HIF—1α在胰腺癌组织中的表达及其对细胞凋亡的影响

目的通过检测胰腺癌组织HIF-1α、Bcl-XL的表达,探讨HIF-1α对胰腺癌细胞凋亡的影响。方法应用免疫组化方法检测41例胰腺癌和20例正常胰腺组织中HIF-1α、Bcl-XL的表达,TUNEL法检测细胞凋亡,RT-PCR和Western blot检测21例胰腺癌组织和10例正常胰腺中HIF-1α、Bcl-XLmRNA和蛋白的表达。结果正常胰腺组织均无HIF-1α、Bcl-XL蛋白和mRNA的表达。胰腺癌组织HIF-1α、Bcl-XL蛋白表达率分别为63.4%和87.8%,HIF-1αmRNA和Bcl-XL mRNA的表达率分别为71.4%和80.9%,两者的表达呈正相关(r=0.335,P=0.032),HIF-1α阳性表达的胰腺癌的凋亡指数较阴性表达者低[(1.32±0.59)%vs(1.79±0.77)%,P=0.034]。结论HIF-1α和Bcl-XL在胰腺癌组织中存在高表达。HIF-1α可能通过上调Bcl-XL的表达抑制胰腺癌细胞凋亡,在胰腺癌发生发展中起重要作用。     

STAT3和Cyclin D1在胰腺癌中的表达及其临床意义

目的探讨信号转导和转录激活因子-3(STAT3)、磷酸化STAT3(PSTAT3)及Cyclin D1 的蛋白在胰腺癌中表达情况及活化STAT3的蛋白表达与胰腺癌临床病理特征的关系。方法用免疫组化法检测41例手术切除的胰腺癌组织和10例正常胰腺组织中STAT3、PSTAT3、Cyclin D1的蛋白表达。结果在41例胰腺癌标本中有31例(75.6%)STAT3、29例(70.7%)PSTAT3和25例(61.0%) Cyclin D1的蛋白表达阳性,明显高于正常胰腺组织。STAT3主要在细胞质表达,PSTAT3和Cyclin D1 主要在细胞核内表达。PSTAT3和Cyclin D1蛋白的阳性表达呈正相关(P<0.001)。PSTAT3在临床分期较晚和有淋巴结转移的胰腺癌中呈高表达(P<0.05),Cyclin D1的表达与淋巴结转移有关(P< 0.05)。结论本研究结果表明胰腺癌组织中存在STAT3、PSTAT3和Cyclin D1的过表达,并与临床病理分期和淋巴结转移有关,PSTAT3过表达与Cyclin D1的表达呈正相关,提示PSTAT3可能通过上调Cyclin D1表达,在胰腺癌的发生发展中起重要作用。     

STAT3调控胰腺癌侵袭转移相关基因的筛选

目的 应用基因芯片筛选信号转导与转录激活因子3(STAT3)调控胰腺癌侵袭转移的相关基因.方法 以慢病毒感染获得稳定STAT3沉默人胰腺癌细胞株SW1990,以空质粒病毒组、未感染组为对照.应用基因芯片筛选3组细胞与肿瘤侵袭转移相关的差异表达基因.用实时PCR及蛋白质印迹法检测STAT3 mRNA及蛋白表达,并验证所选取的3个差异表达基因(MMP-7、IL-1β、IgTα7).结果 靶向STAT3的病毒感染SW1990细胞后,STAT3 mRNA表达水平为0.391±0.037,显著低于空质粒病毒组的1.002±0.015和未感染组的1.206 ±0.042(P ＜0.05);STAT3蛋白表达水平为182.38±65.32,亦明显低于空质粒病毒组的223.40±58.40和未感染组的212.33±53.69(P＜0.05).STAT3沉默的SW1990细胞有8个肿瘤侵袭转移相关基因表达上调,3个表达下调,经验证,沉默组细胞MMP-7、IL-1β mRNA表达水平明显低于空质粒病毒组(0.287±0.115比1.010±0.124,t =19.45,P=0.000;0.490±0.010比1.002±0.002,t=13.83,P=0.000),而IgTα7 mRNA表达水平无明显变化(1.173±0.280比0.998±0.003,t=4.236,P=0.094).同时沉默组细胞MMP-7蛋白表达亦显著降低.结论 STAT3沉默可导致人胰腺癌SW1990细胞多个与肿瘤侵袭转移相关基因表达的改变,其中MMP-7可能是受STAT3调控的主要靶基因.     

基于高通量分子对接虚拟筛选SARS-CoV-2 3CL水解酶中药小分子抑制剂及抗新型冠状病毒肺炎（COVID-19）的中药及其复方预测

目的基于中药系统药理学数据库和分析平台TCMSP,运用计算机虚拟筛选技术寻找新型冠状病毒(SARS-CoV-2)3CL水解酶的中药小分子抑制剂,推测潜在抗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)中药及中药复方。方法以SARS-CoV-2 3CL水解酶蛋白为靶点,利用Autodock Vina软件和Python脚本实现高通量分子对接,结合"ADME-Lipinski"规则进行再次筛选,以优选活性成分,推测关键中药及复方。基于网络药理学角度,构建成分-靶点-通路网络,推测核心药对的作用机制。结果以SARS-Co V-2原配体为阳性对照,筛选出66个药动学性质良好的天然小分子抑制剂,优选出12味中药单味药,2个中药药对甘草-桑白皮和金银花-连翘,以及桑菊饮、桑菊饮合银翘散加减等12个中药处方作为抗SARS-CoV-2的候选方案。结论基于高通量分子对接技术虚拟筛选SARS-CoV-2 3CL水解酶的中药小分子抑制剂及中药,结合网络药理学分析潜在分子机制,为中药抗击SARS-Co V-2提供了科学指导与理论依据。     

“长新冠”综合征研究最新进展

自2019年新型冠状病毒感染在全球流行以来，许多感染患者在急性感染期后会出现不同症状，涉及全身多个器官，其症状可能持续很长时间，称为“长新冠”综合征。“长新冠”综合征不等于新型冠状病毒感染后遗症，而是病毒感染后的长期持续症状，主要累及呼吸、循环、神经、消化等多个系统。本文对“长新冠”综合征展开综述，旨在提高临床对“长新冠”综合征的重视，提高对新型冠状病毒感染的治疗效果。     

人胰腺癌细胞STAT3下游耐药相关基因的初步筛选

目的利用小分子干扰RNA(siRNA)和基因芯片技术初步筛选人胰腺癌细胞信号转导及转入激活因子3(STAT3)下游耐药相关基因,为探索STAT3调控耐药机制提供依据。方法利用基因芯片技术比较人胰腺癌细胞SW1990与siRNA沉默STAT3后SW1990细胞中基因表达的差异,初步筛选STAT3下游耐药相关基因。结果按差异显著性标准从47 000条基因(代表38 500个明晰的基因)中筛选出具有表达差异的基因共有982条(2.55%),其中上调表达2倍的基因有592条,下调表达2倍的基因有390条。与耐药相关基因有:显著上调的拓扑异构酶IIα(TOPOIIα)、肿瘤坏死因子凋亡诱导相关配体(TRAIL);显著下调的富半胱氨酸61(CYR61),Ras肿瘤基因家族成员(RAP1A),bcl-2相关抗凋亡基因(BAG1),囊性纤维化跨膜转导调节因子(CFTR)。结论胰腺癌耐药是一个多基因、多通路相互作用的结果。应用siRNA技术沉默STAT3基因后,有6条耐药相关基因发生改变。为进一步研究STAT3与胰腺癌耐药的关系提供新的线索,也为胰腺癌的治疗提供新的思路。     

天浆壳化学成分研究

目的 研究天浆壳Metaplexis japonica(Thumb.) Makino的化学成分。方法 天浆壳80%乙醇提取物的二氯甲烷部位采用高速逆流色谱、Sephadex LH-20、硅胶柱色谱、制备液相色谱进行分离纯化，根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果 从中分离得到15个化合物，分别鉴定为orychophragines A(1)、C-藜芦酰乙二醇(2)、烟酰胺(3)、2, 3, 4′-三羟基-3′, 5′-二甲氧基苯丙酮(4)、2, 3-二氢-4(1H)-喹诺酮(5)、2, 4-喹唑啉二酮(6)、吐叶醇(7)、cucubalus baccifer L(8)、3-羟基-1-(4-羟基-3, 5-二甲氧基苯基)丙-1-酮(9)、3, 4′-二羟基-3′-甲氧基苯丙酮(10)、对羟基苯乙醇(11)、楝叶吴萸素B(12)、浙贝素(13)、异莨菪亭(14)、东莨菪亭(15)。结论 化合物1～6、8、10～15为首次从萝藦属植物中分离得到。