夏枯草粗提物抑制乳腺癌细胞增殖和逆转耐药作用与机制初探研究

目的：探讨夏枯草水提醇沉粗提物溶液（PVC）对乳腺癌敏感细胞（MCF-7／S）和耐药细胞（MCF-7／R）增殖及耐药性的影响。方法：单味中药夏枯草经水煎醇沉法制成夏枯草粗提物溶液，定容至每毫升含生药夏枯草1．0克。乳腺癌细胞阿霉素敏感株MCF-7／S和阿霉素耐药株MCF-7／R分别用RMPI-1640和低糖DMEM培养基培养。MTT法检测PVC对MCF-7／S细胞和MCF-7／R细胞增殖的影响以及非细胞毒性剂量PVC对耐药株MCF-7／R细胞阿霉素敏感性的影响。Western Blot检测不同浓度PVC对凋亡相关基因p53和乳腺癌耐药蛋白（BCRP）表达水平的影响。     

radixin在乳腺癌组织中的表达及其与预后的相关性

目的:观察radixin蛋白表达与乳腺癌临床病理参数的相关性及临床意义。方法:收集散发性乳腺癌标本278例,乳腺纤维腺瘤组织46例,应用SP免疫组化法检测radixin蛋白的表达情况,并分析与乳腺癌患者临床病理参数的相关性。结果:乳腺癌中radixin蛋白表达阳性率为73.7%（205/278）,乳腺纤维腺瘤中radixin蛋白表达阳性率为32.6%（15/46）,与乳腺纤维腺瘤组织比较,radixin蛋白阳性表达率显著高于乳腺纤维腺瘤组织（P＜0.000 1）。在乳腺癌组织中,radixin蛋白表达与患者TNM分期、HER-2表达正相关,在临床分期高、HER-2表达阳性的组织中,radixin蛋白表达阳性率明显增加（P=0.023,P=0.007）。radixin蛋白表达与患者年龄、绝经状态、淋巴结转移、肿瘤大小、p53蛋白表达均未见相关性。生存分析发现,radixin蛋白表达与乳腺癌患者总体生存期无关,radixin阳性表达的乳腺癌患者,RFS时间明显缩短（P＜0.05）。结论:乳腺癌组织中radixin蛋白高表达与患者临床分期、HER-2表达和临床预后相关。     

EGCG对D-半乳糖诱导的阿尔茨海默病小鼠的抗凋亡作用

目的研究(-)表没食子儿茶素没食子酸酯对D-半乳糖诱导的阿尔茨海默病小鼠的抗凋亡作用。方法给小鼠每日按150mg·kg-1皮下注射D-半乳糖一次,连续注射6周,以制备阿尔茨海默病小鼠模型,造模2周后,给EGCG低剂量和高剂量治疗组小鼠每日分别按2mg·kg-1和6mg·kg-1灌胃给予EGCG一次,连续给药4周。通过HE染色、TUNEL染色、免疫组化和Western blot印迹分析等方法观察EGCG对D-半乳糖诱导的阿尔茨海默病小鼠脑内神经元凋亡情况及海马区促凋亡蛋白caspase-3的活性及表达。结果给小鼠连续皮下注射D-半乳糖明显的增加了神经元细胞凋亡指数(P<0.01),并提高了小鼠海马区caspase-3的活性及表达(P<0.05);EGCG(2mg·kg-1和6mg·kg-1)明显的降低了D-半乳糖诱导的阿尔茨海默病小鼠神经元细胞的凋亡指数(P<0.01),并降低了小鼠海马区caspase-3的活性及表达(P<0.05)。结论EGCG通过抑制D-半乳糖诱导的阿尔茨海默病小鼠海马区caspase-3的活性及表达,发挥有效的抗凋亡作用。     

乳腺癌耐药相关蛋白在乳腺癌的表达及与临床病理参数相关性

目的探讨原发性乳腺癌中乳腺癌耐药相关蛋白(BCRP)表达与临床指标及病理参数的相关性。方法采用免疫组织化学方法检测BCRP及雌激素受体α(ERα)、孕激素受体(PR)、HER-2、P53等病理参数的表达,应用Kruskal-Wallis秩和检验和Spearman相关性检验分析BCRP与临床指标及病理参数的相关性。结果原发性乳腺癌中BCRP表达阳性率64.39%,癌旁组织中BCRP表达阳性率33.33%,两者相比有显著性差异(X~2=9.323,P=0.002);BCRP表达水平与患者年龄、病理类型、临床分级及淋巴结转移无关,而与患者是否绝经有关,未绝经患者乳腺癌组织中BCRP表达水平显著高于已绝经患者(X~2=6.928,P=0.008);BCRP表达水平与ERα(r=0.204,P=0.019)和HER-2表达水平呈正相关(r=0.246,P=0.004),与PR、P53表达水平不具有相关性。结论乳腺癌中BCRP蛋白表达水平明显高于癌旁正常组织,其表达强度与与患者体内雌激素水平及ERα及HER-2强度正相关。     

Bcl-2表达降低对人乳腺癌细胞米托蒽醌敏感性的影响

目的:探讨抗凋亡蛋白Bcl-2低表达后对人乳腺癌细胞米托蒽醌(mitoxantrone,MX)敏感性的影响。方法:分别用MTT法和流式细胞仪PI单染、Annexin V/PI双染法、彗星实验检测Bcl-2低表达后,MX对乳腺癌MDA-MB-435S和MDA-MB-231细胞生存率、细胞周期、凋亡和DNA损伤的影响。结果:Bcl-2表达降低后MX对乳腺癌MDA-MB-435S和MDA-MB-231细胞的增殖抑制、S期阻滞、凋亡诱导、DNA损伤均明显增加,具有统计学意义。结论:抑制Bcl-2表达可以增加乳腺癌细胞对MX的敏感性。     

60例心房颤动合并长R-R间距的动态心电图分析及临床意义

目的 探讨60例心房颤动合并长R-R间距的动态心电图(DCG)改变及临床意义.方法 以DCG 24h记录60例心房颤动合并长R-R间距的临床资料,统计长R-R间距发生总次数、昼夜发生频率的相关性及长R-R间距、逸搏及逸搏性心律出现的时间是否与睡眠相关,分为与睡眠相关组(A组)及非睡眠相关组(B组).结果 60例发生1....     

不同糖浓度中大鼠DRG神经元相关蛋白表达及Ca2+浓度的测定

目的观察高糖对背根神经节(DRG)中瞬时感受器电位香草酸受体4(TRPV4)和蛋白激酶Cε(PKCε)的表达以及细胞内Ca2+浓度的影响,探讨其在糖尿病大鼠神经病理性疼痛形成中的作用机制。方法培养的新生大鼠DRG神经元分成正常对照组(C组)、中糖组(M组)和高糖组(H组)。48 h后通过蛋白质免疫印迹法测定DRG神经元TRPV4和PKCε的表达水平,并通过共聚焦显微镜测定DRG神经元[Ca2+]i的水平。结果 TRPV4、PKCε蛋白的表达上调且呈浓度依赖性。C组、M组、H组TRPV4蛋白分别为0.33±0.05、3.20±0.40和7.69±0.60;PKCε蛋白分别为0.88±0.04、1.08±0.08和1.97±0.35。在TRPV4激动剂4α-PDD的作用下,与C组比较,H组[Ca2+]i显著升高(P<0.05),且呈浓度依赖。结论高糖可以上调DRG神经元中TRPV4、PKCε蛋白的表达,增加神经元内Ca2+浓度。TRPV4、PKCε对DRG神经元内Ca2+起到了协同调控的作用。     

卡介菌多糖-核酸对二硝基氟苯诱导的接触性皮炎的治疗作用及机制

目的探讨卡介菌多糖-核酸对二硝基氟苯诱导的接触性皮炎的治疗作用,并探讨其可能的作用机制。方法利用二硝基氟苯诱导建立小鼠接触性皮炎动物模型。激发后48小时,肌肉注射卡介菌多糖-核酸。给药期间,隔日1次对激发部位进行评分,末次给药后24小时,取激发部位皮肤进行病理学观察,取外周血ELISA法检测血浆中IL-2,IL-4andIFN-γ水平,流式细胞术检测外周血中T淋巴细胞亚群的百分比。结果治疗作用研究结果表明:卡介菌多糖-核酸可剂量依赖性缓解二硝基氟苯诱导的小鼠接触性皮炎的症状,减少激发部位皮肤中炎症细胞的数目。作用机制研究结果表明:卡介菌多糖-核酸可剂量依赖性减少外周血中IL-4水平,增加IL-2和IFN-γ水平,增加外周血中CD4+T细胞百分比及CD4+T细胞与CD8+T细胞百分比的比值。结论卡介菌多糖-核酸有望成为一种有效的治疗接触性皮炎的药物,其作用机制可能与它调节T淋巴细胞亚群和细胞因子失调有关。     

高效液相色谱法测定赤丹胶囊中芍药苷含量

目的：制定赤丹胶囊中芍药苷的含量测定方法．方法：用反相高效液相色谱法，Nucleosil-100C18柱，流动相：乙腈-0．025mol／L磷酸盐(17：83)，流速1．0ml／min，检测波长234nm．结果：线性范围0．8—4．0μg，r=0．9997，平均回收率为99．5%，RSD为1．27%．结论：该方法灵敏度高、操作简便、结果准确，可用于赤丹胶囊中芍药苷的含量测定．