2DS1 NK cells. The incompatibility between KIR, HLA-Cw of NK cells and HLA-Cw of target cells mediated NK alloactivation, realizing "missing self" recognition, and enabling NK cells cytotoxieity against targets.     

略谈药房药库的药品保管

1需冷藏药品的保管此类药品如丙球、白蛋白、干扰素等血清、疫苗、脏器制剂，由于在高温中容易失效，故须将其放在电冰箱中保存。2.毒、麻、精神药品的保管例如度冷丁、二氯埃托啡等应做到专人、专柜、专帐、专方和加锁保管，且须单独存放，明显标志，发放药品时须两人复核。对     

配制10％葡萄糖注射液应注意的几个问题

10％葡萄糖注射液在住院病人中常有使用，县级以上医疗单位大多有配制，不同单位，由于设备环境不同，人员素质不同等，配出的10％葡萄糖注射液的质量会有所差别，特别是由于一些环节没把好关，有些批号的葡萄糖注射液会不合格，从而报废或返工，因此配制10％葡萄糖是应注意各个环节的     

特发性血小板减少性紫癜患者血小板相关抗体表达与预后的关系

回顾性分析了2000年1月至2006年1月应用流式细胞仪检测120例临床确诊的特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者初诊时及治疗前后不同血小板相关抗体（PAIg）的表达。为临床诊断和治疗提供帮助。结果显示ITP患者初诊时PAIgG、PAIgA及PAIgM抗体表达水平均高于正常对照组；PAIgG、PAIgM、PAIgA表达水平与血小板数之间均呈负相关。予激素等免疫治疗无效转变为慢性ITP的患者初诊时PAIgM抗体水平要明显高于激素治疗有效的急性ITP患者，并且PAIgM异常增高或联合PAIgG增高的比例要显著多于急性ITP患者（P〈0．05）。35例PAIgG和PAIgM同时升高的ITP患者，在有效治疗血小板升至正常后，PAIgG、PAIgM抗体表达水平均有显著下降。提示ITP的发生与血小板抗体密切相关，初诊ITP患者PAIgM单独或联合PAIgG异常增高常提示预后不良，易转变为慢性ITP。     

CD4+CD25+Treg在急性淋巴细胞白血病患者外周血中的表达及其体外实验研究

目的初步探讨CD4 CD25 调节性T细胞(CD4 CD25 regulatory T cells,CD4 CD25 Treg)在急性淋巴细胞白血病(acute lymphocytic leukemia,ALL)患者化疗前及化疗缓解后外周血中的表达水平,并研究患者血清能否诱导外周血CD4 CD25-T细胞转化为CD4 CD25 Treg。方法①采用流式细胞术分别检测ALL初诊组、化疗完全缓解或部分缓解组及正常对照组外周血中CD4 CD25 T细胞所占比例,然后通过荧光定量RT-PCR检测各组外周血中转录因子Foxp3mRNA的表达水平,并逐层分析比较。②采集正常人外周血单个核细胞后,对照组用正常人血清,实验组用患者血清并分别设浓度梯度进行培养,72h后采用流式细胞术、荧光定量RT-PCR分别检测CD4 CD25 T细胞和Foxp3mRNA表达。结果ALL化疗缓解组CD4 CD25 T细胞及Foxp3mRNA表达水平均明显高于ALL初诊组和正常对照组(P<0.05),后两者之间CD4 CD25 T细胞水平无统计学差异(P>0.05),但ALL初诊组Foxp3mRNA含量较正常对照组明显升高(P<0.01),差异具有统计学意义;并且血清培养对照组CD4 CD25 T细胞水平及Foxp3mRNA含量均明显低于实验组(P<0.05),且其表达并不随血清浓度的增加而升高。结论CD4 CD25 Foxp3 Treg在ALL初诊组及化疗缓解组患者外周血中比例明显升高,且初步表明患者血清中的可溶性物质可诱导外周血CD4 CD25 T细胞转化为CD4 CD25 Treg,提示CD4 CD25 Treg可能是ALL免疫抑制的一个重要原因。     

CD4+CD25+/highCD127lowTregs及TGF-β在多发性骨髓瘤患者外周血的表达分析

目的:初步探讨CD4 CD25 /highCD127lowT调节性T细胞(Tregs)及TGF-β在不同病程阶段多发性骨髓瘤 (MM)患者外周血中的表达水平, 并研究患者血清TGF-β水平是否与CD4 CD25 /highCD127lowTregs具有相关性.方法:流式细胞术(FCM)检测50例MM患者及30例健康志愿者外周静脉血CD4 CD25 /highCD127lowTregs细胞的比例并分析比较.ELISA法定量检测血清TGF-β的表达水平.结果:(1)化疗后组CD4 CD25 CD127low、CD4 CD25highCD127lowT细胞的比例均显高于初诊组及正常对照组;初诊组与正常对照组的CD4 CD25 CD127lowT细胞相比无统计学意义, 但其CD4 CD25highCD127lowT细胞明显高于正常对照组.(2)化疗后稳定期CD4 CD25 CD127lowT细胞与活动期没有差异, 但其CD4 CD25highCD127lowT细胞明显低于活动期.(3)MM各组TGF-β水平均较对照组明显升高, 但各组比较无统计学意义.(4)TGF-β与CD4 CD25 CD127low、CD4 CD25highCD127lowT细胞的表达水平均不成相关性.结论:CD4 CD25 /highCD127low调节性T细胞MM患者外周血中比例明显升高, 且化疗及疾病进展程度可能影响其在外周血的比例.TGF-β可能不是导致其比例增加的直接原因.     

免疫双标记细胞的检测在中枢神经系统白血病诊断中的意义

目的：观察末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）及淋巴细胞系列相关抗原双标记细胞在脑脊液中的检出对中枢神经系统白血病（CNS－L）的临床意义。方法：采用免疫荧光标记技术配合流式细胞术，检测初治或安全缓解期急性淋巴细胞白血病脑脊液中TdT及淋巴系列相关抗原双标记细胞及其治疗后的变化。结果：64例中8例脑脊液检出上述免疫双标记细胞，均为急性淋巴细胞白血病，其中1例无CNS－L临床迹象，免疫双标记细胞占3.38%，经治疗后免疫双标记细胞在脑脊液均明显减少或消失。结论：脑脊液中免疫双标记细胞的检出对CNS－L的诊断及治疗指导具有重要的临床意义。弥补了常规细胞形态学的不足。     

支气管哮喘与慢性支气管炎患者血清可溶性黏附分子的对比研究

慢性支气管炎(简称慢支)和支气管哮喘(简称哮喘)均为气道慢性炎症性疾病，但两种气道炎症中参与的细胞不同。我们对48例患者血清可溶性细胞间黏附分子1(sICAM-1)和可溶性血管细胞黏附分子1(sVCAM-1)进行对比分析，以探讨黏附分子在这两种炎症发病过程中的不同作用。     

间充质干细胞在再生障碍性贫血发病机制中作用的研究

目的探讨再生障碍性贫血（AA）患者的骨髓间充质干细胞（MSCs）体外对T淋巴细胞的免疫调节作用。方法分离和体外培养骨髓间充质干细胞，与植物血凝素刺激的T细胞共培养，流式细胞仪检测T细胞的表面活化标志，MTT法检测T细胞受抑情况。结果AA患者骨髓MSCs在细胞形态和免疫表型上与缺铁性贫血患者没有明显差异，但对活化T细胞的免疫抑制作用明显减弱，而且SAA与CAA患者的骨髓MSCs之间也存在明显差异。结论AA患者骨髓MSCs对T细胞的免疫抑制作用减弱。     

浅谈正确使用抗生素

抗生素能选择性地抑制或杀灭细菌等病原微生物,有良好的抗菌作用,能防治多种感染性疾病,然而,抗生素也会引起种种不良反应,有的还相当严重,例如,链霉素可引起耳聋,在少数情况下,抗生素也会致人于死地,对青霉素过敏的病人,在接受青霉素治疗时,可能发生过敏性休克而死亡,因此,在注射青霉素前必须先作皮肤过敏试验,反应阳性者禁用。