用人脑胶质瘤体外细胞系筛选植物抗癌药

以人脑胶质瘤体外细胞系SHG—44为靶细胞,氟脲嘧啶脱氧核苷为阳性对照药,庆大霉素和PBS 为阴性对照,对26种植物药成份进行药物敏感性测定。按Bliss 正规机率单位法计算它们对SHG—44细胞的半数抑制浓度。结果表明,有两种植物药对SHG—44有较强的细胞毒作用,推荐作进一步研究。     

大鼠鞘内注射MCP-1中和抗体缓解骨癌痛

目的观察脊髓趋化因子单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1,或CCL2)在骨癌痛大鼠中的可能作用。方法大鼠胫骨骨髓腔接种Walker256肿瘤细胞建立骨癌痛模型。观测造模前、后大鼠机械性痛觉超敏Von Frey阈值并观察造模后d 10～12,鞘内给予MCP-1中和抗体对大鼠Von Frey阈值和脊髓小胶质细胞激活标志物(ox-42)表达的影响。结果大鼠种瘤后6～12 d,机械性痛觉超敏Von Frey阈值进行性下降(P<0.01);与对照组相比,鞘内给予MCP-1中和抗体后,脊髓ox-42的表达水平明显降低(P<0.01),Von Frey阈值的明显升高(P<0.01)。结论大鼠鞘内注射MCP-1中和抗体缓解骨癌痛,其机制可能与抑制小胶质细胞的激活相关。     

匹多莫德对重症胸部创伤大鼠Th1/Th2细胞平衡的影响

目的 观察重症胸部创伤大鼠Th1/Th2细胞平衡的变化,评价匹多莫德对重症胸部创伤大鼠Th1/h2细胞平衡的影响.方法 20只雄性SD大鼠随机平均分配到单纯创伤组(A组)和创伤+匹多莫德组(B组).大鼠均经胸部撞击致伤建立重症胸部创伤模型,B组大鼠每日予匹多莫德100 mg/kg腹腔注射,A组大鼠予等体积生理盐水腹腔沣射.分别于受伤前及受伤后第1、3、5、7天采取全血各1.0 ml,分离外周血单个核细胞(PBMC),体外培养72h,收集上清液冻存,ELISA法集中检测IFN-γ、IL-4浓度.结果 两组大鼠PBMC培养上清液中IFN-γ浓度在受伤后均迅速升高,随即回落,B组明显高于A组,差异有统计学意义(P<0.05);IL-4浓度在受伤后均持续升高,两组间差异无统计学意义(P>0.05);IFN-γ浓度上升倍数/IH-4浓度上升倍数比值在受伤后均升高,随后逐步降低至1.0以下,B组高于A组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 大鼠在重症创伤后早期,Th1细胞功能迅速增强,随后逐步受到抑制,Th2细胞功能则持续增强,发生Th1细胞向Th2细胞的漂移.匹多莫德提高了重症刨伤大鼠IFN-γ的合成分泌,减轻了Th1细胞功能抑制的程度,有助于维持Th1/Th2细胞平衡.     

磷酸化钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ在胫骨癌痛大鼠脊髓背角中的表达变化

目的观察胫骨癌痛模型大鼠脊髓背角磷酸化钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ（pCaMKⅡ）的表达变化,探讨CaMKⅡ在骨癌痛中的作用。方法选择雌性SD大鼠54只,随机分为3组（n=18）：空白组（N）,不作任何处理;对照组（C）,左侧胫骨上段骨髓腔注入5μlHank’s液;模型组（M）,左侧胫骨上段骨髓腔注入5μlWalker256细胞（2×107/ml）。分别于建模前及建模后6d、12d、18d测定大鼠机械缩足反射阈值和双后肢负重差值（n=6）,并在相应时间点随机取6只大鼠脊髓L4～5段,采用免疫组织化学法检测pCaMKⅡ的表达。结果与N组、C组比较,建模后6～18dM组大鼠出现进行性加重的疼痛行为学改变,脊髓背角pCaMKⅡ表达逐渐升高（P〈0.05）。结论脊髓pCaMKⅡ表达上调可能参与了大鼠骨癌痛的产生和维持。     

SAH大鼠抗脑血管细胞增殖研究

目的 探讨大鼠SAH后脑血管细胞增殖变化,观察大鼠SAH后早期阻断VEGF的作用是否能减轻脑血管细胞增殖. 方法 72只Sprague-Dawley大鼠随机分为3组,假手术组枕大池注入NS,模型组采用枕大池二次注血法制作SAH模型,干预组在制作SAH模型的同时通过枕大池注入抗VEGF多克隆抗体.于SAH（或NS）后1、3、5、7天时处死动物,分离脑干（包含基底动脉）做形态学和PCNA免疫组化检查,观测三组大鼠基底动脉的形态学改变、基底动脉壁PCNA表达. 结果 在SAH后第1天基底动脉即出现明显血管痉挛,第3、5天达到高峰,第7天逐渐缓解.SAH模型组大鼠基底动脉壁PCNA表达第1天即开始升高,第3、5天达到顶峰,第7天后逐渐下降;NS假手术组基底动脉壁PCNA呈阴性表达;抗VEGF抗体干预组基底动脉壁PCNA呈低水平表达.枕大池注射抗VEGF抗体能缓解SAH后脑血管肌内膜增殖,减轻脑血管壁的增厚程度. 结论 VEGF介导的血管内膜增殖反应和脑血管壁增厚可能在脑血管痉挛的发生发展过程中起促进作用,SAH后早期应用VEGF拮抗剂能缓解脑血管细胞增殖.     

脑胶质瘤中LRP、GST-π和MGMT的表达及临床意义

目的 探讨人脑胶质瘤中耐药相关基因蛋白LRP、GST-π和MGMT的表达,为临床制定个体化化疗方案提供依据.方法 采用免疫组织化学二步法检测53例人脑胶质瘤标本及6例正常脑组织中LRP、GST-π和MGMT的蛋白表达.结果 正常组织中三个基因的蛋白表达均为阴性.在人脑胶质瘤标本中,LRP、GST-π和MGMT的蛋白表达阳性率分别是43.4%、43.4%和50.9%;LRP和GST-π的蛋白表达与肿瘤的病理分级呈正相关.结论 LRP、GST-π和MGMT在人脑胶质瘤中均有较高表达,检测多种耐药相关基冈的蛋白表达,对合理选择胶质瘤化疗药物及预后判断有一定意义.     

转染XRCC3基因的人脑胶质瘤细胞增加烷化剂类抗癌药耐药性

背景和目的：我们既往的研究表明，在人上皮肿瘤细胞中，XRCC3基因的表达水平同肿瘤细胞对美法仑和顺铂的耐药密切相关，提示XRCC3基因在其中起关键作用。为进一步研究XRCC3基因在脑胶质瘤细胞耐药中的作用．我们选用低水平表达XRCC3基因的人脑胶质瘤细胞SKI-1，将其过度表达XRCC3，研究其耐药性的变化。方法：采用脂质体方法将已插入XRCC3基因的pcDNA3．0表达载体转染人脑胶质瘤细胞SKI-1，G418筛选，得到稳定高表达XRCC3的细胞克隆，转染pcDNA3．1空载体作为对照，用Western blot方法证实。采用改良的sulforhodamine B(SRB) Colorimetric抗癌药筛选法，对稳定表达XRCC3基因和空载体的SKI-1细胞进行细胞毒试验。结果：XRCC3细胞能稳定地高表达XRCC3蛋白，较MOCK细胞高4倍。XRCC3细胞对顺铂和美法仑的耐药性明显较MOCK细胞增强，分别增加了1．8和2．3倍；对BCNU的耐药性无明显增加。结论：XRCC3基因在人脑胶质瘤细胞对DNA交链剂耐药中起重要作用。     

血浆纤维蛋白原快速盐析比浊法

纤维蛋白原测定常用凝固定氮法、盐析双缩脲显色法等,步骤较繁琐。我们用半饱和氯化钠进行盐析比浊测定,经若干试验,效果良好。实验步骤简化为一步法,15分钟左右即能完成实验,是目前一种较快的方法。     

29例冬泳爱好者血浆TXB_2、6－K－PGF_（1α）含量观察

为了探索冬泳对人体血管内血小板聚集及抗聚集系统的影响，我们对苏州市冬泳队中老年冬泳人员进行了血栓素Ｂ_２及６－酮－前列腺素Ｆ_（１α）血浆含量的放射免疫法测定。结果血栓素Ｂ_２为１０７．６±６３．３ｐｇ／ｍｌ，与正常健康人群对照，两者有显著性差异（ｐ＜０．０５）。６－酮－前列腺素Ｆ_（１α）为６３．４±２１．９ｐｇ／ｍｌ，与正常健康人群对照，两者差异不显著（ｐ＞０．０５）。提示冬泳运动有抗血管内血小板非正常聚集而释放血小板素的作用。同时亦提示冬泳人员的血管内皮细胞合成前列环素水平与对照组的低年龄组相近，两者皆对预防老年人罹患的动脉粥样硬化所致的心、脑、肾及其他脏器的血管内血栓形成有一定意义。