骨髓基质细胞源神经干细胞对局灶性脑缺血大鼠行为及神经细胞凋亡的动态影响

目的探讨骨髓基质细胞(BMSCs)源神经干细胞对局灶性脑缺血大鼠行为及神经细胞凋亡的影响。方法建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型。32只健康Sprague-Dawley(SD)大鼠分为假手术组、缺血对照组、缺血骨髓基质细胞移植组和缺血骨髓基质细胞源神经干细胞移植组。分别于移植后1d、7d、14d、28d对大鼠进行神经功能缺损评分和空间学习能力检测,并在移植后14d和28d分别应用TUNEL法检测神经细胞凋亡。结果移植后7d各组神经功能均有不同程度的恢复,BMSCs源神经干细胞移植组大鼠的神经功能评分[(6.3±2.32)分]显著优于BMSCs移植组[(7.1±1.88)分]。移植14d后可提高大鼠空间学习能力,且各时间点BMSCs源神经干细胞移植组的空间学习能力改善优于BMSCs组。随移植后时间的延长,BMSCs源神经干细胞移植组和BMSCs移植组的神经功能和空间学习能力更趋改善。BM-SCs源神经干细胞移植组缺血边缘区凋亡细胞数[(4.8±1.12)个]明显少于BMSCs移植[(6.3±2.73)个]。结论骨髓基质细胞源神经干细胞移植可改善大鼠神经行为、减少神经细胞凋亡,显著优于BMSCs移植。     

大鼠胎脑皮质神经干细胞体外培养及诱导分化的实验研究

目的 从孕龄15d SD胚胎鼠脑皮质中分离并培养神经干细胞（neural stem cells。NSCs），观察其生长、增殖及分化。方法 采用包含碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）和表皮细胞生长因子（EGF）的无血清培养及单细胞克隆技术，对胚胎鼠脑皮质神经干细胞进行原代、传代培养及诱导其分化。用Nestin染色鉴定神经干细胞特性，用免疫组化方法（β-Ⅲ-tubulin、GFAP染色）检测神经干细胞分化为神经元及神经胶质细胞状况。结果 从孕龄15dSD胚胎鼠脑皮质中分离的组织，经原代及传代培养均可形成细胞克隆．切具有增殖能力。原代及传代培养细胞呈Nestin（神经上皮干细胞蛋白）表达阳性．诱导分化后的细胞表达神经元细胞、星形胶质细胞的特异性抗原。结论 本实验分离、培养的孕龄15dSD胚胎鼠脑皮质细胞Nestin表达阳性．分化后表达神经元和星形胶质细胞的标记物，是大鼠的神经干细胞，并具有多向分化潜能。     

探讨脑缺血大鼠骨髓基质细胞移植后减少神经细胞凋亡的作用

目的探讨大鼠局灶性脑缺血后骨髓基质细胞移植对神经细胞凋亡及相关蛋白表达的影响。方法取大鼠股骨髓基质细胞,分化培养为骨髓基质细胞源神经干细胞。将32只健康SD大鼠随机平均分为4组。A组不建立局灶性脑缺血模型,不做任何移植,其余步骤同其他组。B、C、D组均建立局灶性脑缺血再灌注模型。B组将1mlPBS经尾静脉注入大鼠体内;C组将1ml3×106个骨髓基质细胞经尾静脉注入大鼠体内;D组将1ml3×106个骨髓基质细胞源神经干细胞经尾静脉注入大鼠体内。分别在移植后7d和14d行脑灌注固定取材,应用免疫组织化学染色检测脑组织中Bcl2、Bax蛋白表达阳性的细胞,原位末端脱氧核糖核酸转移酶标记法(TUNEL)检测神经细胞凋亡数。结果C组和D组各时点的神经细胞凋亡数均少于B组(P<0.01),C组和D组移植14d时,神经细胞凋亡数显著少于移植7d时(P<0.01),移植14d时D组神经细胞凋亡数显著少于C组(P<0.05)。C组和D组Bcl2表达阳性的细胞数显著高于B组(P<0.01)。C组和D组Bax蛋白表达阳性的细胞数明显低于B组(P<0.01)。结论骨髓基质细胞源神经干细胞可能通过上调Bcl2蛋白,下调Bax蛋白的表达,减少神经细胞凋亡,从而对脑缺血再灌注损伤后的神经细胞起保护作用。     

骨髓基质细胞移植治疗缺血性脑损伤的机制

骨髓基质细胞可向神经细胞方向诱导分化有望成为神经移植的重要细胞来源，为缺血性脑损伤的细胞和基因治疗奠定了基础。文章就骨髓基质细胞向缺血脑区的迁移、替代受损神经细胞、分泌神经营养因子、促进内源性神经前体细胞增殖和作为外源性基因载体等方面的机制做了综述。     

REDE-DHPLC检测NSCLC血浆EGFR突变及其临床意义

目的 探讨酶切富集联合变性高效液相色谱法(REDE-DHPLC)检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血表皮生长因子受体(EGFR)突变的临床应用价值.方法 采用REDE-DHPLC法对该院收治的403例NSCLC患者血浆EGFR 19和21外显子突变状态进行检测,分析突变与基线资料的相关性.其中115例患者同时采用ARMS法对肿瘤组织样本进行突变检测,比较两种方法检测的一致性.结果 403例患者血浆样本总突变率为26.3％(106/403).女性、不吸烟、腺癌及晚期(Ⅲb～Ⅳ)患者血浆EGFR突变率分别显著高于男性、吸烟、非腺癌及早期患者(P＜0.05).多变量Logistic分析显示性别、吸烟史及组织类型是血浆EGFR突变的独立预测因素(P＜0.05).115例配对样本中,以组织样本为标准,REDE-DHPLC法检测血浆EGFR突变的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为69.0％、97.3％、93.5％、84.5％,两种检测方法具有较好的一致性(κ=0.702).结论 性别、吸烟史及组织类型是NSCLC患者血浆EGFR突变的独立预测因素,REDE-DHPLC法检测血浆EGFR突变敏感度及特异度较高.     

骨髓基质细胞移植治疗缺血性脑损伤的机制

骨髓基质细胞可向神经细胞方向诱导分化有望成为神经移植的重要细胞来源,为缺血性脑损伤的细胞和基因治疗奠定了基础。文章就骨髓基质细胞向缺血脑区的迁移、替代受损神经细胞、分泌神经营养因子、促进内源性神经前体细胞增殖和作为外源性基因载体等方面的机制做了综述。     

血膜治疗褥疮的临床观察

褥疮是长期卧床病人的主要并发症之一,发生后如不及时采取有效措施,很快加深,转为三、四期褥疮,治疗困难,甚至需要手术植皮.在护理实践中,我们应用血膜代替植皮治疗三、四期褥疮取得满意的效果.1 疮面的准奋常规消毒疮面及周围皮肤。清除疮面肉眼下的坏死组织,直到疮面红润,有血运为止,然后用庆大霉素盐     

短暂脑缺血发作的研究进展

短暂脑缺血发作(TIA)是一种反复发作的局部脑供血障碍导致的短暂性神经功能缺损.TIA是脑梗死的预警信号和前兆,如不及时治疗,有25%～40%患者在5年内将产生严重的脑梗死而威胁患者生命,及时诊断与治疗TIA是预防缺血性卒中的重要措施.不断完善对本病的认识具有重要临床意义.随着神经影像学的发展及临床研究的深入,人们对TIA的认识有了新进展.近年来,对TIA的研究集中在对其概念的重新认识、影像学检查、与卒中的关系以及防治等方面.TIA的研究对于卒中的预防和治疗具有重要的临床意义.     

哌拉西林/他唑巴坦联合左氧氟沙星治疗重症肺炎的评价

目的评价哌拉西林/他唑巴坦联合左氧氟沙星对老年重症社区获得性肺炎的治疗效果。方法回顾性分析哌拉西林/他唑巴坦联合左氧氟沙星治疗156例老年重症社区获得性肺炎的临床疗效。结果平均疗程11.5d,细菌清除率达84.4%,临床有效率为92.9%,不良反应发生率7.0%,不良反应轻微,主要包括:胃肠道症状、皮疹、白细胞减少及肝功能异常等,均经停药或对症处理后缓解。结论哌拉西林/他唑巴坦联合左氧氟沙星治疗老年重症社区获得性肺炎临床效果肯定,不良反应小,可作为治疗老年重症社区获得性肺炎的经验性用药。