GP IIb三种基因多态性之间的关系及GP IIb T13959 G在血小板输注耐受中的作用

目的:研究血小板膜糖蛋白Ⅱb (GP Ⅱb)三种基因多态性之间的关系及GP Ⅱb T13959 G在血小板输注耐受中的作用.方法:聚合酶链反应-单链构型多态性分析检测110例正常人GP Ⅱb基因第26和30外显子(Exon 26, Exon30)及21内含子(Intron21)基因多态性,进行基因序列分析,研究这些基因多态性是否存在连锁关系;应用Fok1酶切法对147例血液病人人类血小板抗原-3(human platelet antigen-3, HPA-3)基因进行分型,并与110例正常人进行比较;将接受单采血小板输注的44例血液病人随机分为HPA-3同型输注组和对照组,血小板输注3次以后检测血小板抗体.结果:正常人GP Ⅱb存在基因多态性,表现分别为gDNA 13 959位点T→G,16 977位点C→T,11 996～12 004位点9个碱基缺失,且三者具有同步性.Fox1酶切分析结果表明,正常人和血液病人的HPA-3a基因频率分别为83.6%(92/110)和81.9%(119/147),HPA-3b基因频率分别为16.4%(18/110)和19.1%(28/147),两者之间差异无统计学意义(P＞0.05).血液病人接受单采血小板输注后, HPA-3同型输注组血小板抗体阴性,而对照组有2例存在血小板抗体,其中1例为HPA-3a抗体.结论:(1)GP Ⅱb基因存在gDNA 13 959位点T→G,16 977位点C→T,11 996～12 004位点9个碱基缺失,这3个位点的多态性可能存在完全连锁关系;(2)血液病人与正常人的HPA-3基因频率相同;(3)HPA-3系统可能是我国人群产生血小板输注耐受的原因之一.     

急性心肌梗死患者血浆蛋白C和 D-二聚体测定及临床意义

目的 探讨急性心肌梗死患者血浆蛋白C活性和D-二聚体水平及意义。方法 采用发色底物法（蛋白C）和免疫比浊法（D-二聚体）对22例急性心肌梗死患者血浆蛋白C活性和D-二聚体进行了检测，并与正常对照组（n=20）进行比较。结果 急性心肌梗死患者血浆D-二聚体水平明显高于正常对照组（P〈0．01），而蛋白C活性检测与正常对照组没有明显差别（P〉0．05）。结论 蛋白C不是引起急性心肌梗死的主要因素，D-二聚体增高对于诊断急性心肌梗死具有一定的价值。     

GPⅡb~(R995A)点突变对受体亲合力及PP125~(FAK)磷酸化的影响

目的:为了进一步探讨血小板膜(GPⅡb)胞内段在信号传递中的作用。方法:选择表达GPⅡb~(R995A)Ⅲa的CHO细胞为研究对象,以正常人血小板和表达GPⅡbⅢa的CHO细胞为对照,应用流式细胞术、免疫沉淀、western blot-ting等方法检测PAC-1且结合能力和PP125~(FAK)磷酸化。结果:GPⅡbⅢa CHO细胞几乎不结合PAC-1,而GPⅡb~(R995A)ⅢaCHO细胞结合PAC-1明显增加;GPⅡbⅢa CHO细胞只有在粘附纤维蛋白原后才有FAK磷酸化,GP血b~(R995A)Ⅲa CHO细胞在悬浮时即有微弱的FAK磷酸化。结论:本研究提示GPⅡb~(R995A)点突变能改变受体的低亲合力状态,使受体具有高亲合性;该突变还介导细胞内信号传导,引起非配体结合的FAK磷酸化。     

血小板GPⅡb精氨酸584-终止信号点突变

我们发现２例血小板无力症（Ｇｌａｎｚｍａｎｎｔｈｒｏｍｂａｓｔｈｅｎｉａ，ＧＴ）患者均存在血小板膜ＧＰⅡｂ基因第１７外显子第９６４４位核苷酸Ｃ→Ｔ杂合子突变，导致血小板ＧＰⅡｂ第５８４位上的精氨酸变成终止信号。因为ＧＴ为常染色体隐性遗传性疾病，杂合子...     

αⅡbA477P(A446P)--发生于血小板无力症患者的新突变

[目的]明确血小板无力症患者的基因缺陷,为进一步探讨其发病机理奠定实验基础。[方法]通过40对引物对GT-57的αⅡb和G3亚基基因的所有45个外显子及其剪接点进行了全长的PCR扩增,然后对PCR产物进行了SSCP-聚丙烯酰胺凝胶电泳,发现αⅡb基因的14号和15号外显子(Exon14／15)的PCR扩增产物出现了异常条带,对外显子14／15的PCR产物进行了直接测序。[结果]αⅡb基因外显子14发生了点突变G→C,导致氨基酸密码由GCT→CCT,该突变位于αⅡb亚基cDNA第1430个碱基,导致第477(446)位氨基酸残基由丙氨酸转变成脯氨酸[αⅡbA477P(A446P)]。[结论]通过查阅文献资料,αⅡbA477P(A446P)突变系国内外第一例报道。     

流式细胞术在诊断血小板无力症中应用价值

目的：探讨流式细胞术（flow cytometry,FCM）对诊断血小板无力症（Glanzmann's Thrombasthenia,GT）的意义。方法：采用流式细胞术及Western印迹分别检测正常人、GT患者及其父母血小板膜GPⅡb和GPⅢa的表达。结果：与正常人相比，GT患者GPⅡbⅢa明显减少，其父GPⅢa亦减少（P＜0．01），其母GPⅢa无差异性（P＞0．5）。结论：FCM是诊断GT的一种简单、灵敏而可靠的方法，而且它还可用于GT的家系分析。     

32例造血干细胞移植患者出血的防治

目的研究造血干细胞移植患者出血并发症的防治措施.方法对32例行造血干细胞移植的血液病患者进行回顾性分析,观察其在移植后骨髓空虚期采用的防治出血措施的疗效.结果除1例伴有脾脏肿大的重型β地中海盆血患儿(行无关供者脐血移植)出血症状无好转,血小板数量无明显提高,最终死于颅内出血外,其余31例患者的出血症状均很快得以控制,血小板数量上升,安全度过无髓期.结论在造血干细胞移植后骨髓空虚期,及时采用输注新鲜单采血小板、应用止血药物及糖皮质激素等措施,能够有效控制患者出血并发症的发生.     

急性白血病骨髓单个核细胞糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D的表达☆

背景：据作者查新检索,国内外有关急性白血病骨髓单个核细胞糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D活性及mRNA表达与白血病类型、患者肝脾淋巴结肿大关系的报道罕见。 目的：探讨糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D的表达与急性白血病类型、急性髓系白血病患者肝脾淋巴结肿大的关系。 方法：急性髓系白血病组骨髓标本43例,急性淋巴细胞白血病组骨髓标本28例,以21例健康志愿者作为正常对照组。密度梯度离心法获得骨髓单个核细胞,用GPI锚定的胎盘碱性磷酸酶作为底物,Triton-X114分相法检测糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D的活性,半定量RT-PCR法检测糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D mRNA的表达,并分析糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D活性和mRNA表达水平与急性白血病类型、急性髓系白血病患者肝脾淋巴结肿大的关系。 结果与结论：与正常对照组比较,急性髓系白血病组骨髓单个核细胞糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D活性和mRNA表达均明显升高(P < 0.01);急性淋巴细胞白血病组骨髓单个核细胞糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D活性和mRNA表达均明显降低(P < 0.01)。在43例急性髓系白血病患者中,13例患者检查发现有肝脾淋巴结肿大,30例患者检查无肝脾淋巴结肿大,无肝脾淋巴结肿大标本骨髓单个核细胞糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D活性和mRNA表达均明显高于有肝脾淋巴结肿大标本(P < 0.05)。结果证实急性白血病骨髓单个核细胞糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D的活性与mRNA变化一致,其表达水平与急性白血病类型及急性髓系白血病患者有无肝脾和/或淋巴结肿大有关。     

急性心肌梗死患者凝血酶原基因G20210A变异频度分析

目的探讨FⅡG20210A突变在中国人群中的分布频率及其与急性心肌梗塞之间的联系.方法运用FⅡG20210A等位基因特异性引物PCR,结合限制性内切酶技术及聚丙烯酰胺凝胶电泳等方法检测97例急性心肌梗塞患者及107例正常人对照的FⅡG20210A基因频率.结果未检出1例FⅡG20210A基因突变者,提示被检病例及正常人FⅡG20210A基因变异频率为0.结论在中国人群中FⅡG20210A基因变异罕见甚至缺如.FⅡG20210A基因突变不足以成为中国人急性心肌梗塞的危险因素.     

急性白血病患者WT1基因mRNA表达研究

用ＲＴ－ＰＣＲ检测了２８例急性白血病患者ＷＴ１表达水显示：１９例ＷＴ１表达一,阳性率６７．９％;其中１６例ＡＮＬＬ中有１１例表达阳性,１２例ＡＬＬ有８例表达阳性。表明ＷＴ１在急性白血病中有高度表达,可作为一种新的检测标记物,在白血病疗效观察、判定预后及ＭＲＤ研究中有重要意义。