晚期糖基化终末产物受体胞外段不同功能段真核表达载体的构建及其在前列腺癌细胞中的表达与定位

构建晚期糖基化终末产物受体（RAGE)胞外段不同功能段V/VC1真核细胞表达载体,并在前列腺癌细胞株PC-3中表达,为进一步研究其在前列腺癌发病中的作用和机制打下基础。方法 采用PCR方法扩增RAGE不同功能段V/VC1的序列,利用分子克隆技术将其重组于pcDNA3-HA载体中。利用PCR和测序鉴定克隆正确性。转染PC-3细胞,用Western-Blotting检测其表达,免疫荧光检测其在细胞中的定位。结果 克隆的RAGE不同功能段V/VC1真核表达载体完全正确,Western-Blotting检测到RAGE不同功能段V/VC1的表达,免疫荧光检测其主要定位于细胞浆中。结论成功地构建了RAGE不同功能段V/VC1真核表达载体,其能够在PC-3细胞中表达。     

串联亲和纯化标记的HMGB1细胞因子诱导片段1融合表达载体构建和蛋白纯化及其功能初步探讨

目的：构建高迁移率族蛋白B1（HMGB1）中细胞因子诱导片段1（CIF1）与串联亲和纯化（TAP）系统中纯化标签链霉亲和素结合肽（SBP）和钙调蛋白结合肽（CBP）序列相融合的原核表达载体,观察重组蛋白对小鼠单核／巨噬细胞白血病细胞释放肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的影响,为HMGB1参与炎症反应作用机制的研究以及CIF1结构域细胞膜表面受体蛋白的获得和鉴定奠定基础。方法：采用PCR方法分别扩增出cBP-SBP和CIF1的编码序列,构建表达质粒pET-14b／CBPSBP—CIF。利用Ni—NTA亲和树脂纯化融合蛋白,纯度达85％以上。采用纯化后的蛋白诱导小鼠单核／巨噬细胞白血病细胞RAW264．7,利用LiquiChip液相蛋白芯片系统检测RAW264．7细胞释放TNF-a的水平变化。结果：表达载体构建正确,CIF1重组蛋白表达量高,纯度好。当蛋白浓度大于0．5ng／μl时,CIF1重组蛋白诱导细胞TNF-α的分泌量与对照组相比差异具有显著性（P〈0．05）,并且在CIF1蛋白浓度O～2．5ng／μl范围内,TNF-α的分泌量与CIF1重组蛋白的浓度呈显著的剂量依赖关系。结论：原核表达纯化了His—CBP—SBP—CIF1融合蛋白,该融合蛋白可以有效地作用于巨噬样细胞内的信号转导过程,介导了炎症因子TNF—α的分泌表达。     

早产儿鼓室导抗图分析

目前在各类教科书中,尚未有双峰型鼓室导抗图的描述,而文献仅有对婴儿双峰型鼓室导抗图的个别报道,且其双峰型例数不多,本文对本院新生儿科在耳鼻咽喉科测听室行声导抗测试的40例新生儿的鼓室导抗图进行分析,现报告如下。1资料与方法1.1一般资料受试患儿共40例80耳,男32例,女8     

流感病毒裂解疫苗接种人体后的安全性和免疫原性研究北大核心CSCD

目的评价流感病毒裂解疫苗经工艺改进后的安全性和免疫原性。方法采用非劣效性研究,选择3～〈18岁受试者240人随机分为2组,接种试验疫苗与进口疫苗,比较其安全性和免疫原性;另选择18～〈60岁受试者360人随机分3组,接种3个连续批次试验疫苗,评价试验疫苗批间免疫效果的一致性。结果试验疫苗接种后不良反应发生率为4.17%,与进口疫苗比较,两组反应发生率差异无统计学意义（P〉0.05）;试验疫苗和进口疫苗各型别抗体阳转率、免疫后血凝抑制（HI）抗体几何平均滴度（GMT）和保护率差异无统计学意义（P〉0.05）;3个连续批次试验疫苗各型别抗体阳转率和免疫后HI抗体GMT差异无统计学意义（P〉0.05）。结论经工艺改进后的试验疫苗安全性和免疫原性良好,批间免疫效果稳定。     

综合性医院科研管理系统的开发和应用

建立依托信息技术的综合性医院科研管理系统,优化科研管理流程,将为我院科研能力和科研管理水平的提升提供良好的基础环境。综合性医院科研管理系统涵盖了个人信息、课题项目申报、课题管理、学术论文、专著专利、新技术新项目、学术团体等诸多完整、实时的科研信息数据,有效承担起医院科研信息的管理工作,促进科研信息资料共享,有望发展为医院科研信息数据中心库,成为科研综合管理信息化的平台。     

X线电视屏幕下鼻窦内窥镜手术取出翼腭窝后异物1例

患者，男，25岁。因面部被汽枪子弹击伤约1月，于1996年5月8日入院。1996年4月10日被汽枪子弹射中面部，子弹从右眼内眦部进入，视力无变化。曾到多家医院就诊，因手术难度大，恐怕术后并发视力下降而未行手术治疗。头颅正侧位片及冠状位CT示：右蝶窦前壁、右后组筛窦了壁及有上颌窦后壁上方交汇处，见一直径0．6～0．7cm的金属异物。5月28日在全麻下行鼻窦内窥镜手术作筛窦切除并异物摘取。由筛泡处开筛后向纵深推进，直至全组筛窦开放，仔细检查未见异物。后来改在X线电视屏幕监视下调整方位，发现异物位于右翼腭窝后方，继而调整咬钳方…     

人IP-10启动子的克隆和转录活性的检测

目的克隆干扰素诱导蛋白10(IP-10)5′非编码区(NCR)片段,检测克隆的IP-10启动子驱动的荧光素酶报告基因在LPS激活的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中的转录活性。方法提取人外周血淋巴细胞基因组DNA,以其为模板,利用巢式PCR扩增人IP-10启动子片段,测序正确后克隆入荧光素酶报告基因表达载体pGL3;将重组质粒pGL3/IP-10P导入HUVEC细胞,检测LPS刺激下荧光素酶活性。结果正确克隆出人IP-10启动子(-2028~-1)片段,成功构建了pGL3/IP-10P报告基因表达载体;证实了LPS可诱导HUVEC细胞中IP-10的高表达。结论成功克隆出人的IP-10启动子片段,并利用荧光素报告基因证实了在HUVEC细胞中LPS可诱导IP-10高转录表达,为深入研究LPS诱导IP-10转录表达的调控机制提供了基础。     

铁皮石斛诱导人鼻咽癌细胞CNE2凋亡及其可能的分子机制

目的探讨铁皮石斛抑制人鼻咽癌CNE2细胞增殖与诱导凋亡的生物学效应及可能的分子机制。方法分别采用MTT、光学显微镜、流式细胞仪与Western blot检测新鲜铁皮石斛提取物抑制CNE2细胞增殖与诱导凋亡作用及Bcl-xL,mcl-1、Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9蛋白的表达,了解铁皮石斛对鼻咽癌细胞的作用及机理。结果经MTT法检测显示铁皮石斛提取物对CNE2有明显抑制作用;经流式细胞仪检测显示,与对照组相比石斛提取物对CNE2细胞株有明显促进细胞凋亡作用(P0.01),而且有明显的时间依赖性及浓度依赖性。Western blot结果显示:Bcl-xL和Mcl-1表达均下降,Caspase-8、Caspase-9有明显的表达;而Caspase-3也有表达。提示石斛能抑制Bcl-xL和Mcl-1的表达,并可能与线粒体通路的细胞凋亡及死亡通路的细胞凋亡有关。结论铁皮石斛具有抑制人鼻咽癌CNE2细胞增殖和诱导凋亡的作用,其机制可能与Bcl-xL,Mcl-1蛋白下调、促进Caspase-3的活化等有关,并可能与死亡受体通路的细胞凋亡和线粒体通路的细胞凋亡均有关。     

94例脑干胶质瘤MRI影像与病理分级的关系分析

目的 探讨脑干胶质瘤的MRI影像学特点及其与病理分级的关系.方法 回顾性分析经手术治疗并有明确病理诊断的94例脑干胶质瘤的临床资料,包括MRI及病理资料,并对相关变量进行统计检验,判断该变量与病理分级的关系.结果 脑干胶质瘤直径大小(P =0.029)、是否跨脑干轴位中线生长(P =0.016)、有无坏死灶(P＜0.000)、囊变(P=0.004)以及对基底动脉包绕(P=0.001)在高、低级别胶质瘤之间的分布差异有统计学意义.结论 脑干胶质瘤是一类异质性肿瘤,术前根据肿瘤直径大小、是否跨脑干轴位中线生长,囊变、坏死及基底动脉包绕,可在一定程度上判断脑干胶质瘤恶性程度,指导判断预后.