外周血p53基因SNP检测与大肠癌早期诊断的关系

目的分析大肠癌发生过程中p53基因突变的作用,评估外周血p53基因突变分析作为大肠癌高危对象筛查指标的实际应用价值。方法用LDR-PCR技术对100例大肠癌家系成员和100例健康人（对照组）的外周血p53基因第5-8外显子进行单核苷酸多态性（SNP）检测。结果大肠癌家系成员和对照组的外周血p53基因的突变率为分别为24％和0,差异有显著性（P〈0．05）。结论p53基因突变在大肠癌的发生过程中起重要作用,外周血p53基因SNP突变分析可望成为大肠癌高危对象的早期诊断手段。     

消化道息肉内镜治疗方法及疗效观察

消化道息肉是消化道黏膜层局部隆起性病变,可发生于食管、胃、小肠及结肠。随着内镜技术的发展和普及,消化道息肉的检出率在逐步提高,息肉的临床意义在于出血或可能癌变,因此积极治疗息肉对降低消化道癌症的发病率有重要的意义,目前内镜下治疗已成为消化道息肉治疗的首选方法。根据息肉的部位、大小、     

姜黄素和儿茶素联合预防二甲基肼诱导大肠癌的研究

饮食因素可预防大肠癌，姜黄素和儿茶素是两种可食用的天然化合物，无不良反应。本实验将两者联合应用于大鼠大肠癌体内预防研究，探讨两者对大肠癌中间生物学评价指标——隐窝异常病灶（aberrant crypt foci，ACF）和大鼠大肠癌形成的预防作用。     

小鼠骨髓造血干细胞转化为肝细胞的实验研究

为进一步明确向肝细胞分化的细胞为骨髓中的那一亚群细胞,我们将纯化后的雄性小鼠造血干细胞移植到雌性受体小鼠的体内,然后在受体小鼠的肝脏内进行检测,以确定有无供体来源的肝细胞存在。一、材料与方法1.实验动物、主要器材和试剂:健康清洁级雌雄性纯系BALB/C鼠,8～12周龄,均由第一军医大学动物实验中心提供。主要试剂及材料:磁性活化细胞分选(magnetic activated cell sorting,MACS)分离用MiniMACS缓冲液,     

过氧化氢酶对SW480细胞内细胞因子和NF-κB激活的影响

目的观察过氧化氢酶(catalase,CAT)对脂多糖(Liposaccharide,LPS)诱导肠癌细胞株SW4430细胞内TNF-α、IL-1β、IL-8的表达和NF-κB激活的影响。方法LPS刺激SW480细胞后,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测细胞内TNF-α、IL-1β、IL-8 mRNA的表达水平;应用免疫电泳迁移率变动分析(Electrophoretic mobility shift assay,EMSA)法检测细胞内NF-κB的激活。结果CAT 预孵后,TNF-α(正常对照组0.00±0.01,LPS组1.33±0.94,CAT预孵组0.65±0.59,CAT处理组1.31±0.07)、IL-1β(正常对照组0.00±0.05,LPS组0.83±0.05,CAT预孵组0.32±0.06,CAT处理组0.82±0.04)、IL-8(正常对照组0.00±0.01,LPS组1.03±0.20,CAT预孵组0.62±0.25,CAT处理组0.98±0.23)的表达较LPS组和CAT处理组明显降低(P<0.05)。NF-κB的核结合活性也减弱,但较正常对照组仍明显增强。结论CAT能降低SW480细胞对应激的反应,这一作用可能是通过抑制NF-κB的核结合活性,进而降低致炎细胞因子的表达完成的。     

骨髓来源肝细胞的初步研究

目的 验证骨髓细胞是否可以转化为肝细胞。方法 通过放射致死剂量照射的BALB/C雌性小鼠接受周龄相配的同系雄性小鼠的全骨髓移植后，分别在移植后1，2，4周和2个月分批处死移植存活的小鼠。分别在游离的肝细胞和肝脏的石蜡切片上用荧光原位杂交法检测Y染色体阳性肝细胞。结果 在移植后2个月的小鼠肝脏游离细胞和石蜡切片上均发现有Y染色体阳性肝细胞，数量极少，但确实存在。结论 在接受放射致死剂量照射但没有导致严重的急性肝脏损伤情况下，骨髓细胞可以转化为成熟的肝细胞。     

乳猪肝细胞的聚集培养术

目的　建立乳猪肝细胞与非实质细胞大量聚集培养技术。探讨获取大量高活性乳猪肝细胞的培养方法。方法　采用磁力悬浮培养技术和装置进行聚集培养。观察聚集体的形态 ,受损伤程度和白蛋白分泌功能 ,氨转化功能。结果　一次培养肝细胞数可达 2× 10 10 ～ 5× 10 10 个 ,聚集体肝细胞结构完整 ,相互之间形成胆管样结构等肝组织特异结构 ,保持良好生物活性。结论　聚集培养技术将细胞接种浓度提高 5倍 ,一次可制备足够数量的肝细胞 ,较好地满足构建杂合型人工肝时对生物材料的要求     

溃疡性结肠炎小鼠模型肠粘膜中细胞因子的表达和核转录因子κB的激活

目的:建立小鼠溃疡性结肠炎动物模型并检测其肠粘膜中致炎细胞因子TNF-α、IL-1β的表达和NF-κB的激活。方法用5%葡聚糖硫酸钠(DSS)口饲法制备小鼠UC模型;采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,对UC小鼠肠粘膜中TNF-α、IL-1β的表达水平进行半定量测定;应用免疫电泳迁移率改变分析(EMSA)法检测急性期和慢性期UC小鼠肠粘膜细胞NF-κB的激活。结果模型组肠粘膜中TNF-α、IL-1β的表达较正常对照组显著增加(P=0.009),NF-κB 的核内结合活性也显著增强。结论UC 的发生、发展过程伴随致炎细胞因子表达的升高,可以加剧炎症,致上皮细胞凋亡。该过程可能受NF-κB激活的调控。     

柞蚕抗菌肽对大鼠大肠癌的防治作用

目的观察柞蚕抗菌肽体外抗肿瘤作用及对大鼠大肠肿瘤发生的影响。方法采用MTT法检测柞蚕抗菌肽对人结肠癌细胞株LS-174T、人胃粘膜上皮细胞株GES-1的杀伤作用。以二甲肼(DMH)诱发的Wistar大鼠大肠肿瘤为模型,观察柞蚕抗菌肽对大鼠大肠肿瘤的防治作用;DMH诱癌及柞蚕抗菌肽灌胃均18周,第33周结束实验。结果柞蚕抗菌肽在体外对人结肠癌细胞株具有选择性杀伤作用;灌胃可明显降低大鼠大肠肿瘤发生率(65%,P<0.01),但大肠癌平均个数及肿瘤质量指数无显著性差异(P>0.05)。结论柞蚕抗菌肽对DMH诱导的大鼠大肠癌具有预防作用。     

线粒体DNA变异在大肠癌发病中的作用与机制研究

目前认为肿瘤的生物学特征不仅取决于核内遗传物质，而且与核外线粒体DNA的改变也可能有重要的关系。为研究线粒体DNA的变异在大肠癌发病中的作用与机制，本文对4株大肠癌细胞系和1株原代培养的正常肠上皮细胞的线粒体DNA的D-环区进行了对比研究。