弓形虫GRA6可溶性蛋白在大肠埃希菌中的表达及纯化

目的在大肠埃希菌中高效表达及纯化弓形虫GRA6抗原,为制作弓形虫感染基因工程诊断试剂盒奠定基础.方法将重组pGEX-GRA6表达载体转化大肠埃希菌BL21-Codon Plus（DE3）-RP菌株,在异丙基硫代-β-D半乳糖苷（IPTG）诱导下表达.超声破壁后,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分析表达产物的表达形式,并对表达产物以硫酸铵沉淀、Sephedax G50脱盐和GST亲和层析柱进行目的蛋白的纯化.通过Western blotting检测其纯化的重组抗原的免疫反应性.结果GRA6以融合蛋白（GST-GRA6）的形式在大肠埃希菌中得到了高效表达.对表达产物可溶性分析表明,表达蛋白在上清液中和包涵体中均有表达.在上清液中表达的可溶性蛋白经纯化后蛋白纯度可达90%以上.Western blotting分析表明纯化蛋白能被弓形虫感染的人血清所识别.结论GRA6在大肠埃希菌中得到了高效表达,重组抗原经纯化后能特异性地被弓形虫感染者血清所识别.     

细胞色素P450酶17基因多态性与迟发型男性性腺功能减退症的相关性研究

目的探讨细胞色素P450酶17(CYP17)基因多态性与迟发型男性性腺功能减退症(LOH)的关系,研究LOH的发病机制。方法纳入年龄在49~79岁的中老年男性356例,其中36例诊断为迟发性性腺功能减退症患者,随机抽取130例正常健康中老年男性,测量身高、体质量、腰围(WC)、血压,测定三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、空腹血糖(FBG)、血清总睾酮(T)、雌二醇(E2),并应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测CYP17基因多态位点的片段,产物在2%琼脂糖凝胶上电泳确定出CYP17基因型,比较两组各指标之间的差异。结果 CYP17基因呈多态性:A1/A1、A1/A2和A2/A2。正常健康中老年男性的SBP、BMI、TG、TC和,FBG较LOH患者低(P0.05),而T和T/E2比值较LOH组显著升高(P0.01),两组间E2差异无统计学意义(P0.05)。正常健康中老年男性组CYP17不同基因型之间T和T/E2比值差异无统计学意义(P0.05);LOH组CYP17不同基因型之间T和T/E2比值差异有统计学意义(P0.05),两组不同基因型之间E2差异无统计学意义(P0.05)。LOH组较正常健康中老年男性组CYP17基因杂合变异型A1/A2呈现低频率分布(33.3%),而纯合变异型A2/A2呈高频率分布(47.3%),差异有统计学意义(P0.05)。结论 CYP17基因多态性可能与LOH患者的T水平有关,低水平的T和T/E2比值可能是LOH发病的危险因素。     

高黏滞血症患者白细胞流变特性的研究

目的 通过比较伴有和不伴有高黏滞血症病人白细胞膜流动性、白细胞荧光光谱、血浆脂质过氧化和血浆中总胆固醇含量,从而探讨了在高黏滞血症情况下白细胞的改变.方法 100人伴有高黏滞血症和60人不伴有高黏滞血症,用荧光偏振技术测量白细胞膜的流动性;用荧光分光光度计,在250nm激发下,测量白细胞的自体荧光发射光谱;用丙二醛试剂盒测血浆中丙二醛含量;用总胆固醇试剂盒测血浆中总胆固醇含量.结果 伴高黏滞血症组较不伴黏滞血症组,白细胞膜流动性降低,脂质过氧化程度大,总胆固醇含量高;高黏滞血症组较不伴黏滞血症组白细胞有三个特征峰值的增加,S1波长为330nm,S2波长为561.4nm,S3波长为654.4nm.结论 伴有高黏滞血症病人白细胞膜流动性变差;血浆MDA水平升高;血浆中总胆固醇增加;白细胞会出现三个强峰峰值的增加S1波长为330nm,S2波长为561.4nm,S3 波长为654.4nm.     

不同消毒剂对猪蛔虫卵的杀灭作用

猪蛔虫病主要通过已感染个体的排泄物进行传播的,因此对动物居住空间和活动范围的有效消毒可以避免疾病的传播。目前已经有人提出在每年春秋季节进行消毒,以预防疾病在动物中的传播和发病。而对这些消毒剂要求兼顾经济和环境因素。本实验通过实验室研究不同消毒剂对猪蛔虫卵的杀灭作用以了解它们的现场应用价值。实验所选用的消毒剂包括常见的漂白粉等不同浓度含氯消毒剂、氢氧化胺以及在活性氯消毒剂中加入一些成分,如乙醇、磷酸或表面活性剂等。分析这些消毒剂在不同浓度,不同消毒时间内,对未受精猪蛔虫卵的杀灭效应。其中猪蛔虫未受精虫…     

以血浆作透析液在肝移植术前的应用

目的以人体新鲜冰冻血浆作透析液行血液透析（PHD）后继续进行连续性静脉-静脉血液滤过（CVVH）,观察其对肝移植术前高胆红素血症及血浆细胞因子水平的影响。方法4例拟行肝移植手术的肝功能衰竭患者行PHD治疗6 h后,应用同一滤器（AV600）继续行CVVH治疗24 h。分别检测治疗前后血清胆红素（TB、DB、IB）、总胆汁酸（TBA）、血氨（BA）及细胞因子TNF-a,IL-6和IL-8的水平。结果PHD治疗6 h后患者总胆红素（TB）、直接胆红素（DB）、间接胆红素（IB）和总胆汁酸（TBA）分别下降（24.38±4.89）%（、26.23±2.67）%（、25.02±0.01）%、（27.38±8.59）%（P〈0.05）;PHD后继续行CVVH治疗24 h,总胆红素（TB）仍有所下降（10.61±0.32）%;CVVH在清除血氨,纠正电解质和酸碱失衡方面比PHD更有效（P〈0.05）;PHD及CVVH治疗后TNF-aI、L 6、IL-8较治疗前明显下降（P〈0.05）。结论对肝功能衰竭患者,PHD联合CVVH治疗能显著降低血清胆红素、总胆汁酸、血氨及炎性细胞因子水平,调节水、电解质和酸碱平衡。     

联机血液透析滤过和高通量透析对尿毒症患者中大分子物质的清除效果

目的 分析比较联机血液透析滤过(OL-HDF)和高通量透析(HFHD)清除尿毒症患者中大分子量毒素的效果.方法 选取160例本院血液净化中心稳定的长期维持性血液透析(MHD)患者进入本研究,随机分为A组80例行后稀释法OL-HDF,B组80例行HFHD治疗,分别于单次OL-HDF、HFHD治疗前、治疗结束时取血检测患者血β2-微球蛋白(β2-MG)、血全段甲状旁腺激素(iPTH)、血清尿素氮(BUN)、血清肌酐(Cr)、血浆白蛋白(ALB)水平.结果 比较治疗前后2组患者血β2-MG、血iPTH、BUN、Cr值,差异有统计学差异(P＜0.01);组间治疗前比较差异无统计学意义(P＞0.05),而治疗后A组(OL-HDF)血β2-MG、iPTH值的下降更明显,P＜0.05.结论 2种方法均可有效清除血β2-MG、血iPTH,但OL-HDF比HFHD能清除更多的血β2-MG、血iPTH,OL-HDF对中大分子毒素的清除更有效.     

经胸超声和造影测量法指导国产封堵器介入治疗先心病的价值

目的探讨经胸超声（TTE）和造影测量法指导国产封堵器介入治疗房间隔缺损（ASD）、室间隔缺损（VSD）和动脉导管未闭（PDA）的应用价值。方法术前应用TTE筛选符合封堵适应证的先心病患者50例，其中ASD20例、VSD16例、PDA14例。术中用TTE监测指导释放ASD封堵器；使用造影测量法测量VSD、PDA指导国产封堵器的选择。术后应用TTE定期随访。结果19例ASD、15例VSD、14例PDA封堵成功，总成功率为96．0％（48／50）。封堵失败：1例ASD，缺损最大径36mm；1例VSD，缺损最大径10mmm，为膜周部室缺。结论TTE可用于筛选先心病病例。术中用TTE监测指导释放ASD封堵器，疗效可靠；使用造影测量法测量VSD、PDA指导国产封堵器的选择是手术成功的基本条件之一。     

乳酸乳球菌表达弓形虫棒状体蛋白1(ROP1)

目的　在乳酸乳球菌中表达ROP1抗原蛋白。方法　从质粒 psk -ROP1中以BamHⅠ和SalⅠ双酶切出ROP1基因 ,置换构建好的大肠杆菌 -乳酸乳球菌穿梭表达质粒L2 -PsP30T中的P30基因 ,电转化感受态乳酸乳球菌 ,以Westernblotting鉴定ROP1在乳酸乳球菌中的表达。结果　表达产物中有一约 4 3kDa的蛋白带能被弓形虫病人血清识别。结论　ROP1在乳酸乳球菌中得到了表达     

综合疗法加腹水超滤浓缩回输治疗顽固性腹水疗效观察

1999年 6月以来 ,我科应用腹水超滤浓缩回输治疗顽固性腹水患者 5 1例 ,效果良好 ,现报告如下。1　资料与方法1 .1　临床资料　本文患者 96例 ,随机分成两组 ,治疗组 5 1例、男 3 5例、女 1 6例 ,年龄 2 5～ 79岁、平均41 .5 6± 1 1 .81岁 ;腹水病因为肝硬化失代偿期 40例 ,肾