应用Super SMART cDNA合成技术扩增哮喘嗜酸性粒细胞总RNA

目的 应用Super SMART cDNA合成技术从嗜酸细胞微量总RNA扩增大量双链cDNA。方法 利用Percoll密度梯度离心分离哮喘病人血嗜酸性粒细胞，用Trizol试剂盒提取细胞总RNA，利用Super SMART cDNA合成技术合成cDNA第1链及优化扩增第2链。通过梯度电泳鉴定cDNA产品质量，通过对获得的cDNA定量来评估扩增效能。结果 从20ng总RNA成功扩增出双链cDNA 7．155 μg，电泳结果显示cDNA质量及纯度较高。结论 Super Smart cDNA合成技术可实现从微量总RNA高效扩增高质量的cDNA，为进一步从基因水平研究哮喘机制奠定了基础。     

哮喘豚鼠气管平滑肌钾离子通道特性的改变

目的为探讨哮喘时电压依赖性钾离子通道（ⅠＫ）特性的改变。方法在支气管平滑肌细胞膜上，用膜片钳技术进行了研究。结果哮喘平滑肌细胞有如下改变：（１）静息跨膜电位差值降低。（２）通道电导值与正常组相比下降了约５１％。（３）开放时间常数的快、慢成分明显缩短，分别下降到正常对照组的２５％和７％。关闭时间常数明显延长。（４）开放概率有电压依赖性，但在相同的钳制电压范围内明显降低。结论哮喘气道高反应性时钾离子通道动力学活性明显衰减，提示将导致细胞兴奋阈降低。     

哮喘的临床与炎症表型

支气管哮喘（简称哮喘）作为一种异质性疾病,其发病机制复杂多样,病理生理改变和临床表现同样具有多样性。表型（Phenotypes）是指生物体的可观察特征,是基因型和环境因素相互作用的结果;它也是能将生物体分成不同独立类群的一系列特征。近年来,学者们对哮喘的表现和治疗反应的异质性认识不断增加,从哮喘的不同角度进行观察并归纳出多种临床和炎症表型。虽然对这些表型尚未达成共识,但它有助于深入认识哮喘的发病机制,有助于获得对哮喘进行更有针对性的治疗策略。     

纤维支气管镜引导经鼻气管插管治疗慢性阻塞性肺疾病合并呼吸衰竭临床研究

目的：探讨纤维支气管镜引导下经鼻气管插管抢救慢性阻塞性肺疾病（COPD）合并呼吸衰竭的临床价值。方法：对160例COPD合并呼吸衰竭患者采用纤维支气管镜引导下经鼻气管插管并进行机械通气,总结分析其临床资料。结果：纤维支气管镜引导下经鼻气管插管160例,均1次获得成功,插管时间0．5—4分钟,呼吸衰竭均明显改善,留管时间3—50天,平均14天,并发症少。结论：纤维支气管镜引导下经鼻气管插管治疗COPD合并呼吸衰竭抢救率成功率高,并发症轻,具有重要的临床应用价值。     

不同潮气量机械通气大鼠血清对血管内皮细胞钙激活钾通道的影响

目的:研究不同潮气量机械通气大鼠血清对血管内皮细胞钙激活钾通道(KCa通道)的影响.方法:健康雄性SD大鼠随机分为A组(麻醉后不做任何处)和B、C组(麻醉后行气管切开插管并分别给予不同潮气量(VT)的机械通气4h.B组VT10mL/kg,C组40 mL/kg),通气结束后取各组大鼠血清,分别刺激已培养好的人脐静脉内皮细胞(ECV304)30 min,利用细胞贴附式膜片钳观察KCa通道的变化.结果:B、C组内皮细胞KCa通道开放率明显上升,且以C组最为明显.结论:不同VT机械通气大鼠血清对ECV304 KCa通道的开放、关闭具有一定的影响.     

不同潮气量联合呼气末正压机械通气对急性肺损伤犬肺的影响

目的 观察不同VT联合PEEP机械通气对油酸型ALI犬肺损伤的影响.方法 用油酸静脉注射法制备犬ALI模型,造模成功后随机分为小VT组(6 mL/kg)和大VT组(20 mL/kg),行机械通气6 h,PEEP均设为10 cm H2O.观察各组在造模前,造模成功,机械通气1、2、4及6 h时血气变化.在机械通气6 h后处死犬,取BALF作蛋白浓度检查,取肺组织作病理切片肺损伤评分.结果 各组在油酸静脉注射后(2.50±0.80)h达到ALI标准.各组犬在整个实验过程中pH值进行性降低,但小VT组pH值下降较同期大VT组更显著(P<0.01).PaO2和SaO2在ALI造模后下降,机械通气后升高,机械通气6 h时小VT组显著高于大VT组(P<0.05).大VT组PaCO2波动不大,而小VT组PaCO2在机械通气后显著上升(P<0.01);PaO2/FiO2在造模后显著下降(P<0.01),在机械通气1 h进一步下降到约190 mm Hg后逐渐升高,机械通气6 h时小VT组较大VT组显著升高(P<0.05).小VT组BALF中蛋白浓度和肺组织损伤评分均较大VT组显著降低(P均<0.05).结论 PEEP为10 cm H2O的机械通气可改善油酸型ALI犬的氧合状况,而小VT较大VT改善更明显;小VT机械通气可导致进行性加重的高碳酸血症,但可避免因大VT机械通气导致的严重肺部组织损伤.     

布地奈德／福莫特罗治疗哮喘为期三个月的非干预性调研

目的 评价和调查布地奈德/福莫特罗常规临床治疗哮喘的疗效和使用情况.方法 开展多中心、开放的、非干预性调查研究,观察哮喘患者使用布地奈德/福莫特罗治疗12周后的哮喘控制情况,以哮喘控制调查问卷(ACQ)与改良的哮喘控制调查问卷(ACQ5)平均分值为主要疗效观察指标.结果 共入选受试者360例,其中成人哮喘228例,儿童哮喘132例.经12周治疗后,所有患者ACQ平均分值由治疗前的2.03(成人2.20,儿童1.74)下降为0.60(成人0.78,儿童0.29),ACQ5平均分值由治疗前2.47(成人2.24,儿童1.76)下降为0.47(成人0.62,儿童0.20),差异均有统计学意义(P<0.0001).结论 布地奈德/福莫特罗在常规临床应用时可以有效地改善哮喘,并达到哮喘的良好临床控制.     

后“非典”时期“非典”的鉴别诊断

目前全国内地每日新增传染性非典型肺炎(SARS)临床诊断病例不足10例,已进入后“非典”时期。SARS属于呼吸道传染病之一。具有临床表现、肺部体征及胸部影像学不一致的特点。在没有SARS流行期间也存在“非典型肺炎”(AP),因此在后“非典”时期加深对SARS发病率及临床演变过程的认识,加强对具有相似临床表现特点的疾病如AP、流感病毒性肺炎、肺结核、肺真菌性肺炎等的鉴别诊断。做好同步化的信息资源共享及加强基层一线医疗人员对SARS与AP的认识与培训,对及时发现SARS患者并避免SARS的“过度诊断”是非常重要的。采用临床多专业专家联合会诊是SARS诊断与鉴别诊断的关键。也是对新出现的传染性疾病临床诊断治疗以及预防和隔离的一种有益尝试。     

免疫抑制宿主与肺结核免疫状态及可能机制

免疫抑制宿主(immunocompromised host，ICH)从广义上来讲是指对外来抗原反应处于亚异常状态的人群，包括感染者、接受化疗的恶性血液疾病或实体器官肿瘤患者、移植受者和接受糖皮质激素或其他免疫抑制药物治疗的自身免疫疾病患者等。近年来研究发现，免疫抑制宿主肺结核的患病率明显高于正常人群。Fitzpatrick等研究指出免疫系统受到抑制的人群要比具有免疫活性的人群受到外源性结核菌感染的机会要高很多。在香港的一项调查发现系统性红斑狼疮(SLE)病人，由于长期接受高剂量激素的治疗，肺结核的发病率大大提高。Banda等研究调查发现，在HIV感染者中，肺结核的复发率(16．1％)和死亡率(25．7％)比正常人群高出很多。     

Slingshot丝切蛋白磷酸酶家族的定位及调节研究新进展

Slingshot（SSH）最先是在果蝇的遗传研究中证实的一种专用的丝切蛋白磷酸酶．SSH功能的异常可以导致磷酸化-丝切蛋白（p-cofilin）和丝状肌动蛋白（F—actin）水平上升及表皮细胞形态改变，包括刚毛的分裂。因分裂的刚毛形状如“弹弓（slingshot）”，因此将其命名为SlingshotE”。研究表明SSH家族可以通过对丝切蛋白的去磷酸化在肌动蛋白细胞骨架的调节中扮演重要角色，但是SSH的精确调控机制尚未阐明，本文拟重点对SSH的定位和调节机制作一综述。