脑梗死患者血小板颗粒膜糖蛋白CD62p的变化及临床意义

目的：探讨脑梗死患者血浆CD62p水平的变化和其在脑缺血损伤中的作用。方法：用流式细胞术检测150例脑梗死患者及30例正常对照血血浆CD62p含量变化。结果：发病后各组血浆CD62p含量显著升高，并且在脑梗死不同病程时的差异有显著意义，结论：CD62p参与了缺血性脑损伤的病理过程，可作为判断病情的指标。     

血小板减少性紫癜患者血小板膜糖蛋白测定及临床意义

血小板减少性紫癜患者（ＩＴＰ）是一组由自身血小板抗体引起的综合度，这些抗体作用的血小板膜靶抗原可多种多样，其中血小板膜糖蛋白（ＧＰ）Ⅱｂ／Ⅲｓ是一种主要的靶抗原，少数针对ＧＰＩｂ／ＩＸ复合物，为探讨ＩＴＰ与血小板膜表面糖蛋白关系，采用流式细胞仪分析方法，测定了２８例ＩＴＰ患者血小板的ＧＰⅡａ，ＧＰⅡｂ、ＧＰⅢａ、ＧＰＩｂ、ＧＰＩＸ１７例正常工作对照组，ＩＴＰ患者的ＧＰ均明显低于正常对照组，患者的Ｇ     

我院门诊不合理用药处方分析

目的：提高处方质量,促进合理用药。方法：随机抽取我院2013年1月～2014年12月门诊处方4745张,对不合理用药处方进行分析。结果：4745张处方共筛选出不合理用药处方431张,其中,联合用药不合理227张,占比52.67%;药物用法、用量不合理96张,占比22.27%;选药不当68张,占比15.18%;溶媒选择不当25张,占比5.80%;用药与诊断不符15张,占比4.08%。结论：开展用药处方点评,对不合理用药处方进行分析,既可提高药学人员的业务能力,又能将信息反馈给临床医生,保证药物的疗效,减少不良反应,促进合理用药。     

支气管哮喘与慢性支气管炎患者血清可溶性黏附分子的对比研究

慢性支气管炎(简称慢支)和支气管哮喘(简称哮喘)均为气道慢性炎症性疾病，但两种气道炎症中参与的细胞不同。我们对48例患者血清可溶性细胞间黏附分子1(sICAM-1)和可溶性血管细胞黏附分子1(sVCAM-1)进行对比分析，以探讨黏附分子在这两种炎症发病过程中的不同作用。     

间充质干细胞在再生障碍性贫血发病机制中作用的研究

目的探讨再生障碍性贫血（AA）患者的骨髓间充质干细胞（MSCs）体外对T淋巴细胞的免疫调节作用。方法分离和体外培养骨髓间充质干细胞，与植物血凝素刺激的T细胞共培养，流式细胞仪检测T细胞的表面活化标志，MTT法检测T细胞受抑情况。结果AA患者骨髓MSCs在细胞形态和免疫表型上与缺铁性贫血患者没有明显差异，但对活化T细胞的免疫抑制作用明显减弱，而且SAA与CAA患者的骨髓MSCs之间也存在明显差异。结论AA患者骨髓MSCs对T细胞的免疫抑制作用减弱。     

网织血小板在血小板减少性疾病中的临床意义

网织血小板;血小板减少症特发性血小板减少性紫癜（rrP）是因免疫机制使血小板破坏增多的临床综合征。血小板减少原因归为两类：血小板生成减少和血小板消耗或破坏过多。网织血小板（RP）是新近从骨髓中释放入外周血中的血小板,RP数目反映了人体血小板的更新速度、血小板生成能力。2002年11月-2004年6月我们检测50例健康人、48例ITP病人和其中30例获完全缓解ITP及35例急性白血病（AL）、25例慢性再生障碍性贫血（CAA）外周血的RP％和绝对计数,旨在初步探讨RP在血小板减少性疾病中的临床意义。     

活化性杀伤细胞免疫球蛋白样受体阳性的NK细胞对靶细胞的杀伤作用

Objective To study the killing effects of the killer cell immunoglobutin-like receptors (KIR) KIR2DS1-positive natural killer (NK) cells against acute, myeloid leukemia (AML) target cells, and to explore the KIR, human leucocyte antigen-Cw, and Cw loci (HLA-Cw) of NK cells, and, HLA-Cw of target cells mismatches destruction mechanism. Methods High-purified NK cells separated by DNYAL bead negative selection from healthy donor peripheral blood were taken as effector cells, and the freshly isolated bone marrow mononuclear cells from newly diagnosed AML patients as target cells. The anti-CD158a, CD158b monoclonal antibody was used to block inhibitory KLR receptors of NK cells (such as: KIR2DL1, KIR2DL2, KIR2DL3). The NK cells cytotoxicities against target cells before and after KIR blockades were detected by MTT reduction assay in vitro. Polymerase chain reaction and sequence specific primers (PCR-SSP) genotyping techniques were used to detect HLA-Cw, KIR gene of the healthy donors and patients. NK cells and target cells were divided into group C1 (expressing HLA-Cw 01, 03, 07, 08, 12, 14, 16 alleles), C2 group (expressing HLA-Cw 02, 04, 05, 06, 15, 17, 18 alleles) and the C1/C2 group (co-expressing the alleles in C1 group and C2 group) based on HLA-Cw. Results The purity of NK cells analyzed by flow cytometry was (90.8±6.08)%, and the killing effects of NK cells were significantly enhanced after inhibitory KIR blockades (t=-3.00, P=0.005). The cell lysis in C1 group, KIR2DS1+ NK cells against C2 group target cells (57.37±1.40)% was significantly higher than that against C1 group (44.19±4.67) % and C1/C2 group (36.77±6.56)% target cells (F= 11.87, P = 0.021), furthermore the differences in cell lysis among the above three groups become more evident after the inhibitory KIR blockades (F = 18. 72, P=0. 009). Conclusions The activity of NK cells was increased after the inhibitory KIR blockades, and the killing activities of KIR2DS1+ NK cells were higher than KIR2DS1 NK cells. The incompatibility between KIR, HLA-Cw of NK cells and HLA-Cw of target cells mediated NK alloactivation, realizing "missing self" recognition, and enabling NK cells cytotoxieity against targets.     

CD4+CD25+Treg在急性淋巴细胞白血病患者外周血中的表达及其体外实验研究

目的初步探讨CD4 CD25 调节性T细胞(CD4 CD25 regulatory T cells,CD4 CD25 Treg)在急性淋巴细胞白血病(acute lymphocytic leukemia,ALL)患者化疗前及化疗缓解后外周血中的表达水平,并研究患者血清能否诱导外周血CD4 CD25-T细胞转化为CD4 CD25 Treg。方法①采用流式细胞术分别检测ALL初诊组、化疗完全缓解或部分缓解组及正常对照组外周血中CD4 CD25 T细胞所占比例,然后通过荧光定量RT-PCR检测各组外周血中转录因子Foxp3mRNA的表达水平,并逐层分析比较。②采集正常人外周血单个核细胞后,对照组用正常人血清,实验组用患者血清并分别设浓度梯度进行培养,72h后采用流式细胞术、荧光定量RT-PCR分别检测CD4 CD25 T细胞和Foxp3mRNA表达。结果ALL化疗缓解组CD4 CD25 T细胞及Foxp3mRNA表达水平均明显高于ALL初诊组和正常对照组(P<0.05),后两者之间CD4 CD25 T细胞水平无统计学差异(P>0.05),但ALL初诊组Foxp3mRNA含量较正常对照组明显升高(P<0.01),差异具有统计学意义;并且血清培养对照组CD4 CD25 T细胞水平及Foxp3mRNA含量均明显低于实验组(P<0.05),且其表达并不随血清浓度的增加而升高。结论CD4 CD25 Foxp3 Treg在ALL初诊组及化疗缓解组患者外周血中比例明显升高,且初步表明患者血清中的可溶性物质可诱导外周血CD4 CD25 T细胞转化为CD4 CD25 Treg,提示CD4 CD25 Treg可能是ALL免疫抑制的一个重要原因。     

间充质干细胞对混合淋巴细胞反应体系中T淋巴细胞的免疫调节作用

目的:探讨间充质干细胞(MSC)在体外对T淋巴细胞免疫调节作用的特点。方法:通过Ficoll梯度密度离心法分离出正常人骨髓单个核细胞,体外培养扩增MSC,获取第3代细胞。将其按照不同的比例加入双向混合淋巴细胞培养(MLC)体系中,在第3、5天,采用MTT比色法检测各组MLC中的T淋巴细胞的增殖情况,再用流式细胞术分析其与MSC共孵育前后细胞表面标记的变化情况。结果:加入了MSC的MLC体系中,MSC对T淋巴细胞的增殖抑制具有剂量依赖性,且随着时间延长,抑制程度增强;其中,CD4 T细胞亚群受抑不如CD8 T细胞亚群显著;另外,T淋巴细胞表面CD25的表达虽然较对照组有所下降,但是CD4、CD25共表达的细胞却较对照组有明显的上升趋势。T淋巴细胞表面活化抗原HLA-DR的表达较对照组有轻度减低。结论:MSC在体外能够明显抑制T淋巴细胞的增殖,其主要是针对CD8 T细胞(CTL)。另外,它还能下调活化T淋巴细胞上一些较特异的表面标记CD25和HLA-DR的表达。     

CD4+CD25+/highCD127lowTregs及TGF-β在多发性骨髓瘤患者外周血的表达分析

目的:初步探讨CD4 CD25 /highCD127lowT调节性T细胞(Tregs)及TGF-β在不同病程阶段多发性骨髓瘤 (MM)患者外周血中的表达水平, 并研究患者血清TGF-β水平是否与CD4 CD25 /highCD127lowTregs具有相关性.方法:流式细胞术(FCM)检测50例MM患者及30例健康志愿者外周静脉血CD4 CD25 /highCD127lowTregs细胞的比例并分析比较.ELISA法定量检测血清TGF-β的表达水平.结果:(1)化疗后组CD4 CD25 CD127low、CD4 CD25highCD127lowT细胞的比例均显高于初诊组及正常对照组;初诊组与正常对照组的CD4 CD25 CD127lowT细胞相比无统计学意义, 但其CD4 CD25highCD127lowT细胞明显高于正常对照组.(2)化疗后稳定期CD4 CD25 CD127lowT细胞与活动期没有差异, 但其CD4 CD25highCD127lowT细胞明显低于活动期.(3)MM各组TGF-β水平均较对照组明显升高, 但各组比较无统计学意义.(4)TGF-β与CD4 CD25 CD127low、CD4 CD25highCD127lowT细胞的表达水平均不成相关性.结论:CD4 CD25 /highCD127low调节性T细胞MM患者外周血中比例明显升高, 且化疗及疾病进展程度可能影响其在外周血的比例.TGF-β可能不是导致其比例增加的直接原因.