多巴胺转运体PET显像对帕金森病和进行性核上性麻痹的鉴别诊断价值研究

目的评估~(11)C-CFT PET显像评价帕金森病(PD)与进行性核上性麻痹(PSP)脑部多巴胺转运体(DAT)的分布特点,探讨在PD与PSP鉴别诊断中的价值。方法回顾性分析年龄、病程匹配的40例PD患者(PD组)和20例PSP患者(PSP组)的临床及~(11)C-CFT PET影像资料;另选择年龄匹配的20例健康正常人为对照组。通过感兴趣区(ROI)技术计算3组研究对象在尾状核、前壳核和后壳核的~(11)C-CFT摄取值,并对各ROI的~(11)C-CFT摄取值及亚区间比值进行对比研究。结果与PD组比较,PSP组患者病情进展速度更快、UPDRS评分和Hoehn-Yahr分期更高(P0.01)。PD组和PSP组在尾状核、前壳核和后壳核的~(11)C-CFT摄取值均显著低于对照组(P0.01);PSP组各亚区的~(11)C-CFT摄取值显著低于PD组(P0.001)。PSP组~(11)C-CFT摄取值的前壳核/尾状核、后壳核/尾状核、前壳核/后壳核比值明显高于PD组(P0.05)。以1.20作为前壳核/尾状核比值的划界值,其对PD与PSP鉴别诊断的灵敏度和特异度分别为85.0%和97.5%;以0.77作为后壳核/尾状核比值的划界值,其对PD与PSP鉴别诊断的灵敏度和特异度分别为90.0%和95.0%。结论 ~(11)C-CFT PET显像可以显示PD及PSP患者脑内多巴胺能神经元的突触前功能损害,且~(11)C-CFT摄取值的亚区间比值能对两种疾病进行有效鉴别。     

慢病毒介导的胶质细胞系源性神经营养因子在骨髓基质细胞中的表达及其对乳胞素干预PC12细胞的保护作用

目的 建立慢病毒介导的胶质细胞系源性神经营养因子(glial cellline-derived neurotrophic factor,GDNF)表达系统,体外感染骨髓基质细胞,检测过表达GDNF对蛋白酶抑制剂引起的PC12细胞损伤的神经保护作用.方法 经双酶切和T4连接酶构建pLenti6/V5-GDNF表达质粒,经293FT细胞包装产生高滴度病毒.用RT-PCR、ELISA和免疫细胞化学方法检测感染骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)后GDNF的表达,并检测过表达GDNF对蛋白酶抑制剂乳胞素(1actacystin)引起的PC12细胞损伤的保护作用.结果 成功构建pLenti6/V5-GDNF表达质粒,获得高滴度具有感染能力的病毒储存液(5.6×105 TU/mL).BMSCs体外被感染后能大量分泌GDNF(接近800 pg/mL),过表达GDNF能减轻乳胞素(10 μmol/L)引起的PC12细胞损伤.结论 慢病毒介导的GDNF转染骨髓基质细胞后能分泌具有生物学活性的GDNF,对蛋白酶体抑制剂引起的PC12细胞损伤有保护作用.     

p16基因甲基化与脑胶质瘤的关系

抑癌基因p16位于人类染色体9p21,由3个外显子和2个内含子组成.脑胶质瘤中,p16基因5'CpG岛异常甲基化导致P16蛋白表达的减少与肿瘤发病率密切相关.本文总结了p16基因5'CpG岛高甲基化的形成机制、在脑胶质瘤中的发生率以及相应的治疗对策,供临床医生参考.     

胰岛素对百草枯诱导的PC12细胞的保护作用

目的 观察培养的PC12细胞中多巴胺D2受体(DA D2R)蛋白的表达,胰岛素对百草枯(paraquat,PQ)诱导的PC12细胞形态学、生存率和DA含量的影响.方法 应用免疫沉淀Western印迹分析技术对培养的PC12细胞中DA D2R表达的检测;应用二甲基噻唑二苯基四唑溴盐(MTT)法,观察PC12细胞暴露于不同浓度PQ组和胰岛素预先干预后再暴露于PQ组后细胞形态学和生存率的改变;应用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测空白对照PC12细胞组、PQ干预组、胰岛素组和胰岛素加PQ组PC12细胞上清液DA的浓度.结果 (1)Western法检测到培养的PC12细胞中有DA D2R蛋白的表达;(2)空白对照组PC12细胞形态胞体呈梭形,细胞突触完整;PC12细胞暴露T600 μmol/L PQ组24h,多数细胞胞体变圆、空泡变性、突触变短或消失.预加100 nmol/L胰岛素预处理20 min后、再暴露于600 μmol/L PQ组24 h,与空白对照组比较细胞形态略有改变,细胞形态呈梭形或不规则但非圆形,细胞突触又有生长;(3)PC12细胞生存率与PQ干预的浓度呈反向变化趋势;而胰岛素可以减少600 μmol/L PQ 24 h内对PC12细胞生存率的毒性损伤;(4)胰岛素可在一定程度上提高正常PC12细胞和600μmol/L PQ干预的PC12细胞上清液中的DA浓度,但差异无统计学意义(P>0.05).结论 胰岛素对PQ损害的PC12多巴胺能神经元细胞有保护作用.     

致死性家族性失眠症的临床特点及脚基因突变分析

目的：探讨中国致死性家族性失眠症（FFI）患者的临床及PRNP基因突变特点。方法：对一个FFI家系进行调查并综合分析先证者的临床资料;应用PCR技术结合DNA直接测序方法对先证者进行PRNP基因的突变筛查,回顾分析中国已报道的FFI先证者的临床特点。结果：在该先证者检出朋^垆基因2号外显子上的c．532G〉A（p．D178N）突变及c．385AA（p．129MM）多态,据此可确诊为FFI。Meta分析提示中国FFI患者的临床表现均较典型,PRNP基因单体型均为D178N-129MM。结论：尽管FFI患者的临床表现较典型,但对临床上疑为FFI的患者,仍应进行艄ⅣP基因突变筛查以助确诊。     

胰岛素对百草枯诱导损伤PC12细胞的保护机制的研究

目的 探讨胰岛素对百草枯(PQ)诱导损伤的多巴胺能神经元PC12细胞保护作用的可能机制.方法 在前期实验证明胰岛素对PQ诱导损伤的PC12细胞具有保护作用的基础上,应用免疫沉淀Western印迹分析技术检测空白对照PC12细胞组、PQ干预PC12细胞组(PQ组)、胰岛素干预PC12细胞组(胰岛素组)和PQ与胰岛素共同干预PC12细胞组(胰岛素+PQ组)INRTyr~(1162/1163)和AktSer~(473)磷酸化蛋白的表达情况.结果 免疫沉淀Western印迹分析技术显示:胰岛素组和胰岛素+PQ组通道上出现了表示INRTyr~(1162/1163)磷酸化蛋白表达的棕色带,没有胰岛素干预的通道均未出现棕色带;INR Tyr~(1162/1163)磷酸化蛋白表达量化统计分析显示胰岛素组INRTyr~(1162/1163)磷酸化程度高于胰岛素+PQ组,但差异无统计学意义(P>0.05);而AktSer~(473)磷酸化蛋白表达量化统计分析显示胰岛素组AktSer~(473)磷酸化程度明显高于胰岛素+PQ组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 INR Tyr~(1162/1163)磷酸化增加和胰岛素受体后信号传导通路AktSer~(473)磷酸化增加可能是胰岛素保护PQ诱导损伤PC12细胞的机制之一.     

胰岛素对百草枯诱导的PC12细胞的保护作用

Objective To observe dopamine (DA) D2R protein expression in the cultured PC 12 cells and the effect of insulin on the survival rate,morphology,and DA of paraquat (PQ)-induced PC12 cells. Methods Immunoprecipitate Western blotting method was performed to observe DA D2R protein expression in PC 12 cells,MTT assay was used to analyze the changes in viability and morphology of PC 12 ceils which were exposed to different concentrations of PQ and insulin. Results (1) DA D2R protein was expressed in PC 12 ceils. (2) Normal PCI2 cells bodies showed fusiform shape and the synapses were in-tegrity. The cells which were exposed to the 600 μmol/L PQ became ball-like, vacuolar degeneration oc-urred,and the synapse became shorter or disappeared. But the morphology of PC12 cells had a little difference between the normal PC12 and the insulin groups,except that the cells were fusiform shape or a-nomalism but not round shape,and the synapses grew. (3) With the increase of the concentration of PQ, the viability of the cells was decreased. Insulin increased the viability of the ceils which were exposed to 600 μmol/L PQ. Insulin elevated DA concentration both in the normal PC12 cells and those exposed to 600 μmol/L PQ,but there was no significant difference ( P > 0.05 ). Conclusion Insulin could protect the PC12 dopaminergic neurons from injury induced by PQ.     

Creutzfeldt-Jakob病11例临床分析

目的 Creutzfeldt-Jakob病(CJD)临床少见,本文旨在提高临床医生对此病的认识.方法 总结复旦大学附属华山医院诊断为CJD的患者11例,行脑电图、头部MRI、DWI、头部CT、CSF14-3-3蛋白检查.结果 主要临床症状和体征有进行性痴呆、共济失调、肌阵挛、精神行为异常、锥体束征、视力下降、锥体外系征.脑电图均有异常,9例出现周期性三相波.5例MRI弥散加权像中3例双侧皮质显示异常高信号,1例示基底节及皮质异常高信号,4例行脑脊液14-3-3蛋白检查,1例阳性.结论 CJD临床表现以急速发展的进行性痴呆和肌阵挛最具特征性,脑电图、DWI、CSF14-3-3是诊断本病的重要检查手段.     

丁螺环酮治疗小脑性共济失调

目的 :探讨 5 HT1A受体激动剂丁螺环酮改善共济失调症状的作用。方法 :应用评分计分法观察丁螺环酮治疗 2 4例共济失调患者 3个月。结果 :治疗前后共济失调评分 ,包括稳定性、协调性、构音、眼球运动各方面的差异均有显著意义 (P <0 0 0 1) ;焦虑评分在治疗前后的差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论 :丁螺环酮短期内可以有效地改善患者小脑性共济失调的症状     

~(11)C-CFT PET显像评价帕金森病与多系统萎缩P型患者脑内多巴胺转运体分布特点的研究

目的基于~(11)C-CFT正电子发射计算机断层(PET)显像评价帕金森病(PD)与多系统萎缩P型(MSA-P)患者脑内多巴胺转运体(DAT)分布特点,评估~(11)C-CFT PET显像在PD与MSA-P鉴别诊断中的价值。方法回顾性分析年龄、性别和疾病严重程度匹配的32例MSA-P患者(MSA-P组)和56例PD患者(PD组)的临床资料以及~(11)C-CFT PET影像资料;另选择年龄匹配的健康对照者20例为对照组。应用感兴趣区技术获得3组研究对象的尾状核、前壳核和后壳核的DAT分布半定量值,对各感兴趣区的DAT分布半定量值、相互比值和不对称性进行对比研究。建立受试者工作特征曲线(ROL),利用曲线下面积评估基于~(11)C-CFT PET显像所得相关参数对PD和MSA-P的鉴别能力。结果与PD组比较,MSA-P组患者病程更短、进展速度更快(P0.000 1)。与对照组比较,PD组和MSA-P组尾状核、前壳核和后壳核的DAT分布半定量值均显著减低(P0.000 1),且后壳核降低最为显著。PD组和MSA-P组尾状核、前壳核和后壳核的DAT分布半定量值及其不对称指数比较均差异无显著性。PD组和MSA-P组纹状体各感兴趣区DAT分布半定量值中,前壳核/尾状核比值(AP/C)、后壳核/前壳核比值(PP/AP)均差异无显著性;但MSA-P组后壳核/尾状核比值(PP/C)PD组(P0.05),两组PP/C比值的ROL曲线下面积为0.696(P=0.002);以0.611作为PP/C比值的临界值,其对MSA-P和PD鉴别诊断的灵敏度和特异度分别为71.9%和62.5%。结论 ~(11)C-CFT PET显像可以精准显示MSA-P及PD患者脑内多巴胺能神经元的突触前功能损害,但尚不能有效鉴别两种疾病。