脊髓胶质细胞在大鼠炎性痛形成中的作用

目的 评价脊髓胶质细胞在大鼠炎性痛形成中的作用.方法 清洁Ⅱ级成年雄性SD大鼠,体重180～220 g,取蛛网膜下腔置管成功的大鼠65只,随机分为5组(n=13),生理盐水组(NS组):右后肢踝关节外侧皮下注射NS 50μl;炎性痛组(IP组):采用右后肢踝关节外侧皮下注射完全弗氏佐剂50μl的方法制备炎性痛模型;氟代柠檬酸组(FC组):经蛛网膜下腔导管注射FC 1 nmol/10 μl,15 min后右后肢踝关节外侧皮下注射NS 50 μl;NS+IP组:经蛛网膜下腔导管注射NS 10 μl,15 min后制备炎性痛模型;FC+IP组:经蛛网膜下腔导管注射FC 1 nmol/10 μ,15 min后制备炎性痛模型.于模型制备前2 d(T_0)、皮下注射药物前(T_1)和注射药物后2、4、6、8、10、12、24、26 h(T_(2～9))时测定机械缩足阈值(MWT)和热缩足潜伏期(TWL).皮下注射药物后8 h时采用免疫组化法测定脊髓背角星形胶质细胞标记物(GFAP)和小胶质细胞标记物(OX-42)的表达水平.结果 与NS组比较,IP组和NS+IP组T_(3～9)时MWT和TWL降低,FC+IP组T_(3～9)时MWT降低,T_(8,9)时TWL降低,IP组、NS+EP组和FC+EP组脊髓GFAP和OX-42的表达水平均上调(P<0.05);与IP组比较,FC组T_(3～9)时MWT和TWL升高,FC+IP组T_(3～7)时MWT和TWL升高,2组脊髓GFAP和OX-42的表达水平均下调(P<0.05或0.01).结论 脊髓胶质细胞的活化参与了大鼠炎性痛的形成.     

脑源性神经生长因子促进骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞的实验研究

目的 探索脑源性神经生长因子（BDNF）在诱导骨髓间充质干细胞（BMSCs）分化为神经元样细胞过程中的作用。方法 应用Ficoll分离骨髓中单核细胞,贴壁培养细胞,观测形态并用流式细胞仪检测其细胞表面标志;用含β-巯基乙醇（BME）、BDNF及碱性成纤维细胞因子（bFGF）的条件培养基使培养的细胞向神经细胞诱导分化;采用免疫荧光染色法对分化的细胞进行鉴定。结果 分离培养的贴壁细胞具有典型的BMSCs的形态和细胞表面标志,诱导后细胞表达神经元和星型胶质细胞标志神经元特异性烯醇化酶（NSE）、和胶质纤维酸性蛋白（GFAP）。结论 BMSCs在体外具有分化为神经元样细胞的能力,BDNF具有促进分化的作用。     

29例冬泳爱好者血浆TXB_2、6－K－PGF_（1α）含量观察

为了探索冬泳对人体血管内血小板聚集及抗聚集系统的影响，我们对苏州市冬泳队中老年冬泳人员进行了血栓素Ｂ_２及６－酮－前列腺素Ｆ_（１α）血浆含量的放射免疫法测定。结果血栓素Ｂ_２为１０７．６±６３．３ｐｇ／ｍｌ，与正常健康人群对照，两者有显著性差异（ｐ＜０．０５）。６－酮－前列腺素Ｆ_（１α）为６３．４±２１．９ｐｇ／ｍｌ，与正常健康人群对照，两者差异不显著（ｐ＞０．０５）。提示冬泳运动有抗血管内血小板非正常聚集而释放血小板素的作用。同时亦提示冬泳人员的血管内皮细胞合成前列环素水平与对照组的低年龄组相近，两者皆对预防老年人罹患的动脉粥样硬化所致的心、脑、肾及其他脏器的血管内血栓形成有一定意义。     

抗癌药物敏感性的动物试验和临床研究

~3H—TdR注入荷瘤裸小鼠腹腔后,0.5h就被增殖旺盛的组织摄取,游离部分大多数在18h内从尿中排出。在抗癌药物作用下,移植瘤、小肠和股骨对~3H—TdR 的摄取量,因其对抗癌药敏感性不同而异。以掺入量为指标,可用于动物模型和临床肿瘤患者个体药敏试验,并可观察其毒性副作用。     

筛选有效抑制血管内皮细胞小窝蛋白-1表达的小干扰RNA及其毒性检测

目的 筛选有效抑制血管内皮细胞小窝蛋白-1(Caveolin-1)表达的小干扰RNA(small interferenceRNA,siRNA)序列,并检测转染复合物的细胞毒性. 方法 设计合成针对Caveolin-1的siRNA 3条(siRNA422,siRNA548,siRNA710)及1条带绿色荧光标记的通用阴性对照FAM-siRNA.在siRNAFect介导下转染血管内皮细胞.用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)测定转染后血管内皮细胞中Caveolin-1 mRNA的表达,Western blot方法测定干扰后Caveolin-1蛋白表达,比较抑制率,筛选出有效抑制Caveolin-1表达的siRNA.采用磺基罗丹明B法(sulforhodamineB,SRB)分析转染复合物的细胞毒性. 结果 ①在siRNAFect相同剂量下,siRNA 20、30 nmol/L组或40 nmol/L组转染效率均达到85％以上(P＜0.01);②siRNAFect 1.3μl复合10 nmol/L或20 nmol/L siRNA组细胞存活率均达到80％以上(P＜0.05);③siRNA548对EA.hy926细胞Caveolin-1基因mRNA抑制效果最明显(P＜0.01);④与阴性对照组及siRNA422、siRNA710相比较,siRNA548干扰血管内皮细胞48 h后,Caveolin-1蛋白的表达量最低(P＜0.01). 结论 ①siRNA548对血管内皮细胞Caveolin-1表达的抑制效果最大.②siRNA浓度20 nmol/L复合siRNAFect 1.3μl转染效率高,细胞毒性低,适合转染.     

NC系裸小鼠的饲育与应用

NC系裸小鼠是原产于日本的一种黑皮小鼠,据Rygaard的研究室使用于人癌移植实验后认为,NC裸小鼠较易管理,实验结果稳定,因而已被许多单位引种和繁育。我们于1981年从日本引进NC系(?)Nu/Nu和(?)Nn/+各5只,在NASA 1000级的净化室内保种和繁殖。迄今已生产近2000只Nu/Nu,供本室实验研究和7个科研单位引种或使用。本文报告饲育方法和使用情况。饲育方法一、饲育室:采用苏州净化设备厂生产的系列产品CLJD装配式洁净室(5 m~2),为顶吹侧逸垂直乱流型。换气次数≥100次/时,洁净效率≥0.5μ尘粒(1000级),自净时间≤10分钟,静压差为0.5 mmHg。     

血浆纤维蛋白原快速盐析比浊法

纤维蛋白原测定常用凝固定氮法、盐析双缩脲显色法等,步骤较繁琐。我们用半饱和氯化钠进行盐析比浊测定,经若干试验,效果良好。实验步骤简化为一步法,15分钟左右即能完成实验,是目前一种较快的方法。     

鞘内注射TDAG8的siRNA对大鼠骨癌痛的缓解作用

目的观察鞘内注射T细胞死亡相关基因8(T celldeath-associated gene 8,TDAG8)的小干扰RNA(small inter-fering RNA,siRNA)对骨癌痛大鼠机械性痛觉过敏以及脊髓TDAG8表达的影响。方法通过将Walker256肿瘤细胞接种在大鼠左侧胫骨骨髓腔内建立骨癌痛模型。观察接种肿瘤前后大鼠机械缩爪反射阈值(paw withdrawl threshould,PWT)和脊髓TDAG8表达水平的变化;并进一步观察痛觉过敏形成后鞘内注射TDAG8的siRNA对大鼠PWT和脊髓TDAG8表达的影响。结果大鼠接种肿瘤后6～18 d,PWT明显下降(P<0.01),脊髓TDAG8的表达明显升高(P<0.01);与对照组相比,鞘内注射siRNA的骨癌痛大鼠,其PWT明显增高(P<0.05),脊髓TDAG8表达水平明显降低(P<0.01)。结论脊髓部位的TDAG8可能参与了大鼠骨癌痛的形成和发展,鞘内注射其siRNA可以通过干扰脊髓TDAG8的表达而具有疼痛缓解作用。     

单克隆抗体-阿霉素免疫交联物在脑胶质瘤裸鼠模型体内导向治疗的初步研究

将本室制备的免疫导向药物-抗人脑胶质瘤单克隆抗体SZ-39和阿霉素交联物在脑胶质瘤裸小鼠模型NHG-1体内进行导向治疗研究。实验显示免疫交联物对胶质瘤的抑制作用显著优于游离药物、游离抗体及药物和抗体的混合物。免疫交联物治疗后肿瘤组织~3H-TdR掺入量显著低于各对照组,表明肿瘤细胞DNA合成被明显抑制。而免疫交联物对正常小肠上皮细胞DNA合成影响较小,提示其副作用较小。