家蝇抗菌物质诱导及高温处理后的抑菌活性

目的探讨家蝇幼虫经针刺诱导产生的抗菌物质经不同温度处理不同时间后的抑菌活性。方法室内饲养的家蝇3龄幼虫,经针刺诱导48h后提取血淋巴,100℃处理10s和30s及1、3、5min,80℃和60℃处理30s、1、3、5、10min后,采用磷酸盐缓冲液制备离心上清样品,分别观察记录其对溶壁微球菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果。结果经100、80℃处理后,对溶壁微球菌的抑菌环随处理时间的延长而环直径减小,60℃处理不同时间对溶壁微球菌的抑菌环大小无明显影响。100℃处理1min后以及80℃处理3min后对金黄色葡萄球菌无明显的抑菌环产生,60℃处理不同时间对金黄色葡萄球菌的抑菌环直径无明显影响。结论家蝇幼虫经针刺诱导产生的抗菌物质,其抑菌活性对高温有一定的稳定性,80～100℃加热处理,抑菌活性随处理时间延长而减弱,60℃高温处理10s至10min对其抑菌活性无明显影响。     

低温对家蝇卵及蛹的影响

目的探讨低温对家蝇卵孵化率以及蛹羽化率的影响。方法室内连续饲养的家蝇第4代卵,置于2℃分别处理1、2、3、4和5d后,取出置于室内(26℃)孵化,记录处理不同时间后的孵化率。第4代1日龄蛹和3日龄蛹,分别置于2℃和6℃处理1、2、3、4和5d后,取出置于室内羽化,记录不同日龄以及不同时间的低温处理后的羽化率。结果家蝇卵经不同时间2℃低温处理后的孵化率依次为(91.52±7.70)%、(85.93±18.99)%、(48.52±19.48)%、0、0;家蝇1日龄蛹经不同时间2℃低温处理后的羽化率依次为(75.00±13.54)%、(51.25±13.15)%、(30.00±15.81)%、(6.25±6.29)%、(6.25±4.79)%;1日龄蛹经不同时间6℃低温处理后的羽化率依次为(88.75±4.79)%、(66.25±10.31)%、(40.00±12.91)%、(37.50±18.48)%、(12.50±6.45)%;3日龄蛹经不同时间2℃低温处理后的羽化率依次为(90.0±7.07)%、(78.75±11.09)%、(57.50±9.57)%、(61.25±11.09)%、(32.50±22.55)%;3日龄蛹经不同时间6℃低温处理后的羽化率依次为(92.50±5.00)%、(90.00±10.80)%、(88.75±2.50)%、(90.00±5.77)%、(66.25±10.31)%。结论家蝇卵经2℃低温处理4d后即不能孵化幼虫,卵对低温的耐受力比蛹弱。温度越低,蛹羽化率越低,低温处理时间越长,蛹羽化率越低;蛹日龄越大,耐受低     

丝光绿蝇抗菌肽的热稳定性研究

目的探讨高温处理对丝光绿蝇抗菌肽抗菌活性的影响。方法丝光绿蝇Ⅲ龄幼虫针刺体壁诱导后，48h后提取其血淋巴，分别于100、80和60℃水浴0、0．5、1、3、5min等不同时间后，观察不同温度处理不同时间后对溶壁微球菌的抑菌效果。结果丝光绿蝇幼虫经针刺诱导的抗菌肽100℃水浴1min仍有抗菌活性，100℃处理3min后活性丧失；80及60℃水浴5min后仍有抗菌活性。结论针刺诱导的丝光绿蝇抗菌肽的抑菌活性具有一定的热稳定性。     

旋毛虫感染小白鼠实验研究

目的:建立小白鼠的旋毛虫病模型,观察研究小白鼠经口感染旋毛虫的合适感染量。方法:将小白鼠分成7组,每只分别感染100,150,200,250,300,350,400个旋毛虫囊包,饲养8周,剖杀,取膈肌特定部位的肌肉,用电子天平称重,然后显微镜下记录囊包数。结果:感染100-400个旋毛虫囊包各组检出旋毛虫囊包数(个/克)依次为:6582±4010,9258±4038,9760±3123,9095±5050,13038±9946,9185±3983,8246±3796,其中,感染300,350,400三组各死亡小鼠一只。结论:小鼠经口感染旋毛虫的合适的感染量为每只小鼠感染150-250个囊包,感染量更高易引起小鼠死亡。     

阴道毛滴虫新乡株的体外培养

目的观察阴道毛滴虫新乡株在不同的pH值培养基中和不同转种量的培养效果。方法阴道毛滴虫在pH5．8、6．2、6．6、7．0四组不同培养基中37℃恒温培养,每隔24h观察虫数、活率并计算活虫数。培养基pH6．6时,设置不同的转种量,观察虫数、存活率并计算活虫数。结果pH7．0组培养第2．4天虫数、活虫数、存活率均明显低于其它三组,且在培养过程中无明显活虫数及存活率高峰,第1．4天,pH6．6组活虫数、存活率均高于其它三组。转种100万／管和转种10万／管培养24h和48h的阴道毛滴虫存活率和培养48h的阴道毛滴虫活虫数均较高,转种1万／管培养效果较差。结论pH7．0不适宜阴道毛滴虫体外培养,pH6．6时,培养各项指标均较好,可能更适合阴道毛滴虫体外培养。阴道毛滴虫的体外培养转种宜在培养后48h进行．每次接种量以10万／ml为宜。     

家蝇抗菌物质诱导表达后的电泳分析

目的探讨家蝇抗菌肽的诱导及电泳分离方法。方法家蝇三龄幼虫针刺体壁诱导后,第48h提取其血淋巴,置于100℃、80℃水浴10s、30s、1min、3min、5min等不同时间后,观察不同温度处理不同时间后的去杂蛋白效果和对溶壁微球菌的抑菌效果,并对各样品进行电泳分离。结果血淋巴100℃水浴10s、30s、1min仍有抑菌活性,处理3min和5min无抑菌活性;80℃水浴30s-5min均有抑菌活性,电泳显示100℃处理3min和5min的样品与其他相比缺少2条蛋白区带。结论针刺诱导的家蝇抗菌肽分离时血淋巴预处理采用80℃水浴1min去杂蛋白效果较好,诱导的血淋巴100℃处理3min和5min即丧失抗菌活性,电泳显示缺少2条区带,此2条差异区带可能为抗菌肽组份。     

家蝇抗菌物质超声波诱导效果的动态观察

目的观察超声波诱导家蝇抗菌物质的动态表达效果。方法家蝇3龄幼虫经100 W超声波处理5 min后,分别于第0、24、487、2 h观察、记录幼虫存活率;提取其血淋巴,以溶壁微球菌作指示菌,采用平板法作抑菌试验,37℃恒温24 h,观察抑菌圈,以抑菌圈直径表示抗菌活力的大小,借以指示家蝇抗菌物质诱导表达的动态规律。结果经超声波诱导后,第24、487、2 h幼虫存活率依次为(13.41±9.19)%(、10.90±8.06)%和(6.82±4.93)%,第0、24、48、72 h收集的血淋巴对溶壁微球菌的抑菌环直径依次为(13.00±1.00)、(21.83±0.58)(、22.33±0.76)和(22.75±0.35)mm。结论超声波处理可诱导家蝇产生抗菌物质,在诱导后第48 h收集血淋巴最为合适。     

丝光绿蝇抗菌物质在不同pH下抑菌活性的研究

目的探讨丝光绿蝇经针刺体壁诱导产生的抗菌物质在不同的pH条件下的抑菌活性.方法丝光绿蝇三龄幼虫经针刺体壁诱导后48 h,提取其血淋巴,观察其在小同的pH琼脂平板上对溶壁微球菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果;经不同pH缓冲液处理后,观察其对溶壁微球菌的抑菌效果.结果丝光绿蝇幼虫经针刺诱导后48 h的血淋巴,在小同pH琼脂平板上对金黄色葡萄球菌的抑菌效果,pH6.0、6.5环较大、较清晰,随pH增加而环直径减小.对溶壁微球菌的抑菌效果,在pH6.0时,抑菌环直径最大,环径径随pH增加而减小.用不同pH的缓冲液稀释处理时,pH6.0缓冲液稀释后对溶壁微球菌的抑菌环最大,pH9.0缓冲液稀释后对溶壁微球菌的抑菌环最小.结论丝光绿蝇经针刺体壁诱导产生的抗菌物质在酸性条件下比在碱性条件下具有更强的抑菌活性.     

家蝇抗菌物质诱导及在不同pH下的抑菌活性

目的探讨家蝇幼虫经针刺诱导产生的抗菌物质在不同pH条件下的抑菌活性。方法室内饲养至3龄的家蝇幼虫经针刺诱导48 h后提取血淋巴,平板法作抑菌试验,观察不同pH条件下对溶壁微球菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果。结果针刺诱导产生的抗菌物质对溶壁微球菌的抑菌环直径pH6.5时最大,为（25.17±0.29）mm,随pH继续增高后抑菌环直径减小;对金黄色葡萄球菌的抑菌环直径在pH5.5和6.0时最大,均为（12.83±0.58）mm,pH继续增高后抑菌环直径减小。结论家蝇幼虫经针刺诱导产生的抗菌物质在弱酸性条件下活性较强,随pH增高活性减弱。