不同厂家氯硝柳胺与烟酰苯胺复配灭螺实验研究

目的掌握不同厂家氯硝柳胺与烟酰苯胺复配的灭螺效果。方法将氯硝柳胺与烟酰苯胺按1∶1的比例进行复配形成复合物(简称氯烟复合物),在室内进行浸杀和喷洒灭螺实验并观察钉螺触药上爬及鱼类急性毒性情况。结果在室温23～25℃条件下,采用0.2mg/L氯烟复合物,室内浸泡48h,3个厂家氯烟复合物淮南组、吴江组和四川组的钉螺死亡率分别为93.3%、94.7%和95.4%。采用0.4g/m氯烟复合物,室内喷洒248h,3个厂家氯烟复合物淮南组、吴江组和四川组的钉螺死亡率分别为97%、96%和96%。钉螺接触氯烟复合物的上爬率比烟酰苯胺下降71.9%,2组钉螺上爬率差异有统计学意义(P<0.01)。对鱼的急性毒性,氯烟复合物比氯硝柳胺下降50%左右。结论不同厂家氯硝柳胺和烟酰苯胺通过复配后均可获得增效灭螺的作用。     

湖北钉螺肝脏细胞原代培养的初步研究

目的 研究湖北钉螺肝脏细胞的原代培养方法，观察肝脏细胞琥珀酸脱氢酶（SDH）和乳酸脱氢酶（LDH） 的活性分布。 方法 解剖湖北钉螺取肝脏，用0.2%（体积比）苯扎溴铵（新洁尔灭）浸泡及含抗生素的生理盐水无菌洗涤、磨碎、过滤，收集肝脏细胞。采用联合法和静置悬浮法接种培养。细胞培养液配方: 50 ml M199溶液、3 mg/ml 水解乳蛋白溶液30 ml(平衡盐溶液配制)及胎牛血清20 ml, 混匀，附加常量抗生素（青霉素100 IU/ml、链霉素100 μg/ml、卡那霉素50 μg/ml），混匀，调节pH值为7.2～7.4。于26.5 ℃ 培养。联合法培养的肝脏细胞分别进行Giemsa、SDH和LDH染色，显微镜观察活细胞与染色细胞形态、SDH和LDH的分布，以及观察静置悬浮法培养的肝脏细胞形态。 结果 联合法培养的肝脏细胞贴壁后形态各异，以圆形、椭圆形为主, 也有三角形和不规则形等。细胞大小约（4～16） μm×（6～20） μm。较小细胞形成细胞簇，细胞核不明显，细胞质丰富、透亮。散在分布的单个细胞稍大，细胞核较大而明显，细胞质较少。培养5～7 d 的肝脏细胞逐渐退化。Giemsa染色将细胞分为两种，一种为细胞质呈蓝色，细胞核紫红色；另一种是细胞质呈紫红色，细胞核呈蓝色。SDH和LDH染色，细胞质出现大小不同、深浅不一的蓝色颗粒。静置悬浮法培养的肝脏细胞不易贴壁，多为圆形，细胞核不明显。细胞较小，约为（4～6） μm×（6～8） μm。培养3 d 均被细菌污染。 结论 联合法更适合湖北钉螺肝脏细胞原代培养，SDH和LDH活性位于肝脏细胞质中。     

医学吸虫抗氧化酶家族的研究进展

需氧生物体在正常生理代谢过程中会产生活性氧族（reactive oxygen species,ROS）,但过多的ROS可引起体内多种氧化损伤,因此这类生物体都具备一套完善的防御体系,抗氧化酶是其中一个重要的组成部分。对于医学吸虫,不仅需要抗氧化酶清除正常生理代谢中产生的ROS,还要抵抗宿主免疫系统来源的ROS引起的损伤。了解医学吸虫抗氧化酶家族的结构和特性,有助于对其生殖生理的研究,以及新型药物和疫苗的开发。本文综述近年来对医学吸虫谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GPx）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）及抗氧化蛋白（peroxire-doxin,PRx）等抗氧化酶家族的研究进展。     

血吸虫感染新模型兔血清对童虫的体外杀伤实验

目的　在已建立的一种血吸虫感染伴随免疫新模型的基础上 ,观察该模型兔血清对童虫的体外杀伤作用 ,探讨该血清抗体在抗日本血吸虫感染保护性免疫中的作用。　方法　用倒置显微镜观察并比较不同稀释度的日本血吸虫感染伴随免疫新模型兔血清 (A血清 )与日本血吸虫感染常规模型兔血清 (B血清 )对体外培养童虫的杀伤作用 ,并经甲基蓝染色后计算童虫死亡率。　结果　对体外童虫的杀伤作用 ,新模型兔血清随浓度的降低而逐渐减弱 ,血清浓度越低 ,童虫死亡率亦越低。但常规模型兔血清随浓度的降低则呈现先上升后下降的趋势 ,以 1/ 10左右稀释度时最高。比较A、B两种血清对童虫的杀伤作用 ,前者强于后者 ,1/ 2血清稀释度培养 48h观察到的童虫死亡率分别为 (4 1.2 3±1.0 8) %和 (2 7.2 7± 2 .86) % (P <0 .0 5 ) ;先加入后者 4h后再加入前者能部分抑制前者的杀童虫作用 ,童虫死亡率为(3 7.63± 2 .3 3 ) % ,介于两者之间。常规模型血清组部分童虫体表出现膜状或泡状物质包绕 ,但童虫却未受到明显杀伤。结论　日本血吸虫感染伴随免疫新模型兔血清在体外对童虫的杀伤作用强于常规模型兔血清 ,推测前者可能以杀伤抗体占优势 ;而后者可能以封闭抗体占优势。     

丙烯基硫脲对日本血吸虫成虫及虫卵作用的初步研究

采用丙烯基硫脲 30 0mg/ (kg·d)连续 3d经腹腔注射感染日本血吸虫 42d的小鼠 ,停药后 2h进行解剖 ,结果发现 :丙烯基硫脲对日本血吸虫雌雄成虫生长发育及雌虫卵巢长度无明显影响 (P >0 .0 5 ) ,而雌虫子宫内则出现无卵或虫卵形状不规则 ,呈沙粒状小团块物 ,未见明显虫卵卵壳。提示丙烯基硫脲作为酚抑制剂能有效抑制日本血吸虫雌虫成虫产卵     

如何科学地运用实验方法发现新型病原体

传染病一直在威胁人类的健康。自20世纪70年代以来,在世界范围内陆续发现了30余种新型传染病,而在我国就存在20余种。     

SIEA免疫后的感染血清体外培养日本血吸虫未成熟卵鉴定抗卵胚胎发育候选分子

目的筛选ＳＩＥＡ抗卵胚胎发育的候选分子。方法小鼠再感染日本血吸虫尾蚴用ＳＩＥＡ免疫后４９天,实验组收集该免疫血清培养日本血吸虫未成熟卵。对照组用未免疫小鼠相同天数感染的血清培养,２天后,收集虫卵,作免疫沉淀和ＳＤＳ—ＰＡＧＥ分析。结果发现实验组仅出现５４ＫＤ。结论日本血吸虫未成熟卵可溶性抗原中５４ＫＤ分子可能位于未成熟卵膜或基质中,由未成熟卵所释放,为ＳＩＥＡ诱导保护性免疫中主要的效应分子     

SIEA对感染了日本血吸虫尾蚴的小鼠诱导的免疫力研究

目的　采用尾蚴攻击感染小鼠后免疫的方式 ,研究日本血吸虫未成熟卵可溶性抗原 (SIEA)诱导抗卵胚胎发育和抗虫免疫的效果。方法　感染日本血吸虫尾蚴之后的第 2天用 SIEA免疫小鼠 ,每周 1次 ,共 5次 ,于第 48天剖杀小鼠 ,统计肝脏各期虫卵数、雌虫子宫虫卵数及每鼠成虫数。结果　与对照组比较 ,SIEA免疫诱导显著抗卵胚胎发育效果 ,肝组织成熟卵数下降 2 7.5 % ,成熟卵比例下降 11.0 % ,但 SIEA未诱导显著抗虫和抗雌虫生殖效果。结论　采取在尾蚴感染之后免疫 ,SIEA能诱导显著抗卵胚胎发育 ,但比尾蚴感染小鼠之前免疫的抗卵胚胎发育效果低     

日本血吸虫保护性抗原模拟表位的筛选及其免疫保护作用的研究

目的在前期已建立日本血吸虫感染兔新模型的基础上,用该血清从噬菌体随机12肽库中筛选阳性单克隆噬菌体,并鉴定其诱导小鼠的免疫保护效果。方法通过给感染日本血吸虫家兔注射酚氧化酶抑制剂,抑制其体内日本血吸虫雌虫产卵,建立无虫卵肉芽肿的日本血吸虫感染动物新模型,用其血清筛选出阳性多克隆噬菌体,经与可溶性虫卵抗原(SEA)免疫兔血清充分吸附后,从中随机挑取14个单克隆分别纯化、扩增,用常规ELISA法检测阳性单克隆噬菌体的抗原性;挑选出与新模型兔血清呈强阳性反应,但与SEA免疫兔血清呈阴性或弱阳性反应的单克隆噬菌体,按1×1015pfu/次剂量,0-2-4周方案,皮下多点注射免疫小鼠。末次免疫4周后,每鼠经腹部皮肤攻击感染(40±1)条日本血吸虫尾蚴,感染42d后观察减虫率及减卵率。结果所选14个单克隆噬菌体均能与新模型兔血清和常规感染模型兔血清反应,尤其是第8号和第13号2个克隆与新模型兔血清呈强阳性反应,但与SEA免疫兔血清呈阴性反应;8号、13号单克隆噬菌体及原始噬菌体肽库免疫小鼠后诱导抗攻击感染的减虫率及每克肝脏减卵率分别为35.81%和63.32%、32.09%和52.02%、14.90%和30.64%。结论阳性多克隆噬菌体与SEA免疫兔血清免疫吸附后能去除大部分表达SEA抗原模拟表位的克隆,所选14个单克隆噬菌体均表达     

SIEA免疫血清对体外培养的日本血吸虫卵 胚胎发育的作用

目的 采用体外培养方式,探讨日本血吸虫未成熟卵可溶性抗源（SIEA）免疫血清的抗卵胚胎发育的作用。方法 从日本血吸虫小鼠肝脏无菌分离提取虫卵,转入RPMI-1640培养基中,对照组与试验组分别加入正常鼠血清 SIEA免疫血清。试验1：培养虫卵30d;试验2：培养虫卵14d。观察统计各期虫卵比较。结果 在试验1中,SIEA免疫血清组成熟卵比例与对照组比较,下降22.5%,初产卵、胚胎卵和死亡卵比例均高于对照组。在试验2中,SIEA免疫血清成熟卵比例下降14.7%,胚胎卵比例上升24.4%。结论 体外培养系统中SIEA免疫血清具有抗日本血吸虫卵胚胎发育的作用。