应用四聚体酶联免疫斑点法和细胞内细胞因子染色法检测HIV-1感染者体内特异性细胞毒性T淋巴细胞的研究

目的应用四聚体（tetramer）、酶联免疫斑点法（ELISPOT）和细胞内细胞因子染色（ICCS）方法研究HIV-1感染者细胞毒性T淋巴细胞（CTLs）的数量和功能。方法应用三种tetramer检测14例HLA-A2阳性的HIV-1感染者外周血中特异性CTLs的频率，同时采用SL9（SLYNTVATL）体外冲击HIV-1感染者的外周血单核细胞（PBMCs）。通过EL／SPOT和ICCS方法检测产生卜干扰素（IFN—γ）的CTLs，初步分析特异性CTLs在HIV-1感染中的作用。结果Tetramer SL9、IV9和Y19检测出的特异性CTLs占CDs^＋T细胞的百分比范围分别为0．06％～3．27％，0．05％～0．57％和0．09％～0．66％；其检出阳性率分别为11／14、10／14和5／7。ELISPOT和ICCS检测的产生IFN-γ的细胞近似，但远低于tetramer检测出的病毒特异性CTLs的数量。结论Tetramer可以敏感地检测出特异性CTLs。ELISPOT和ICCS则是研究CTLs功能的重要手段。联合使用三种方法可以更准确地评价HIV-1感染者体内CTLs的特征及其临床意义。     

应用流式细胞术和原位杂交技术检测HIV-1感染者T淋巴细胞内病毒的初步研究

目的 建立检测艾滋病病毒1型(HIV-1)感染者外周血单核细胞内HIV-1的方法，并初步探讨其临床应用价值。方法 应用流式细胞仪和荧光原位杂交半定量检测记忆性T细胞(CD4^ CD45RO^ )内的HIV-1，同时测定HIV-1感染者外周血CD4^ T淋巴细胞绝对数和血浆病毒载量。结果 7例病人中6例有阳性结果，波动范围0～6．29％。细胞内病毒含量的结果与血浆病毒载量完全一致。结论 荧光原位杂交检测细胞内HIV-1的方法敏感性高，重复性好，检测速度快，可以成为评价艾滋病病程进展和抗病毒治疗的重要方法。