重组结核分枝杆菌38kDa蛋白的表达、纯化和复性及免疫特性的研究

目的构建结核分枝杆菌38kDa的重组质粒,在大肠杆菌中表达、纯化和复性重组蛋白,并评价其在结核病血清学诊断方面的价值。方法用PCR方法从结核分枝杆菌H37Rv基因组中扩增出psts1基因片段,连接到表达载体PET30a中,在大肠杆菌中表达;应用组氨酸标签(His-Tag)纯化重组蛋白;在PBS中通过半透膜恢复重组蛋白的天然结构。结果构建了含38kDa重组质粒的大肠杆菌工程菌,并以包涵体形式表达重组蛋白38kDa,其占细胞总蛋白的55%;重组蛋白变性后经镍柱纯化,其纯度达90%以上;通过半透膜完全恢复重组蛋白的天然结构,经蛋白印迹证实重组蛋白能与结核杆菌多克隆抗体结合。结论具有天然结构和高纯度的重组融合蛋白有可能成为有效的结核病血清学诊断的候选抗原。     

固定循环轮班制在精神科护士排班中的应用体会

护士排班是护理管理工作中的一项重要内容,科学合理的排班能够充分调动护士的积极性,有助于整体护理的开展,提高护理质量和护理水平。2002年3月以来,我们在排班上采用了“固定循环轮班制”,经过6年多的实践,效果良好。现报告如下。1资料与方法1．1一般资料本组护理人员46名,无护理员及护工,年龄最大46岁,最小39岁,学历均是中专以上,以大专为主。护龄最长27年,最短20年。其中副主任护师3名,主管护师42名,护师1名。三个病区之间的护士每半年各轮入和轮出2人,三区依次轮换。我科是女病区,护理人员15名,除2名护士长外,13名护士参加固定循环轮班。     

楚雄地区克山病区人发中生命有关元素的含量

本文按不同年龄组采集男性人发1800多份,比较了楚雄地区克山病区与对照非病区墨江县碧溪区发硒等生命元素含量之间的差异。病区发硒平均为0.16ppm,发钾为104ppm,发镍为1.77ppm,而非病区分别为0.30、191.95和3.09ppm,病区明显低于非病区。发钼正相反,病区高于非病区,分别为0.07,和0.03ppm。根据云南克山病区以儿童为主的特点,对比了儿童与成人、病区与非病区儿童组的区别,说明除硒以外还有其他元素也呈现出有意义的差异,为探讨克山病病因提供新的线索。本文还探讨了病区与非病区发硒临界值,为监测发硒动态变化及预报克山病发生的可能性提供有意义的指标。     

自身免疫性胰腺炎的MR诊断与鉴别诊断

目的分析自身免疫性胰腺炎的MRI表现,旨在提高对其诊断的准确率。方法对经临床证实的10例自身免疫性胰腺炎进行回顾性分析,10例均行MR平扫及增强扫描检查。结果胰腺弥漫性受累(8/10),胰头局限性肿块(1/10),胰体尾部受累(1/10);6例可见"假包膜"征。MRCP:9例胆总管胰腺段狭窄,8例见胰管局限性或弥漫性狭窄,1例主胰管未见显示;动态增强后病变区呈延迟性强化。结论 MRI表现有一定的特点,需要和其它胰腺病变进行鉴别诊断,从而做出正确的诊断。     

220株结核分枝杆菌北京临床分离株的基因分型研究

目的了解结核分枝杆菌北京临床分离株的基因分型种类和特征,为结核病防治研究提供基础科学依据。评价两种分型方法在北京地区结核病分子流行病学中的应用。方法收集北京市结核分枝杆菌临床分离株,应用间隔区寡核苷酸分型(Spoligotyping)及多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA)二种分型方法进行基因分型,结果聚类分析采用BioNu-merics(Version5.0)软件。结果共在北京地区收集到220株结核分枝杆菌临床分离株。采用Spoligotyping分型方法,220株菌可分为2个基因群,即北京家族(Beijing family)和非北京家族(non-Beijing family),20种基因型。其中北京家族含有202株菌,占91.82%。北京家族菌株中,典型北京家族菌株占95.05%(192/202),非典型北京家族占4.95%(10/202)。北京家族菌株的耐药率为22.55%(22/98),非北京家族菌株的耐药率为16.67%(1/6),两者间的差异无统计学意义(fisher analysis,P=0.5835>0.05)。采用MLVA分型方法,202株菌可分成5个基因群59种基因型,主要为Beijing family、China2和China3,分别占91.37%、2.73%和4.55%。结论北京地区结核分枝杆菌具有明显的基因多态性,其主要流行型为北京家族。北京家族菌株与耐药性无明显相关性。     

167株耐多药结核分枝杆菌药物敏感谱分析

目的 了解耐多药结核分枝杆菌的药敏谱，为耐多药结核病（MDR-TB）的临床药物选择和防控提供科学依据。方法 选取既往收集的MDR-TB 167株，采用lysX基因测序方法进行基因分型，并采用微孔板药敏法及BACTEC^TM MGIT 960^TM液体培养法对其进行13种抗结核药物的敏感性检测，分析不同基因型MDR-TB菌株与耐药表型的相关性及药物交叉耐药情况。采用χ²检验比较计数资料组间差异。结果 167株MDR-TB菌株对除异烟肼、利福平外11种抗结核药物总耐药率为95.81%，准广泛耐药结核病（pre-XDR）比例为31.14%（52/167），广泛耐药结核病比例为6.59%（11/167）。北京基因型中链霉素耐药率高于非北京基因型，差异有统计学意义（χ²=30.682，P<0.05），非北京基因型中pre-XDR比例高于北京基因型，差异有统计学意义（χ²=5.332，P<0.05）；氧氟沙星耐药率和吡嗪酰胺耐药率在现代北京基因型与古典北京基因型中差异有统计学意义（χ²=4.105和χ²=3.912，P<0.05）。利福平与利福布汀存在交叉耐药，交叉耐药率为86.23%，且不同程度利福平耐药组间利福布汀耐药率差异有统计学意义（χ²=45.912，P<0.05）。氧氟沙星耐药与莫西沙星耐药有相关性、阿米卡星耐药与卡那霉素耐药有相关性，r分别为0.87和0.91。结论 MDR-TB菌株对11种抗结核药物呈高度耐药，且同类型药物之间交叉耐药较为严重；北京基因型菌株是MDR-TB的主要流行菌株，与链霉素耐药高度相关。     

结核分枝杆菌CFP10-ESAT6融合蛋白免疫小鼠效果初步评价

目的 融合表达和纯化结核分枝杆菌(MTB)CFP10-ESAT6(CE),初步评价免疫效果。方法 构建pET32a(+)-CE重组质粒,E.coli BL21(DE3)中融合表达,Ni-NTA层析纯化。用CE加铝佐剂,50 μg CE/只/次,分3次免疫BALB/c小鼠。ELISA测定血清IgG抗体;ELISpot与Luminex检测细胞因子,进行MTB体外生长抑制试验。卡介苗(BCG)为阳性对照。结果 CE免疫小鼠,能诱导产生高效价的IgG、IgG1和IgG2a,且IgG1(t=19.1,P<0.000 1)和IgG2a(t=8.7,P<0.000 1)抗体水平均高于BCG组。CE组与BCG组诱导产生的分泌IFN-γ的斑点形成细胞(SFC)数量差异无统计学意义(t=0.4, P>0.05),但诱导分泌IL-4的SFC数量高于BCG组(t=8.0, P<0.000 1)。CE组诱导分泌GM-CSF(t=8.4,P<0.05)、IL-6(t=8.3,P<0.05)、IL-10(t=2.5,P<0.05)和IL-4(t=7.0,P<0.05)均高于BCG组,而CE组诱导分泌IFN-γ(t=1.4,P>0.05)、TNF-α(t=1.8,P>0.05)、IL-2(t=2.0,P>0.05)、IL-12(t=0.9,P>0.05)和IL-17(t=1.3,P>0.05)均与BCG组相似,差异无统计学意义。CE组小鼠脾细胞的MTB体外生长抑制结-果与BCG组相似(t=0.8,P>0.05)。结论 CE免疫小鼠可诱导较强的Th1与Th2混合型免疫反应,且有较强的体外抑制MTB生长的能力,表明CE具有良好的结核疫苗研制应用价值。     

住院精神分裂症患者口腔健康相关生活质量影响因素及其与自杀企图的关系

目的:分析住院精神分裂症患者口腔健康相关生活质量的影响因素和自杀企图发生率,并探索口腔健康相关生活质量与自杀企图的关系。方法:2013年5月7-27日,将来自首都医科大学附属北京安定医院94例住院精神分裂症患者连续入组,分为自杀企图组(7例)和非自杀企图组(87例),采用自制调查表、口腔健康影响程度量表(OHIP-14)、简明精神病评定量表(BPRS)和日常生活功能量表(ADL)对其进行横断面调查;并运用多因素线性回归方法(逐步法),对住院精神分裂症患者口腔健康相关生活质量的相关因素进行回归分析。结果:住院精神分裂症患者OHIP-14总分为(10.9±11.8)分,自杀企图发生率为8.0%;自杀企图组在OHIP-14总分、功能受限、疼痛与不适、心理社会影响和独立能力减弱评分均高于非自杀企图组(F=9.138,6.193,8.285,10.355,6.628;P0.05),差异有统计学意义;其BPRS评分和ADL评分均高于非自杀企图组(F=3.143,0.649;P0.05),差异无统计学意义;口腔健康相关生活质量的4个领域中,功能受限得分、疼痛与不适得分、心理社会影响得分和独立能力减弱得分之间的相关系数均呈正相关;病程、有无自杀企图、月收入状况和受教育程度等评分与住院精神分裂症患者口腔健康相关生活质量评分相关(P0.05)。结论:住院精神分裂症患者口腔健康相关生活质量与多种因素存在相关,包括病程、是否有自杀企图、月收入和受教育程度等,这为制定改善住院精神分裂症患者口腔健康相关生活质量的综合干预方案提供了参考依据。     

心理干预合并小剂量氯米帕明治疗早泄的对照研究

目的探讨心理干预合并小剂量氯米帕明治疗早泄的效果。方法将33例符合CCMD-3诊断标准的早泄病人随机分成单用氯米帕明治疗组与合并心理干预组。于治疗前、治疗后3周及6周进行性功能状况和TESS评定。结果两组疗效均显著;治疗后3周及6周的性功能状况评分与治疗前相比,其差异有显著性,合并组效果更好且持久。TESS评分两组无明显差异。结论氯米帕明能明显延长射精潜伏期,可用于治疗早泄,若合并心理干预则可提高疗效。