不同血清型汉坦病毒基因重排的研究

目的探明汉坦病毒HTN型与SEO型、HTN型与PHV型之间基因重排的频率和特点。方法分别用相同滴度的汉坦病毒HTN型与SEO型(76-118株与SR-11株),及汉坦病毒HTN型与PHV型(76-118株与PHV株)毒株分别混合感染VeroE6细胞,用空斑形成试验挑选子代病毒克隆,挑得的单个病毒克隆在VeroE6细胞上扩增。分别用分型引物对子代病毒进行RT-PCR实验,以确定子代病毒L、M、S片段核酸的来源,鉴定子代病毒基因型。结果发现76-118株与SR-11株混种的子代病毒株基因30/44株来源于亲代病毒,9/44株子代病毒发生了基因片段重排。76-118株与PHV株混种的子代病毒株基因26/36株来源于亲代病毒,3/36株子代病毒发生了基因片段重排。76-118株与SR-11株混种的子代病毒株的基因重排率(20.45%)明显高于76-118株与PHV株混种的子代病毒株(8.33%)。结论这种重排率的差异可能是由于HTN型与SEO型HV基因核酸序列之间的同源性较高,而更容易发生基因重排。而HTN型与PHV型HV基因核酸序列之间的同源性较低,发生基因重排的机会显著降低。     

老年人流行性出血热的特点、并发症及预后分析

目的 :分析老年人流行性出血热 (EHF)的特点 ,总结诊断与治疗体会。方法 :对老年 (≥ 6 0岁 )EHF 131例的诊断、治疗及转归进行分析 ,并与同期收治的非老年组 (<6 0岁 )EHF 12 0例进行比较。结果 :老年EHF占同期EHF(973例 )的 13 6 % ,病死率 7 8%。老年EHF重型和危重型病例多 ,发病早期表现不典型 ,误诊率高 ,病程各期明显延长 ,肾功能损害严重且持续时间长 ,多器官功能障碍综合征 (MODS) 18 8% 8 3%、继发性肺部感染 39 6 8% 10 2 %、肺水肿 2 8 5 7% 7 3%、消化道出血 38 6 % 2 0 6 %、营养失衡12 7% 3 8%等 ,EHF的并发症老年组高于非老年组 (P <0 0 5 )。结论 :老年EHF病情重 ,早期表现常不典型 ,病程持续时间长 ,合并疾病和并发症多 ,病死率高     

固相致敏红细胞吸附技术快速检测肝硬化患者血清中TIMP-1

目的 建立一种新的固相致敏红细胞吸附技术(SPASE)用于快速检测肝硬化患者血清中TIMP-1。方法 用TIMP-1单克隆抗体包被微量血凝板,加热冲洗后加入待检血清标本,最后加入单克隆抗体致敏红细胞。应用致敏红细胞作为指示系统,观察红细胞吸附状况来判定结果。结果 SPASE法全过程仅需要2.5～3小时,408例肝病患者血清检测TIMP-1结果为急性肝炎组检出阳性率16.41％;慢性肝炎组阳性率为33.31％;肝硬化组阳性率为73.58％。结论 血清中TIMP-1的变化可作为肝纤维化较为有用的诊断指标。SPASE法具有较高的灵敏性、特异性和快速性,试剂用量少,且不需复杂的仪器设备,加之实验程序简单,更适于医院及基层医疗单位应用。     

自制电激器治疗儿童弱视100例疗效分析

应用自制电激器治疗儿童屈光不正性、屈光参差性弱视100例,菘计164只限,治愈68只占40.24％,显效48只占29.21％,好转43只占26.22％,总有效157只眼为95.73％。各个年龄组疗效均为90％以上。治疗次数与疗效,屈光度与疗效,弱视深度与疗效均有明显差异(P<0.001)。其中30例合并斜视经治疗后度数>5°者明显得到纠正,度数<5°者基本消失。     

金属蛋白酶组织抑制因子-2在大鼠肝组织中的定位及表达

用人血白蛋白攻击的方法制备实验性免疫性肝纤维化大鼠模型，以正常大鼠为对照。采用免疫化法及原位杂交技术分别检测肝脏中金属酶组织抑制因子－2在正常及实验性免疫性肝纤维化大鼠肝组织中的定位及表达状态。结果为实验组肝脏中TIMP－2mRNA和相关抗原表达在肌纤维细胞、成纤维细胞，以汇管区及纤维间隔中最明显，阳性信号位于细胞胞浆中，未见细胞核表达。提示在肝纤维化中，成纤维细胞及肌成纤维细胞是TIMP－2表达的主要细胞，并随着病损肝脏中肝纤维化程度的加重，TIMP－2基因和蛋白表达水平随之增高。     

单克隆抗体双抗体夹心ELISA快速检测肝炎患者血清中TIMP-2

目的建立一种检测人血清中基质金属蛋白酶组织抑制剂-2（TIMP-2）的双抗体夹心ELISA法，探讨血清TIMP-2的水平与肝纤维化病程进展程度的关系。方法确定包被TIMP-2单克隆抗体（McAb）和辣根过氧化物酶（HRP）标记的抗TIMP-2McAb的最佳工作浓度，建立双抗体央心ELISA方法，并用于临床初步检测408例肝炎血清TIMP-2水平。结果包被TIMP-2McAb的最佳工作浓度为2μg／ml，HRP标抗体的最佳工作浓度1：400。该法具有良好的重复性，灵敏度达5ng／ml，中和抑制率在80％以上，稳定性能好，与国外TIMP-2 ELISA试利盒进行对比试验，表明两种检测方法有良好的相关性（Y=1．2752X-4．7465，r=0．976）。临床检测表明TIMP-2随着病损纤维化程度加重而升高，与正常人血清TIMP-2水平相比差异显著（P〈0．01～0．001）。结论该法能够快速检测人血清中TIMP-2浓度，血清TIMP-2可作为定量诊断肝纤维化指标之一。本试验为国内TIMP-2诊断试剂盒的研制和开发提供了科学实验依据     

拉米夫定联合双甲五灵胶囊的抗肝纤维化作用

目的研究拉米夫定与双甲五灵胶囊联合治疗对慢性乙型肝炎患者血清肝纤维化指标及肝脏病理组织学的影响。方法随机选择50例慢性乙型肝炎患者作为治疗组,给予口服中药双甲五灵胶囊,3次/d,6粒/次,并同时口服拉米夫定01g/d,疗程1年;同时设对照组,给予保肝对症治疗。动态观察服药0、6、12个月患者血清中肝纤维化指标透明质酸(HA)、层粘蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)和Ⅳ型胶原(ⅣC)的变化;对其中8例患者治疗前后肝穿刺活检,用Masson三色组织化学染色后观察肝组织纤维化程度的改变。结果与对照组相比,治疗组患者4项血清肝纤维化指标明显下降(P<001)。肝细胞坏死、汇管区炎细胞浸润及纤维化明显减轻。结论拉米夫定联合双甲五灵胶囊治疗慢性乙型肝炎,可使患者血清HA、LN、PCⅢ、ⅣC含量显著下降,并减轻肝组织的炎症坏死和纤维化程度。     

皮下环封闭治疗流行性腮腺炎并发睾丸炎7例

流行性腮腺炎并发睾九炎临床常见,目前多采用乙烯雌酚加强的松治疗,该法不仅疗程较长,而且病人十分痛苦。本文介始一种简便、易行的奴夫卡因腹股沟皮下环1次性封闭疗法。通过对7例病人的临床观察,该疗法在消肿及消痛时间上均明显低于传统的治疗方法。本文在阐明治疗方法及治疗经验的同时,也对其原理进行了探讨。     

中药双甲五灵冲剂对免疫性肝纤维化大鼠抗肝纤维化的分子机制研究

目的探讨中药双甲五灵冲剂对免疫诱导型肝纤维化大鼠的治疗作用及机制。方法90只雌性Wistar大鼠。10只大鼠为正常对照组,80只大鼠予尾静脉注射人血白蛋白,建立免疫损伤性肝纤维化大鼠模型,分为5组：预防组、治疗1组、治疗2组、秋水仙碱组、观察组。用光镜观察肝脏HE染色、VanGieson（VG）胶原染色,采用原位杂交及免疫组织化学染色技术检测大鼠肝脏组织中TIMP-1、TIMP-2、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原mRNA及蛋白的表达强度;用电镜观察肝脏超微结构的变化。结果免疫诱导型肝纤维化大鼠在造模结束后肝组织学改变呈进行性加重,以造模结束后3个月为著;TIMP-1、TIMP-2、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原mRNA及蛋白呈强阳性表达,电镜见观察组有较多激活的HSC及大量胶原纤维沉积在肝窦间隙及肝细胞间,经双甲五灵冲剂治疗后的大鼠与观察组大鼠相比,肝组织结构明显好转,纤维组织减少,未见到激活的HSC、TIMP-1和TIMP-2mRNA及蛋白表达与观察组相比均明显降低,Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白及基因表达明显降低（P〈0．05）,并且其效果为预防组效果最好,治疗1组较治疗2组效果好,三组均明显优于秋水仙碱组。结论双甲五灵冲剂可以逆转肝纤维化,抗肝纤维化机制可能是：①抑制肝星状细胞活化,减少ECM的生成及TIMP分泌;②直接抑制TIMP—1、TIMP-2mRNA及蛋白的表达;二者共同作用使得TIMP分泌减少,从而降低对MMPs的抑制,有利于MMPs对ECM的降解;③具有加速Ⅰ、Ⅲ型胶原的降解,抑制其生成及沉积的作用。