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111.
112.
人源性大肠癌cDNA噬菌体表达文库的构建及鉴定 总被引:7,自引:1,他引:7
目的 构建人源性大肠癌cDNA噬菌体表达文库。方法 从人大肠癌组织中提取总RNA ,RT PCR反转录合成cDNA第 1链 ,用长距离PCR技术合成cDNA第 2链 ,除去小于 5 0 0bp的小片段后与λTriplEx2噬菌体连接 ,体外包装 ,构建成cDNA噬菌体表达文库。转染E .coliXL1 Blue大肠杆菌 ,滴定文库的滴度 ,确定文库容量大小 ,测定重组率。用EXTagTM酶做PCR和SfiⅠ酶切鉴定插入的cDNA片段大小。结果 构建成含 2 .39× 10 6pfu/ml重组子的人大肠癌cDNA噬菌体表达文库 ,重组率为 97.5 %。插入的外源cDNA片段大小为 5 0 0bp~ 4kb ,平均长约 1.4kb。 结论 成功构建高质量人源性大肠癌cDNA噬菌体表达文库 ,适合于免疫筛选cDNA克隆的人大肠癌相关抗原基因。 相似文献
113.
黑斑--息肉综合征(Peutz-Jeghers syndrome,PJS)是一种少见的显性遗传性疾病。南方医院1998年1月至2003年4月共经胃肠镜检查及病理检查确诊为错构瘤、P-J息肉27例,符合PJS18例,现总结报道如下。 相似文献
114.
国内外资料表明,慢性肝炎及肝硬化导致癌变的危险性很大,比自然人群肝癌发生率高100倍以上。因此.应用高灵敏度的检测方法,对慢性肝炎及肝硬化患进行早期诊断。在肝癌二级防治中具有重大意义。而常规肝功能试验在临床应用中往往由于敏感性太低而不能试验早期检出慢性肝病。 相似文献
115.
Geneticinstabilityisacommonpropertyofmanycancercellsincludingthoseofhereditarynon-polyposiscolorectalcancer(HNPCC).Anovelformofgeneticinstabilityinvolvingsomaticalterations,suchasdeletionsandinsertionsinsimplerepeatedse-quences(ormicrosatellites),hasbeenidentified.Mi-crosatellitesarerelativelyshortandtandem-repeatse-quencesscatteredthroughoutthegenome[1].Ubiqui-tousalterationsinthesesequenceswereinitiallyde-tectedbyunbiasedDNAfingerprintinginasubsetofcolorectalcancer[2],implyingtheprese… 相似文献
116.
目的:确定结肠癌Ls-174T细胞中过量表达的真核细胞起始因子-4E(eukaryotic initiation factor-4E,eIF-4E)是否影响乙酰肝素酶(heparanase)mRNA的核浆转运,并改变乙酰肝素酶表达水平.方法:脂质体包裹与eIF-4E mRNA翻译起始点互补的asODN转染人大肠腺癌细胞Ls-174T.使用Western blot,RT-PCR方法分别检测eIF-4E被阻抑后其转录和翻译水平的改变.乙酰肝素酶mRNA在细胞内核浆分布水平采用Northern blol,检测,其蛋白表达采用Western blot检测.结果:asODN转染显抑制elF-4E基因和蛋白表达.伴随eIF-4E被阻抑,Northern blot结果显示更多乙酰肝素酶mRNA滞留在细胞核,且其蛋白表达量也下降.结论:阻抑eIF-4E可影响LS-174T细胞乙酰肝素酶mRNA核浆转运,并降低乙酰肝素酶蛋白表达.此反义策略可应用于实验性和临床抗人类大肠癌转移的基因治疗. 相似文献
117.
应激性溃疡大鼠血浆EGF水平和胃上皮细胞凋亡的变化 总被引:4,自引:0,他引:4
目的 探讨应激性溃疡大鼠胃黏膜上皮细胞凋亡以及血浆表皮生长因子 (epidermalgrowthfactor,EGF)的变化。方法 制作大鼠水浸束缚应激 (water immersionandrestraintstress,WRS)模型。采用原位末端标记(TUNEL)法、电镜和荧光染色共聚焦显微镜方法分别检测胃黏膜上皮细胞的凋亡 ;放免法检测不同时段WRS大鼠血浆EGF的含量。结果 实验组与对照组相比 :血浆EGF含量明显下降 (P <0 .0 5 ) ,胃黏膜上皮细胞凋亡明显增加 (P <0 .0 5 ) ,溃疡指数 (UI)明显增加 (P <0 .0 1) ,且与应激时间呈正相关 (r =0 .975 0 ,P <0 .0 1)。结论 应激促使大鼠胃上皮细胞凋亡 ,凋亡参与了胃黏膜的损害过程 ;应激引起血浆EGF含量的下降 ;胃黏膜的损害可能与失去内源性EGF对胃黏膜的保护作用有关。 相似文献
118.
以二甲基肼诱发Wistar大鼠大肠癌过程中,伴有抗氧化酶系统功能受损,表现为GSH-Px活性的持续性降低。肠粘膜LPO含量在诱癌鼠中逐渐降低,这种现象可能与恶性细胞形成时膜成分的改变有关。 相似文献
120.
目的炎症性肠病(inflammatoryboweldisease,IBD)肠道粘膜炎症与转录因子核因子-κappaB(NF-κB)密切相关。该研究探索NF-κB抑制剂姜黄素IBD动物模型大鼠大肠粘膜炎症因子调控的机制。筛选IBD的靶向治疗药物。方法建立以5%三硝基苯磺酸(5%TNBS)诱导的肠炎大鼠模型,肠炎的大鼠给予含2.0%的姜黄素饲料,药物阳性对照组给予含0.5%柳氮磺胺吡啶(SASP)的饲料,模型组及阴性对照组给予普通饲料。评价病理组织学评分的变化。应用半定量RT-PCR检测炎症因子mRNA的表达。结果姜黄素改善肠炎模型大鼠病理组织学症象。姜黄素可显著抑制肠炎模型大鼠肠粘膜致炎因子IL-1βmRNA的高表达,同时可显著提高抗炎因子IL10mRNA的低表达,抗炎因子IL-4mRNA在各组均未见表达。结论研究显示,NF-κB抑制剂姜黄素可调控IBD鼠科模型中的炎症因子IL-1βmRNA和IL-10mRNA表达。姜黄素有可能是一种有潜能的IBD的靶向药物。 相似文献