犬蛔虫成虫抗原的促B细胞有丝分裂的活性

在体内用正常小鼠脾及人体外周血淋巴细胞就犬弓蛔虫抗原（ＴｃＡｇ）对淋巴细胞的作用进行了研究。成虫的ＴｃＡｇ在浓度为１～１２５μｇ／ｍｌ时能刺激小鼠脾细胞增殖。ＴｃＡｇ的应答细胞为Ｂ细胞，因为经抗免疫球蛋白抗体和补体处理或尼龙棉柱分离后，应答消失。此应答不是由脂多糖（ＬＰＳ）的污染引起的，因为ＴｃＡｇ能刺激作为ＬＰＳ的低应答者的Ｃ３Ｈ／ＨｅＪ脾细胞。ＴｃＡｇ不但刺激增殖反应，而且刺激多克隆ＩｇＧ和ＩｇＥ产生。ＴｃＡｇ还刺激巨噬细胞产生白细胞介素－１并刺激人的Ｂ细胞。上述结果还表明ＴｃＡｇ是一个有效的促Ｂ细胞有丝分裂原，其活性与感染犬弓蛔虫宿主的免疫功能的改变有关。     

旋毛虫成虫部分cDNA表达质粒文库的构建

目的为寻找更多有效的旋毛虫病疫苗候选抗原分子,构建旋毛虫成虫部分cDNA质粒文库。方法以旋毛虫成虫cDNA文库为模板,进行PCR扩增。扩增产物500~2 000 bp之间的DNA片段用BamHⅠ、HindⅢ酶切,将酶切产物克隆入真核表达载体pcDNA3.1,对部分转化子进行酶切鉴定。结果构建了插入片段在500~1 500 bp之间的旋毛虫成虫部分cDNA质粒文库,90%以上的转化子都含有插入的DNA片段。结论成功构建一个旋毛虫成虫部分cDNA质粒文库。     

人体寄生虫学教学改革初探

为提高教学质量，对人体寄生虫学的教学改革进行了探讨。在有限的课时内达到学科知识的优化组合，总结教学经验，把课本知识与实际联系起来，为学生尽可能多地掌握寄生虫学知识打好基础。     

斑点-ELISA与平板-ELISA诊断脑囊虫病的敏感性比较观察

应用斑点-ELISA和平板-ELISA对52例脑囊虫病患者的血清进行抗体检测。结果显示,两种免疫方法诊断脑囊虫病的敏感性近似(阳性率分别为92.3%与90.4%);与40例正常人血清均无假阳性反应。但斑点-ELISA具有节省抗原,操作简便,不需特殊仪器设备等优点,适用于临床诊断及流行病学调查。     

抗斯氏按蚊中肠蛋白组分的抗体对约氏疟原虫卵囊的作用

目的 观察抗斯氏按蚊中肠蛋白组分的抗体对约氏疟原虫卵囊的抑制作用。 方法 解剖实验室饲养斯氏按蚊雌蚊，取中肠（胃）制备中肠蛋白抗原并免疫BALB/c小鼠（8只， 100 μg/只)， 共免疫4次， 每次间隔7～10 d，末次免疫后10 d，腋窝动脉取血，分离血清。用蛋白质印迹（Western blotting）分析中肠蛋白的免疫活性抗原。用葡聚糖凝胶过滤法获得相对分子质量（Mr）为38 000~50 000的蛋白。用该中肠蛋白免疫小鼠（12只， 100 μg/只)， 共免疫4次，每次间隔7~10 d。同时设PBS对照组。末次免疫后7 d，ELISA检测小鼠血清中的抗体，抗体效价≥1 : 2 560时，该免疫组小鼠和对照组小鼠经腹腔接种感染约氏疟原虫（约含2×10⁷个感染疟原虫的红细胞），感染后3 d取小鼠尾血镜检，雌配子体数＞2/10个视野的小鼠作为供血鼠，斯氏按蚊成蚊吸血后9 d解剖，计数中肠的卵囊数量。 结果 Western blotting显示斯氏按蚊中肠蛋白抗原的显色区带有8条，其中Mr 38 000~50 000的区带显色较清晰；实验组和对照组中肠卵囊感染率分别为28.70%（62/216）和51.09%（47/92）（P＜0.05），中肠卵囊指数分别为14.14（1 541/109）和26.02（1 223/47），两者差异有统计学意义（P＜0.01）。 结论 斯氏按蚊Mr 38 000~50 000中肠蛋白有免疫活性；针对该中肠蛋白的抗体对约氏疟原虫卵囊的发育有明显的抑制作用。     

套式PCR扩增特定SSrRNA基因片段诊断间日疟及混合感染的研究

根据间日疟原虫（Ｐ．ｖ．）小亚单位核糖体核糖核酸（ＳＳｒＲＮＡ）基因序列，设计并合成两对特异引物，采用套式聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，扩增出一条长１２０个碱基对（ｂｐ）的间日疟原虫ＳＳｒＲＮＡ基因特定片段，并用于云南间日疟患者的血样检测。结果表明：该系统特异性强，除间日疟原虫外，恶性疟原虫（Ｐ．ｆ．）、三日疟原虫（Ｐ．ｍ．）及正常人血ＤＮＡ样本均无此扩增带出现。该系统检测原虫的敏感度为０．１个疟原虫／ｌμｌ血，大大高于常规镜检。在进行间日疟检测中，该系统与镜检的阳性符合率为１００％，更重要的是发现镜检漏诊的４例Ｐ．ｖ．和Ｐ．ｆ．的混合感染病例。鉴于该系统具有特异、敏感、稳定、简便的特点和鉴别疟原虫种类、判定混合感染等优点，故对疟疾的诊断、大规模流行病学研究及疫情监控具有应用价值     

套式PCR检测蚊体内疟原虫的敏感性与特异性

目的：分析套式聚合酶链反应技术检测蚊体内疟原虫的敏感性与特异性。方法：采用２对针对间日疟原虫小亚单位核糖体核糖核酸基因（ＳＳＵｒＤＮＡ）的特异引物，利用套式ＰＣＲ技术，从蚊体ＤＮＡ样本中，扩增间日疟原虫ＳＳＵｒＤＮＡ片段，进行间日疟原虫的检测。结果：扩增产物经琼脂糖凝胶电泳分析，可见扩增出特异的约１２１ｂｐ大小的ＤＮＡ片段，估测每份蚊虫ＤＮＡ样本中含有３个以上子孢子或１００只蚊中含有１只阳性蚊即可得此片段，而对恶性疟原虫、食蟹猴疟原虫、约氏疟原虫及正常蚊虫ＤＮＡ不能扩增出此片段。结论：此法具有高度的敏感性和特异性。     

重症急性胰腺炎大鼠瘦素、功能性瘦素受体表达的动态变化

重症急性胰腺炎（SAP）病情危重，发展快、病死率高。SAP发病机制不甚清楚，近年研究认为，细胞因子网络和免疫功能紊乱在SAP中发挥重要作用，过度活化的炎性细胞及炎症因子对SAP的预后有重要影响。瘦素作为一种重要的调节炎症和免疫反应的细胞因子，在急性胰腺炎（AP）时水平明显升高，炎症诱导瘦素产生，瘦素可能发挥炎性细胞因子的作用。本研究探讨瘦素及其受体（OB-R）在SAP中的动态变化。     

旋毛虫抗原基因Ts87在真核细胞中的表达

目的　在体外真核细胞 COS7中表达重组质粒 pc DNA3.1/ Ts87,为旋毛虫病 DNA疫苗的研究奠定基础。　方法　将重组质粒 pc DNA3.1/ Ts87经脂质体 L ipofectamine介导 ,体外转染真核细胞 COS7,通过细胞免疫组化 ,细胞裂解物的 SDS- PAGE电泳和 Western- blot分析检测表达产物。　结果　重组质粒能够在 COS7中表达出约 38ku的目的蛋白 ,并能够被旋毛虫阳性血清特异识别。　结论　构建的重组质粒可在体外真核细胞 COS7中成功表达。     

噬菌体展示技术的应用及研究进展

噬菌体展示技术是将外源蛋白或多肽与噬菌体外壳蛋白融合并呈现于噬菌体表面,利用外源蛋白或多肽与筛选靶标的特异性亲和作用,通过吸附、洗脱、扩增的重复过程,将含有特异性外源蛋白的噬菌体从表达有各种外源蛋白的噬菌体库中筛选出来,并得到大量富集,而后进行基因序列测定。1985年,Smith[1]通过基因工程手段将外源蛋白质与噬菌体的次要外壳蛋白pⅢ形成融合蛋白展示于噬菌体颗粒表面,可保持相对独立的空间构象和生物活性,而不影响重组噬菌体对宿主菌的感染能力。与其他表达系统相比噬菌体展示技术具有显著的优点:可将基因型和表型、分子结…