蛋白负荷后肾脏功能储备检测的临床应用

本文采用蛋白负荷后肾脏储备检测的方法研究丁紫癜性肾炎、肾病综合征等患儿的基础肾小球滤过率(BGFR)、试验肾小球滤过率(TGFR)、肾脏储备及肾小球使用串。结果:正常人肾脏储备为正值,使用率为65%;紫癜性肾炎BGFR增高,TGFR明显下降,肾脏储备显著低下,且可维持数月之久;肾病患儿BGFR升高,肾脏储备低于正常人。本文结果表明,肾脏病患儿有不同程度的肾小球高滤过。由于肾脏储备能力低下,应尽量避免肾功能的进一步损害。     

CD2AP、F-actin在肾病大鼠中的表达及意义

目的：观察CD2-associated protein（CD2AP）、肌动蛋白微丝（F-actin）在氨基核苷肾病大鼠肾小球中的表达变化及其意义。 方法： 通过建立大鼠氨基核苷肾病模型，采用免疫组织化学、蛋白质印迹技术观察CD2AP在不同时点肾病大鼠肾小球中的表达和分布变化，采用荧光技术检测肾小球F-actin含量的变化。 结果： ①肾小球足细胞CD2AP的表达在肾病模型建立的早期即有下调；在肾病大鼠蛋白尿的高峰期，CD2AP的表达明显下降（P<0.01）；在肾病大鼠的疾病恢复期，CD2AP的表达逐步恢复正常。②肾小球足细胞CD2AP表达量的变化与肾病大鼠24 h尿蛋白的变化呈负相关（r=-0.865，P<0.01）。③在肾病大鼠蛋白尿的高峰期，肾小球F-actin含量明显下降（P<0.05）。④肾小球CD2AP蛋白表达量和肾小球F-actin荧光定量变化呈正相关（r=0.873，P<0.01）。 结论： ①CD2AP、F-actin的表达变化在蛋白尿的发生机制中有着重要作用。②CD2AP可能是判断肾小球足细胞损伤的一个早期重要指标。     

血管紧张素Ⅱ通过JNK-c-Jun/AP-1信号通路调控系膜细胞转化生长因子β1表达

目的 探讨c-Jun氨基末端激酶(JNK)-c—Jun／活化蛋白(AP)-1信号转导通路在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的肾小球系膜(MC)细胞转化生长因子β1(TGF—β1)表达中的调控作用。方法 应用核酸酶保护法检测系膜细胞TGF—β1mRNA表达。应用凝胶电泳迁移率(EMSA)、超迁移实验和非放射性激酶活性检测法检测系膜细胞内AP—1活化、AP-1的组成及JNK活性。应用ELISA法检测培养上清中纤连蛋白(FN)。结果 AngⅡ可诱导MC内JNK活化，刺激30min后，JNK活性达到高峰，1h后几乎恢复至正常水平。AngⅡ刺激后MC内AP-1活性显著增强，活化的AP-1主要含有c-Jun和c—Fos亚基。AngⅡ可促进MC表达TGF—βl及分泌FN，抗TGF—β1抗体显著抑制AngⅡ促进的FN分泌。JNK特异性抑制剂SP600125显著抑制AngⅡ诱导AP-1活化、TGF—β1表达及FN分泌。结论 AngⅡ-JNK—c-Jun／AP-1-TGF—β1-FN信号转导通路在肾小球硬化中发挥一定作用，SP600125能部分抑制AngⅡ诱导的AP-1活化、TGF—β1表达及FN的合成，可能具有一定的治疗作用。     

SHR大鼠前额叶皮层基因表达谱特征的初步分析

【目的】探讨注意缺陷多动障碍(attention-deficit hyperactivity disorder,ADHD)动物模型SHR(spontaneously hypertensive rats)大鼠与对照组WKY(Wistar-Kyoto rats)大鼠前额叶组织基因表达谱差异,试图从基因网络角度全面理解ADHD的分子机制及差异表达基因与其生物学特征间的关系。【方法】提取SHR/WKY大鼠前额叶组织mRNA,反转录成cDNA,体外转录并生物素标记cRNA,片断化后,分别与Affymetrix公司制备寡核苷酸RAE230A基因芯片杂交,对二者差异表达基因进行生物信息学分析。【结果】SHR大鼠与对照组WKY大鼠前额叶皮层组织中差异表达2倍以上的探针组数209个。对代表已知功能的67个独立基因进行分类,结果发现差异表达基因以神经发育相关、代谢相关、信号转导、免疫相关、转录调节相关基因为主,同时还涉及突触可塑性、髓鞘形成、学习记忆、高血压、细胞凋亡等不同层次、不同功能的基因群。【结论】SHR大鼠前额叶皮层组织的基因表达谱存在神经发育相关基因的表达异常、免疫相关基因的表达下调、多个转录因子的普遍上调和部分单胺类神经递质相关基因表达上调等特征。     

糖皮质激素抑制实验性肾炎大鼠肾组织中核因子-κB活化及单核细胞趋化蛋白-1表达

目的：探讨核因子-κB(NF-κB)活化在肾小球肾炎发病机制中的作用及糖皮质激素对NF-κB活化的调节作用。方法：肾毒血清肾炎应用兔抗鼠肾小球基底膜肾毒血清制备。模型组：注射肾毒血清后不加任何治疗,第14 d处死;糖皮质激素干预组(治疗组)：于肾毒血清注射后第1～14 d给予地塞米松每日0.125 mg/kg腹腔注射。采用免疫组化及医学图像分析系统观察肾小球及肾小管中NF-κB活化和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的表达,并分析其与蛋白尿和肾小球细胞数之间的关系。结果：模型组肾小球及肾小管中NF-κB活化较正常对照组显著上调,分别为(38.27±8.83)% vs (1.82±0.68)%和(68.46±12.94)% vs (16.89±4.47)%,P均<0.01;模型组肾小球及肾小管中MCP-1表达分别为(24.37±7.06)个/gcs和(54.78±11.49)%,较正常对照组显著升高(P<0.01),肾小球中NF-κB活化和MCP-1表达与单核细胞浸润和蛋白尿密切相关;糖皮质激素干预组肾小球及肾小管中NF-κB活化和MCP-1表达均显著下调。结论：NF-κB活化在肾小球肾炎发病机制中发挥重要作用,抑制NF-κB活化可能是糖皮质激素抗肾炎作用的机制之一。     

脂肪组织中TNF-α基因表达与神经肽Y Y5受体反义基因减肥降脂作用关系的研究

目的：探讨脂肪组织中TNF-α基因表达与神经肽Y（NPY）Y5受体反义基因减肥降脂作用的关系。方法：建立高营养饮食诱导的肥胖大鼠模型，侧脑室插管后注射NPY Y5受体反义，错义寡核苷酸或生理盐水，观察肥胖大鼠腹腔内脂肪组织湿重与血脂的变化，采用RT－PCR技术检测腹膜后胎肪组织中TNF-α基因的表达水平。结果：（1）高营养饮食诱导下，肥胖大鼠腹腔内脂肪组织湿重与血脂水平均明显高于正常大鼠，腹膜后脂肪组织中TNF-α基因的表达水平则显著高于正常大鼠；（2）NPY Y5受体反义寡核苷酸干预后，肥胖大鼠腹腔内脂肪组织湿重与血脂水平均明显降低，腹膜后脂肪组织中TNF-α基因的表达水平则显著低于肥胖对照大鼠。结论：侧脑室注射NPY Y5受体反义寡核苷酸可显著低肥胖大鼠的体脂，血脂，其机制可能与腹膜后脂肪组织TNF-α基因的表达下调有关。     

超声可视下前锯肌平面阻滞在胸腔镜手术镇痛中的应用

目的:对比超声可视下竖脊肌平面(ESP)阻滞和前锯肌平面阻滞(SAPB)在胸腔镜手术镇痛的效果。方法:选择2018年10月至2019年10月于余姚市人民医院胸外科行择期胸腔镜手术患者60例,根据美国麻醉医师协会(ASA)评分均为Ⅰ～Ⅱ级。按照随机分组法将其分为超声可视下竖脊肌平面阻滞联合静脉镇痛泵组(对照组,30例)和...     

神经肽Y Y5受体基因反义寡核苷酸脑室给药对肥胖大鼠外周瘦素抵抗的影响

目的 探讨神经肽Y（NPY）Y5受体基因反义寡核苷酸脑室给药对饮食所致肥胖大鼠外周瘦素抵抗的影响。方法 （1）建立高营养饲料诱导的肥胖大鼠模型，侧脑室插管后注射NPY Y5受体基因反义、错义寡核苷酸及生理盐水，观察大鼠腹膜后脂肪湿重的变化；（2）采用ELISA双抗体夹心法测定血清瘦素含量、放免法测定血清胰岛素含量，RT－PCR技术检测脂肪组织中ob基因的表达水平，评价该疗法对肥胖大鼠外周瘦素抵抗的影响。结果 经NPY Y5受体基因反义寡核苷酸干预后，肥胖大鼠腹膜后脂肪湿重、血清胰岛素含量、血清瘦素含量、腹膜后脂肪组织ob基因mRNA表达水平均明显降低，降腹膜后脂肪组织湿重与肥胖错义组差异未达到统计学意义外，其余指标与肥胖盐水组、肥胖错义组相比差异均有显著性，而肥胖错义组与肥胖盐水组之间各观察指标差异均无显著性。结论 侧脑室注射NPY Y5受体基因反义寡核苷酸可显著减少营养性肥胖大鼠的腹膜后脂肪，降低肥胖大鼠脂肪组织ob基因表达及血清瘦素、胰岛素含量，改善外周瘦素抵抗。     

健康与重症感染新生儿血清纤维结合蛋白的检测

对４６例健康新生儿与５９例重症感染新生儿进行了血清纤维结合蛋白的检测。检测结果示重症感染新生儿血清Ｆｎ值明显低于健康新生儿，二者有高度显著差异，血Ｆｎ降低程度与病情严重程度一致，随病情恢复含量增高，因此检测血Ｆｎ可作为诊断新生儿感染的一种观察指标，对病情严重程度及预后的估计有一定的参考价值。     

热休克蛋白27在单侧输尿管梗阻大鼠肾小管间质损伤中的表达

目的：研究肾小管间质损伤大鼠肾组织中热休克蛋白27(HSP7)的表达及其可能的作用。方法：建立单侧输尿管梗阻(UU0)肾小管间质损伤大鼠模型，应用组织病理学和免疫组织化学SP法观察模型组和对照组大鼠肾小管间质损伤情况，以及HSP27的表达。结果：对照组肾小球、少数肾小管和集合管HSP27弱阳性。模型组梗阻肾皮质HSP27的表达明显上调，分布于扩张的肾小管，肾小管HSP27阳性表达率于实验第3天达高峰，以后随着肾小管间质损伤程度的加重逐渐下降，并与肾小管损伤指数呈负相关。结论：肾小管间质损伤过程中，皮质肾小管HSP27表达明显上调：HSP27的表达可能是损伤肾小管上皮细胞的自身保护反应。