小鼠11β- HSD1基因真核表达载体的构建及应用

构建小鼠11β-羟类固醇脱氢酶（11β- HSD1）基因的慢病毒真核表达载体PLJM1-11β-HSD1-GFP,建立小鼠前体脂肪细胞（3T3-L1）高表达11β-HSD 1 基因的稳定感染细胞株,为11β- HSD1基因的功能研究奠定基础。方法利用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）从小鼠肝脏cDNA 中扩增11β-HSD1开放阅读框ORF,构建针对11β-HSD 1 基因的真核表达载体,转化感受态DH5α菌株,抽提质粒并进行测序鉴定。用测序成功的质粒和慢病毒包装质粒共同转染293T细胞,产生慢病毒并转染3T3-L1 细胞。根据绿色荧光效率挑取单克隆细胞团筛选出稳定细胞株,通过Western blot鉴定PLJM1-11β-HSD1-GFP转染成功。结果经酶切、PCR 及测序验证,PLJM1-11β-HSD1-GFP 真核表达载体构建成功,并包装慢病毒,绿色荧光效率90%以上,并利用其慢病毒悬液成功感染3T3-L1 细胞,筛选出的稳定感染细胞株的3T3-L1细胞成功高表达11β-HSD1 蛋白。结论成功构建了11β-HSD 1 基因的真核表达载体,并建立高表达11β-HSD 1 的稳定感染细胞株PLJM1-11β-HSD1-GFP-3T3-L1,为进一步研究11β-HSD 1 基因的功能,特别是在肥胖中的研究奠定了基础。     

炎性细胞在高血压中的作用

高血压是一种以动脉压升高为特征,可伴有心脏、血管、脑和肾脏等靶器官损害的全身性疾病。高血压是生活中的常见病,与心脑血管及代谢性疾病的发生、发展密切相关,严重威胁人类健康,高血压的病因目前尚不完全明确。近年来越来越多的资料显示高血压病常伴有机体免疫功能紊乱,研究表明血管炎性细胞及炎性因子与高血压关系密切。对炎症与高血压相关性的深入认识能为进一步研究高血压的防治方法提供理论依据。     

间歇性禁食与代谢相关脂肪性肝病的研究进展

代谢相关脂肪性肝病的主要特征是肝细胞中三酰甘油和其他脂质的病理性积聚,可以从单纯的脂肪变性发展为脂肪性肝炎,最终发展为终末期肝病。这是一种与代谢功能障碍相关的脂肪性肝病,目前尚缺乏有效的治疗药物。近年来,一种独特的饮食模式—间歇性禁食,已显示出对各种代谢相关疾病的保护作用。然而,它在调节肝脏疾病,特别是代谢相关脂肪性肝病的作用仍不十分清楚。现对该领域目前的研究进展进行简要综述,主要分析各种间歇性禁食类型对代谢相关脂肪性肝病的影响和间歇性禁食改善代谢相关脂肪性肝病的可能机制。     

西格列汀联合预混胰岛素治疗血糖控制不佳2型糖尿病患者的临床研究

目的 探讨西格列汀联合预混胰岛素治疗血糖控制不佳2型糖尿病(T2DM)患者的有效性及安全性.方法 选取胰岛素治疗不佳的T2DM患者72例,随机分为对照组35例和试验组37例,试验组加用西格列汀口服.治疗12周后比较两组患者的糖化血红蛋白(HbA1c)、血糖变异度、胰岛素用量、低血糖事件、体重指数(BMI).结果 与对照组相比,试验组HbA1c下降[(7.1±0.9)％vs.(7.8±1.1)％,P＜ 0.05]、血糖变异度减低[(0.24±0.09) vs.(0.35±0.12),P＜0.05]、胰岛素用量减少[(0.38±0.27) U/(kg·d)vs.(0.51±0.35) U/(kg·d),P＜0.05],低血糖事件减少[(0.90±0.40) vs.(2.10±1.20),P＜0.05],BMI无明显变化[(25.10±2.90) kg/m2 vs.(26.70±4.40) kg/m2,P＞0.05].结论 西格列汀联合预混胰岛素治疗T2DM患者安全且更加有效.     

血清尿酸水平在2型糖尿病发生发展中的意义

目的探讨血清尿酸水平在2型糖尿病(T2DM)发生发展中的意义。方法检测934例T2DM患者、1329例空腹血糖(FPG)受损者及16243例健康体检者血清尿酸水平及其相关代谢指标。根据血清尿酸水平分别对男、女T2DM患者进行分组,分析不同尿酸水平与各代谢指标的相关性。结果 T2DM及FPG受损者较血糖正常者年龄偏大,体重指数(BMI)、收缩压、FPG、甘油三酯、尿酸增高,高密度脂蛋白胆固醇降低;不同性别血糖水平与尿酸水平变化呈正性线性关系,相同血糖水平下男性尿酸水平明显高于女性;T2DM患者按照性别尿酸分层分析显示,BMI、收缩压、舒张压、胆固醇、甘油三酯和FPG与血清尿酸水平呈正相关。结论血清尿酸水平是T2DM发生发展的独立危险因素。     

S100A16与成骨分化的生物信息学分析及功能验证

目的 初步探讨S100A16基因在成骨分化中的作用。方法 通过GEO数据库的高通量测序数据从生物信息学角度分析S100A16表达与成骨分化临床各参数的相关性。构建高表达S100A16慢病毒载体(PLJM1-S100A16-GFP),转染间充质干细胞筛选稳定表达细胞株,Western blot法检测各组细胞S100A16表达情况,诱导成骨分化采用茜素红染色观察矿化结节形成情况;采用实时定量PCR方法检测成骨细胞分化相关因子的表达水平。结果 生物信息学分析结果显示,S100A16基因在骨髓中的表达显著低于其他组织;与正常对照组比较,在经曲古抑菌素A诱导成骨分化细胞中S100A16表达量显著降低。高表达S100A16抑制骨矿化结节形成,同时下调成骨分化相关因子碱性磷酸酶(ALP)、Runt相关转录核心因子2(Runx2)的表达(P<0.05)。结论 S100A16基因抑制成骨分化,其可作为抗骨质疏松的治疗新靶点。     

己酮可可碱联合胰激肽原酶治疗糖尿病足的临床研究

目的 探讨己酮可可碱联合胰激肽原酶治疗糖尿病足的临床疗效。方法 选择2018年5月—2022年2月在漯河市中心医院治疗的86例糖尿病足患者为研究对象,根据住院号的奇偶性分为治疗组和对照组,每组各43例。对照组患者肌肉注射注射用胰激肽原酶,40 U/次,1.5 mL灭菌注射用水溶解,1次/d;在此基础上,治疗组患者静脉滴注注射用己酮可可碱,0.4 g加入250 mL生理盐水,1次/d。两组患者连续治疗4周。观察两组患者临床疗效,比较治疗前后两组患者糖尿病自护行为量表（SDSCA）、自我感受负担量表（SPBS）评分和食物多样化评分（DDS）,血清胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、同型半胱氨酸（Hcy）、瘦素、转化生长因子-β(TGF-β)和白细胞介素-13(IL-13)水平,足部溃疡面积和深度,足背动脉血管内径、血流流速、搏动指数（PI）、阻力指数（RI）。结果 治疗后,对照组有效率为81.40%,明显低于治疗组（97.67%,P<0.05）。治疗后,两组SDSCA评分明显升高,而SPBS评分和DDS评分明显下降（P<0.05）;两组患者血清IGF-1和TGF-β水平明显升高...     

PPARγ基因shRNA真核表达载体的构建及其干扰效果鉴定

目的 构建过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)基因RNA干扰的真核表达载体,转染小鼠3T3-L1前体脂肪细胞,并鉴定其干扰效果.方法 选择设计2条针对小鼠PPARγ基因的干扰靶序列,构建真核表达载体PLKO.1-PPARγ-GFP-shRNA1/2,以PCR鉴定并进行序列分析.证实质粒构建成功后,转染小鼠3T3-...     

2型糖尿病患者的糖化血红蛋白水平、胰岛素抵抗指数及并发症与心理控制源的相关性研究

目的 探究2型糖尿病（diabetes mellitus type 2,T2DM）患者的糖化血红蛋白（HbA1c）水平、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）及并发症与心理控制源的相关性。方法 选取漯河市中心医院收治的130例T2DM患者为研究对象，分别检测患者的HbA1c水平，根据空腹血糖和空腹胰岛素计算HOMA-IR，评估并发症种类，并采用多维度健康心理控制源量表（Multidimensional Health Locus of Control Scale,MHLC）调查患者的心理控制源状态。对比分析不同HbA1c水平、HOMA-IR水平及伴不同并发症T2DM患者的MHLC量表评分。结果 T2DM患者内控性量表（Internality Health Locus of Control Scale,IHLC）评分低于常模（P <0.05），而健康权威控制量表（Powerful Others Health Locus of Control Scale,PHLC）、机遇量表（Chance Health Locus of Control Scale,CHLC）评分均高于常模（P <0....