顺铂增强替尼泊甙杀伤小细胞肺癌细胞系的作用

目的通过顺铂(CDDP)与替尼泊甙(VM-26)联合作用,探讨顺铂增强替尼泊甙对小细胞肺癌细胞株杀伤作用的机制。方法用MTT法,测定H446小细胞肺癌细胞24 h抑制率;AO/EB双荧光染色观察细胞活率;琼脂糖凝胶电泳检测DNA断裂条带;半定量RT-PCR及蛋白印迹检测DNA拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)及特化蛋白1(SP1)的表达。结果CDDP与VM-26联合应用有明显的协同效应;二药合用与单独用药相比,细胞活率明显降低,DNA损伤程度增加。H446细胞经CDDP单独作用可以促进SP1、TopoⅡα和TopoⅡβmRNA及蛋白的表达;经VM-26单独作用后,TopoⅡα和TopoⅡβmRNA及蛋白表达降低,而SP1表达无明显改变;二药合用后可见TopoⅡαmRNA及蛋白的表达比单独应用CDDP下调,SP1 mRNA及蛋白的表达比单用VM-26升高,但与单用CDDP相比没有明显变化。结论CDDP通过上调SP1促进H446细胞中TopoⅡ表达,为TopoⅡ抑制剂类药物VM-26提供更多的作用靶点,能够明显提高对小细胞肺癌的抑制作用。     

细胞外调节蛋白激酶在体外培养下大鼠大脑皮质星形胶质细胞的表达

目的:研究大鼠大脑皮质星形胶质细胞细胞外调节蛋白激酶(ERK)表达.方法:用生后2～3d SD大鼠,在无菌条件下取大脑皮质,制备细胞悬液,以GFAP鉴定星形胶质细胞;用免疫细胞化学方法研究星形胶质细胞ERK1表达.结果:星形胶质细胞的纯度达95%以上,ERK1免疫阳性物质呈棕黄色,分布于星形胶质细胞胞体与突起中.结论:培养的大鼠星形胶质细胞表达ERK1,其可能与星形胶质细胞信号转导有关.     

融合蛋白pTAT-XIAP的原核表达及穿透血脑屏障功能的鉴定

目的 构建pTAT-XIAP原核表达载体,以获得pTAT-XIAP融合蛋白,并研究该融合蛋白穿透血脑屏障的功能.方法 在体外合成大鼠XIAP基因,将其插入pTAT-HA质粒,构建pTAT-XIAP融合蛋白表达载体,转入大肠杆菌表达菌株BL21plysS进行诱导表达.pTAT-XIAP融合蛋白经Ni-NTA亲和层析纯化,SDS-PAGE及Western印迹鉴定融合蛋白.pTAT-XIAP融合蛋白腹腔注射SD大鼠体内,免疫荧光法检测在脑组织的分布.结果 表达产物经SDS-PAGE及Western印迹分析后,在64kD处有一明显表达条带,与理论结果相符.免疫荧光法检测,pTAT-XIAP融合蛋白在大脑皮质、基底节等广泛分布.结论 重组融合蛋白pTAT-XIAP成功表达并可穿透血脑屏障,为进一步研究该基因的功能奠定了基础.     

大鼠海马解剖与脑立体定位

海马是大脑边缘系统的重要组成部分,能参与行为反应、内脏活动、调节生物节律和内分泌等机能的整合作用,尤其与学习记忆有密切关系。大鼠海马是研究行为神经生物学的重要结构,可通过脑立体定位技术建立物理损毁或化学损毁疾病模型,鉴于大鼠海马在神经医学研究中的重要性,我们制作了一套大鼠海马大体解剖标本,以期为有关大鼠海马的脑立体定位研究提供形态学基础。     

耳大神经移植治疗面神经麻痹的应用解剖学研究

用22具成年尸体的44侧耳大神经进行了解剖观察和测量.耳大神经的平均长度为4.12cm,有2～4个分支.耳大神经的体表投影相当于胸锁乳突肌后缘中点稍下方至耳垂的连线,主干在颈外静脉后方约0.7cm.结果表明:耳大神经是用于神经移植治疗面神经麻痹较理想的神经移植物,耳大神经的体表投影、颈外静脉及下颌角是术中寻找的可靠标志.     

pTAT-XIAP融合蛋白的原核表达及纯化

目的将X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)插入质粒pTAT-HA,构建pTAT-XIAP原核表达载体,以获得高产量、高纯度的pTAT-XIAP融合蛋白。方法将pTAT-XIAP融合蛋白表达载体转入大肠杆菌BL21plysS,异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导融合蛋白表达,产物经镍离子亲和层析柱(Ni-NTA)亲和层析纯化,并用Western blot方法鉴定。结果 pTAT-XIAP融合蛋白在大肠杆菌中获得表达,纯化后蛋白呈单一条带,表达产物经Western blot分析证实目的蛋白表达。结论构建重组融合表达载体,在大肠杆菌中成功表达并纯化pTAT-XIAP融合蛋白。     

外源性IL-18基因对C6胶质瘤细胞周期及相关基因表达的影响

目的:本研究拟从分子水平探讨IL-18基因转染对C6胶质瘤细胞周期及其相关基因表达的影响。方法:用流式细胞仪检测C6/IL-18细胞周期、细胞增殖指数的变化;以MTT法检测细胞的增殖活性及细胞抑制率,用RT-PCR、Western blot分析C6/IL-18细胞PCNAc、yclin D1c、yclin B1、p21 mRNA及蛋白的表达。结果:与C6/LXSN细胞及亲代C6细胞相比,C6/IL-18细胞周期有所改变,表现为G0/G1期细胞增多、G2/M期细胞减少,细胞增殖指数(PI)与细胞增殖活性降低。C6/IL-18细胞的PCNAc、yclin D1c、yclin B1 mRNA及蛋白表达降低,p21 mRNA及蛋白表达增高。结论:外源性IL-18基因表达可降低C6细胞的增殖活性,下调PCNA,cyclin D1,cyclin B1表达,上调p21基因表达,其作用机制有待进一步研究。     

改良Hardinge小切口应用于髋关节置换术的解剖学及临床研究

[目的]通过尸体解剖确定臀上神经最下支(most inferior branch,MIB)的体表投影从而确定一个手术安全区域,依据这一解剖结果对Hardinge入路进行改良,并在临床中探讨改良入路的优势.[方法]解剖50具尸体双侧臀部(共计100侧),确定MIB的体表投影和手术安全区域.依据结果对Hardinge入路进行改良,并在3具尸体双侧臀部(共计6侧)上经改良Hardinge入路模拟手术,从而验证其安全性,然后应用于临床.[结果]MIB在体表的弧形投影线与股骨大转子外侧最凸点形成一解剖区域,内无重要血管神经分布,为手术安全区.依据安全区所改良的Hardinge入路模拟手术后,解剖均未发现MIB及其他明显神经血管损伤.临床应用26例,经10～28个月随访,平均18.6个月,术后患者均无神经损伤和外展肌力减弱的现象.[结论]MIB在体表的弧形投影线与股骨大转子外侧最凸点构成了一个手术安全区域,改良Hardinge入路在手术操作过程中均未超出此安全区域,不会损伤到MIB及其他重要神经血管,手术安全有效.     

Aβ寡聚体与阿尔茨海默病的研究进展

阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)是老年性痴呆的主要类型,老年斑和神经原纤维缠结是AD的主要病理特征。随着近年来对AD研究的深入,越来越多的证据显示Aβ可能是AD发生的原发性病理因子,Aβ寡聚体比Aβ纤维具有更大的神经毒性。由于Aβ产生和清除之间的平衡逐渐改变,聚集态的Aβ累积引发连串的复杂反应,最终导致神经元死亡和认知功能障碍。结合近年来的研究成果,综述了Aβ寡聚体(Aβ-derived diffusible ligands,ADDLs)和阿尔茨海默病最新的研究进展。     

臀肌挛缩症皮下松解术相对安全区的确定及临床应用

[目的]通过解剖学研究探讨臀肌挛缩症手术操作的相对安全区,并在临床验证相对安全区皮下松解术治疗臀肌挛缩症的可行性.[方法]通过对51具尸体标本102侧臀部的解剖研究,确定臀部手术操作的相对安全区,并在临床应用.[结果]①臀肌拿缩症手术操作的相对安全区:臀上神经最下支的体表投影的弧线与大转子外侧最凸点形成一类扇形区域内重要血管神经分布,无论何种体位坐骨神经均无法到达该区域,为手术操作的相对安全区.②临床应崩23例,经12～29个月随访,平均19.7个月,术后患者均恢复正常步态或明显改善,均无坐骨神经损伤等严重并发症.[结论]臀肌挛缩症手术操作的相对安全区为臀上神经最下支的体表投影与大转子外侧最凸点所构成的类扇形区域,在此区域内操作不易损伤坐骨神经、臀上神经等重婴神经、血管,临床应用后,效果良好.