葡聚糖硫酸钠致溃疡性结肠炎小鼠模型的建立

目的　建立小鼠溃疡性结肠炎模型。方法　给小鼠自由饮用5％葡聚糖硫酸钠（DSS）溶液7d后,改为蒸馏水自由饮用10d,如此进行4个循环,每天观察症状。在第1个循环和第4个循环后剖杀小鼠,取出整段结肠行实体显微镜观察及切片组织学研究。结果　所观察的症状、实体显微镜像、组织学病理改变均与人类溃疡性结肠炎类似。结论　此模型制作方法简便,重复性良好,可应用于多种实验研究。     

食用含姜黄素饲料抑制大鼠实验性肝癌

姜黄素的肿瘤化学预防作用和抗癌作用引起了广泛的关注[1,2 ] 。本研究欲观察姜黄素对亚硝胺诱导的大鼠原发性肝癌的化学预防作用 ,评价姜黄素在肝癌化学预防中的作用。一、材料和方法1.动物模型 :根据文献 [3],6周龄的清洁级雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠 ,体重在 170～ 2 10ｇ。分为对照组 (10只 )、诱癌组 (18只 )、姜黄素防护组Ａ(18只 )和姜黄素防护组Ｂ(12只 )。诱癌组给予一次性腹腔注射二乙基亚硝胺 4 0ｍｇ/ｋｇ ,4周后在饮水中加入 12 0× 10 -6的亚硝基化合物 (ｎｉｔｒｏｓｏｍｏｒｐｈｏｌｉｎｅ)至32周。预防组Ａ在诱癌前 7ｄ给予含 2…     

大肠癌患者可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅰ的检测

进一步了解大肠癌患者的异常免疫状态，探讨ｓＴＮＦＲＩ检测的临床意义，方法用双单抗夹心酶联合免疫吸附法检测ｓＴＮＦＲＩ含量。结果大肠癌Ｃ期，Ｄ期病人的血ｓＴＮＦＲＩ浓度显著高一地正常对照，为１３０１９０±１３７９２０ｕ／Ｌ、２０７４００±Ｓ比５１６４０±２６６７０ｕ／Ｌ。     

幽门螺杆菌尿素酶金标抗体检查法与14C-尿素呼气试验检测幽门螺杆菌感染的对照研究

幽门螺杆菌(Helicobacter pylori，简称Hp)感染是慢性胃病发病和迁延不愈的重要因素，确定有无Hp感染是对慢性胃炎和消化性溃疡进行有效治疗的前提条件之一。多数Hp早期感染患多无明显的临床症状，内镜下的表现也较轻。我们通过对自然(家庭)人群的Hp-IgG免疫印迹法流行病学调查研究初步发现，无症状Hp-IgG抗体滴度通常较高。     

克罗恩病CARD15/NOD2基因突变的研究

目的 发现与中国人克罗恩病（CD）发病相关的单核苷酸多态性（SNP）及其与临床特点的关系.方法 临床资料完整的CD、溃疡性结肠炎（UC）患者及健康体检者各30例.提取人血白细胞基因组DNA,PCR扩增NOD2基因第4、8、11外显子,纯化后直接测序.结果 5例CD患者有SNP改变,其中2例为P268S,1例为R459R,2例为P268S和R459R,而在UC患者和健康人中各检测到1例R459R.所有研究对象未发现R702W、G908R及3020insC改变.CD有4例P268S,与UC和健康体检者比较差异有统计学意义（χ^2=8.037,P＜0.05）.4例P268S CD患者病变均在回肠（χ^2=9.231,P=0.01）,发病年龄小于20岁（χ^2=10.769,P＜0.01）,并发肠腔狭窄而需手术（χ^2=7.972,P＜0.01）,2例有P268S和R459R的患者病情较重,多次复发.结论 P268S可能是CARD15/NOD2基因中与中国人CD相关的SNP,与患者发病年龄、病变部位及肠腔狭窄明显相关,与患者性别及病变严重程度无关.     

大肠癌LoVo/Adr细胞多药耐药性与谷胱甘肽S-转移酶关系的研究

目的：阿霉素诱导大肠癌LoVo细胞产生耐药性的同时观察谷胱甘肽S－转移酶活性和含量的变化，探讨其与耐药的关系。方法：采用阿霉素浓度递增法诱导耐药；采用MTT法检测耐药性；GST－π检测采用免疫组化染色；谷胱甘肽S－转移酶添生测定采用1氯－2，3－二硝基苯法。结果：建立了人大肠癌多药耐药LoVo/Adr细胞株；LoVo/Adr细胞GST－π蛋白表达显高于LoVo细胞；LoVo/Adr细胞与LoVo细胞GST活性相比，没有显差异。结论：耐药的LoVo/Adr细胞株其耐药机制可能与GST及其同功酶有关。     

携带凋亡素基因的重组腺病毒载体对小鼠Hepa1-6肝细胞癌模型的生长抑制作用研究

目的 探讨携带凋亡素基因(vp3 gene)的重组腺病毒载体(AdAFPvp3)治疗C57BL/6小鼠肝细胞癌模型的可行性.方法 检测腺病毒AdAFPvp3、腺病毒AdCMV-eGFP滴度.建立c57BL/6小鼠皮下荷肝细胞癌模型(n=24),计算成瘤率.待小鼠皮下肿瘤长至5mm左右时,随机分为治疗组、AdCMV-eGFP对照组、PBS对照组,每组8只,分别于瘤内注射AdAFP~(5×108pfu/100μl)、AdCMV-eGFP(5×108pfu/100μl)和PBS(100μl),隔日1次,共2次.每日测量肿瘤体积并观察有无不良反应,注射后7d处死小鼠,计算抑瘤率.肿瘤、肝脏和脾脏均行病理检查,用TUNEL法鉴定vp3在体内诱导肝癌细胞死亡的方式.结果 腺病毒ALGAE-Pvp3、AdCMV-eGFP滴度均为5×109pfu/ml.皮下肝癌成瘤率100%.瘤内注射AdAFPvp3后,小鼠肿瘤体积较病毒AdCMV-eGFP对照组、PBS对照组明显缩小(P<0.05).治疗组抑瘤率78.87%,明显高于AdCMV-eGFP对照组(5.01%,P<0.05),治疗未见明显不良反应.凋亡素在体内以凋亡方式诱导肝癌细胞死亡.结论 重组腺病毒载体AdAFPvp3基因治疗能抑制小鼠实验性肝细胞癌生长.     

结肠腺癌细胞株eIF-4E对NF-κB表达的影响及诱导凋亡机理的探讨

目的研究真核细胞起始因子(Eukaryotic Initiation Factor 4E,eIF-4E)对NF-κB表达及活性水平的影响,并对其阻滞后诱导肿瘤细胞凋亡的途径进行探讨.方法应用脂质体包裹与eIF-4E mRNA翻译起始点互补的反义寡核苷酸(asODN),处理人大肠腺癌细胞LS-174T.使用Western blot和RT-PCR方法分别检测eIF-4E被阻抑后其转录和翻译水平的改变.EMSA用来比较eIF-4E阻滞前后NF-κB活性的改变.采用流式细胞仪检测LS-174T细胞凋亡.结果eIF-4E被阻抑表达后,NF-κB蛋白表达和活性水平也有显著下降.伴随eIF-4E表达和NF-κB活性水平下降,LS-174T细胞的凋亡率显著升高.结论本试验证明NF-κB受eIF-4E的翻译调控,eIF-4E的抗凋亡作用部分可能是通过调节NF-κB活性来实现的.此结论对于结肠癌试验性和肿瘤临床的基因治疗具有一定意义.     

大肠侧向发育型肿瘤细胞株的建立及其鉴定

目的 为了深入研究大肠侧向发育型肿瘤(LST)细胞的生物学特性及其发生发展的机制。方法采用人LST组织进行肿瘤细胞建株及细胞分离与原代培养,传代至70代进行细胞鉴定．包括细胞的形态结构分析、染色体分析和免疫组化分析等,并与非LST细胞作对比。结果 LST细胞为上皮来源的肿瘤细胞,多形性上皮细胞占大多数,其有近似肿瘤细胞的生长特性,群体倍增时间为36h;染色体数量为42-66,85％在三倍体范围内,并具有异常染色体核型;免疫组织化学观察ESA、CK20均呈阳性;超微结构具肿瘤细胞样表现和特征。结论成功建立了1个LST细胞株,并命名为LST-R1细胞,为进一步深入研究LST细胞的生物学特性及大肠癌的发生发展机制奠定了基础。