不同增溶剂对超临界CO2提取虎杖中自藜芦醇和大黄素影响的研究

目的考察不同增溶剂、提取压强、提取次数对采用超临界CO2（SC—CO2）提取虎杖中白藜芦醇和大黄素提取效果的影响,并与常用的回流提取法进行比较。方法选用丁二酸二异辛酯磺酸钠（AOT）、聚维酮（PVPk-90）、泊洛沙姆（Poloxamer188）、聚山梨酯-80、乙醇作为增溶剂,采用SC—CO2提取虎杖中的白藜芦醇和大黄素,结合单因素优选最佳提取条件,并与回流提取法进行比较。结果使用AOT作增溶剂时白藜芦醇提取率最高,为0．304mg／g;而使用乙醇作为增溶剂时提取率最低,仅为0．015mg／g。大黄素的提取率受增溶剂的影响相对较小,使用PYP时提取率最高,为1．008mg／g,而使用聚山梨酯-80提取率最低,为0．679mg／g,但与使用乙醇的提取率（0．745mg／g）不存在显著差异（P〉0．05）。通过单因素获得最佳提取工艺：P=25MPa、T=50℃、AOT浓度为0．05mol／L、提取次数为3次,在此条件下白藜芦醇的提取率为0．31mg／g、大黄素提取率为0．97mg／g;与回流提取法相比,大黄素的提取率增加了86．5％．而白藜芦醇的提取率降低了81．5％。结论AOT、PVPK-90、Poloxamer188能够提高SC—CO2提取白藜芦醇和大黄素的提取率,SC—CO2作为一种新兴中药提取技术,具有提取效果好、低温提取、流程简单、绿色环保等特点,该法可用于虎杖中白藜芦醇和大黄素的提取,但更适合大黄素的提取。     

钩藤对金银花水提工艺中绿原酸保留率的影响研究

目的 考察钩藤对金银花水提工艺中绿原酸保留率的影响.方法 采用HPLC测定金银花药材供试品、钩藤药材供试品、热毒清复方钩藤缺样供试品、金银花、钩藤药材合并提取供试品中绿原酸的含量.结果 金银花100℃提取的保留率为31.11％(提取时间过短,绿原酸保留率低),与钩藤合提时保留率为16.52％;金银花80℃温浸的保留率为63.98％,与钩藤合提时保留率为22.70％.结论 钩藤与金银花合并提取时,钩藤可导致绿原酸保留率下降.     

一项来自2029位受访者对临床试验认知度与参与度的调查研究

目的 了解公众对临床试验认知度与参与意愿的现状,为提高我国公众对临床试验的认知度及参与度提供参考依据。方法 本研究采用电子问卷形式,国内共43家医疗机构参与调研,来院就诊的患者、家属等通过扫码参加匿名线上问卷调查。收集的数据以描述性为主,对认知度得分进行二分类,得分大于等于4为良好。用SAS9.4软件进行统计分析,关于参与度,采用频率描述法进行分析。结果 本次调查共有2 029例公众参与,共收集到2 029份有效问卷。关于临床试验认知度多因素分析显示,年龄、学历、职业,关注医学节目的频率,是否有从事医疗卫生行业工作的亲友和是否拥有保险是公众认知度的影响因素。临床试验参与度方面,52.8%的受访对象表示愿意参与临床试验。其中最主要动机为得到最前沿的治疗方法,占比为67.7%,其次为获得免费的药物及检查,占比62.2%,得到更好的医疗服务,占比54.5%;11.7%的调查对象不愿意参与临床试验,拒绝的首要原因为担心新药副作用太大,占比63.4%,其次为对新药疗效未知的担心,占比59.2%。结论 本次研究表明相较既往研究,公众对临床试验的认知度有一定提高,但参与度仍有提升空间,应契合公众需求...     

月经周期凝血功能的临床观察

目的:探讨月经周期不同阶段手术患者凝血功能变化.方法:对月经周期进行不同分期(分别分为卵泡期和黄体期及围排卵期和围月经期),并分别测定PT(S)血浆凝血酶原时间、FIB(g/L)纤维蛋白原、APTT(S)活化部分凝血酶原时间、TT(S)凝血酶时间.结果:卵泡期和黄体期及围排卵期和围月经期所测定的PT(S)、FIB(g/L)、APTT(S)、TT(S)有显著差别(P＜0.05).结论:凝血功能随着经后时间的推移有下降的趋势.     

微乳液相色谱法同时测定注射用双黄连冻干粉中三组分的含量

目的 建立注射用双黄连冻干粉中绿原酸、连翘苷、黄芩苷的微乳液相色谱(MELC)测定方法. 方法 以微乳为流动相(2.0%十二烷基硫酸钠-0.4%正己烷-6.0%乙醇-水,pH=3); 采用Hypersil BDS C18柱(4.6 mm×150 mm,5 μm),柱温为30 ℃,检测波长278和326 nm. 结果 绿原酸、连翘苷、黄芩苷的线性范围和相关系数分别为0.8~192.0 μg.mL^-1,r=0.999 4; 0.4~102.9 μg.mL^-1,r=0.998 8; 0.9~216.2 μg.mL^-1,r=0.999 3; 平均回收率分别为99.63%(RSD=0.17%),99.90%(RSD=0.87%),101.02%(RSD=0.99%). 结论 微乳液相色谱法可以实现注射用双黄连冻干粉中三组分含量的同时测定.     

HBV-DNA荧光定量PCR检测的临床意义

目的:荧光定量聚合酶反应(FQ-PCR)检测血清中乙型肝炎病毒(HBV-DNA)的临床意义。方法:用荧光探针技术相结合所产生的实时荧光定量聚合酶反应。结果:150例乙型肝炎标本中,有91例大三阳(HBsAg+、HBeAg+、HBcAb+),患者血清HBV-DNA阳性率100%,平均浓度2.8×106Copies/ml;有19例小二阳(HBsAg+,HBcAb+),患者血清HBV-DNA阳性94.7%,平均浓度4.3×l05Copies/ml;有40例小三阳(HBsAg+,HBeAb+,HBcAb+)患者血清HBV-DNA阳性率77.5%,平均浓度1.2×104Copies/ml。结论:FQ-PCR是了解HBV-DNA在体内复制和判断疗效的有利手段,并具有快速、特异、灵敏等优点,可真实反应HBV-DNA复制情况及病情变化,对乙肝临床诊断及治疗有较大的指导意义。     

胃癌患者外周血Cyttel循环肿瘤细胞检测及临床意义

目的观察莱尔(Cyttel)检测法检测胃癌患者外周血中循环肿瘤细胞(CTCs)的结果,同时评价检测结果与临床病理特征的关系。方法前瞻性选择65例胃癌患者(观察组)、50例胃良性疾病患者(对照组)作为研究对象,均于治疗前抽取两组患者的外周静脉血4 ml检测CTCs,检测方法为Cyttel循环肿瘤细胞检测法,对比两组患者CTCs阳性率以及检测结果与胃癌患者临床病理特征的关系。结果观察组CTCs阳性率(72.31%,47/65)明显高于对照组(8.0%,4/50),差异具有统计学意义(P0.05);观察组患者的CTCs与性别、年龄、肿瘤分期、分化程度、淋巴转移与否无关(P0.05),但与肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)、糖类抗原19-9(CA19-9)、CA72-4、脉管侵犯有关(P0.05)。结论 Cyttel循环肿瘤细胞检测法对CTCs的检出率较高;与肿瘤标志物CEA、糖类抗原19-9、CA72-4、脉管内查见癌栓有较高的相关性。     

TLR4对母-胎界面滋养层细胞生物学行为的影响

目的:观察Toll样受体(TLR4)在着床前胚泡和子宫内膜的表达,进一步探讨TLR4对滋养层细胞生物学行为的影响。方法:采用免疫组织化学染色法对TLR4蛋白在着床前小鼠胚泡和子宫内膜的表达进行定位分析;利用小鼠胚泡与人蜕膜细胞共培养着床模型,观察抗TLR4抗体对胚泡滋养层细胞粘附和铺展的影响。结果:TLR4蛋白在小鼠胚泡的内细胞群和滋养层细胞的细胞质内呈阳性表达;不同浓度TLR4抗体组的粘附率与对照组相比,无统计学意义(P0.05);100ng/ml、200ng/ml和400ng/ml组的铺展率分别为(64.3±4.0)%、(51.3±4.1)%、(46.2±4.2)%,均低于对照组的(83.5±3.3)%(P0.05);扩展面积分别为(63.5±5.0)×10~3、(60.2±5.2)×10~3、(58.5±4.8)×10~3μm,均明显低于对照组(194.12±8.24)×10~3μm(P0.01),并且其扩展面积以剂量依赖的方式受到抑制。结论:TLR4不影响胚泡滋养层细胞的粘附,可能与胚泡的侵入和滋养层细胞的进一步生长有关。     

超高压技术在提取中药有效成分中的应用

近几年超高压技术作为一种新型的提取技术开始应用于中药及天然产物有效成分的提取,并凸显出快速、高效、操作温度低及节能环保等诸多优点.本文将对超高压提取设备及其原理、影响因素及在中药有效成分提取中的应用加以综述.     

SIRT5对高糖环境下结肠癌细胞增殖、凋亡、迁移的影响及机制探讨

目的探讨Sirtuin5(SIRT5)对高糖环境下Lovo细胞增殖、凋亡及迁移的影响及可能机制。方法高糖培养基(葡萄糖含量4 500 mg/L)及普通培养基(葡萄糖含量2 000 mg/L)培养SIRT5高表达的人结肠癌Lovo细胞,进行慢病毒转染实验,高糖培养基及普通培养基各分为空白对照组(MOCK组,无干预)、阴性对照组(NC组,对照RNAi慢病毒转染)和SIRT5-RNAi组(KD组,SIRT5-RNAi慢病毒转染),用MTT法检测各组细胞1～5 d增殖能力变化,AnnexinⅤ检测各组细胞凋亡率,划痕实验法检测各组细胞迁移率;应用实时荧光定量PCR(qPCR)检测各组细胞SIRT5、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、M2型丙酮酸激酶(PKM2)及己糖激酶-2(HK2)mRNA的表达变化,Western blot检测各组上述指标的蛋白表达水平。结果高糖培养基中,KD组与NC组、MOCK组比较,3～5 d时增殖水平降低,凋亡率增加,而24 h迁移率降低(P<0.05),且SIRT5、mTOR、HIF-1α、PKM2及HK2 m RNA及蛋...