人类免疫缺陷病毒/丙型肝炎病毒共感染对实验室诊断影响的研究

目的 研究人类免疫缺陷病毒（HIV）／丙型肝炎病毒（HCV）共感染对两种病毒感染实验室诊断的影响。方法 对300例经免疫印迹试验（WB）确认的HIV感染者，以酶免疫测定HCV抗体，测定CD4／CD8计数；其中197例测定病毒载量，逆转录聚合酶链反应检测HCV核酸，阳性样品限制性片段长度分析丙肝分型，比较共感染和非共感染组在各检测诊断指标的差别。结果 HCV诊断：HCV抗体阴性组中19．5％为核酸阳性。多元回归分析，HCV核酸阳性，1b＋2a混合感染，1b基因型的感染3个因素对HCV EIA检测的S／CO值的升高有独立的显著影响。HIV诊断：300例，共感染组和非共感染组HIV ELISA A〈3的样本比例分别为4／265，5／41，有P〈0．01的差异有统计学意义；A〉3的样品中CD4分组后按比例取77份比较WB条带，共感染组P55条带出现率显著高于非共感染组（16／30，12／47，P〈0．01）。结论 HIV免疫抑制可造成很高的HCV抗体假阴性率，该人群推荐HCV核酸定性检测。共感染对HIV ELISA检测的影响表现为强阳性比例的显著提高；对HIV WB各主要诊断条带未见影响，共感染组p55条带比例显著高可能提示病毒间免疫和分子水平相互作用。对HC VEIA-3的S／CO值有独立影响的因素包括HCV核酸阳性，1b＋2a混合感染，1b基因型。     

硬膜外麻醉致单侧霍纳征和臂丛神经阻滞

女，28岁。体重70kg，身高160cm。以孕足月、头盆不称入院，拟在连续硬膜外麻醉下行子宫下段剖宫产术。术前检查脊柱无畸形，四肢活动正常，否认其他疾病和过敏史。患者入室时血压130／86mmHg，心率80／min，呼吸18／min，SpO298％。予面罩吸氧，于腰2．3间隙行硬膜外穿刺，向头端置管3．5em顺利，患者改平卧位后，硬膜外腔注入2％利多卡因4ml，5分钟后麻醉平面胸10～腰2，两侧对称，     

菇莲四生汤对100例中晚期肺癌伽玛刀术后中医扶正作用的临床观察

目的：观察自拟菇莲四生汤对中晚期肺癌伽玛刀术后的中医扶正作用的临床效果。方法：100例失去手术机会拟行伽马刀治疗的中晚期肺癌住院患者随机分为治疗组60例和对照组40例。两组均经伽马刀治疗后常规对症治疗,治疗组加口服菇莲四生汤。结果：治疗组和对照组的近期疗效分别是60．％和40％。生存质量分别是63．3％和32．5％。结论：中晚期肺癌经伽玛刀术后应用菇莲四生汤口服,可减轻伽玛刀的不良反应,有利于顺利完成伽马刀治疗全过程,提高患者生存质量,起到中医扶正的效果。     

HIV新近感染检测方法研究进展

我国在"艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治"科技重大专项"十一五"计划中明确提出"减少艾滋病病毒新近感染人数,降低艾滋病新发感染率"的目标,其评估的必要手段是进行HIV新近感染检测,估算HIV新发感染率并观察其动态变化趋势,估计HIV新近感染人数及比例.     

干血斑样本用于HIV抗体检测方法学优化与应用

目的探讨用于干血斑样本中艾滋病病毒(HIV)抗体检测的最佳洗脱条件。方法选取并制备中值(24)与低值(26)的干血斑样本,利用HIV抗体诊断试剂盒(酶联免疫吸附试验法),对不同洗脱温度、不同洗脱液组分、不同洗脱液体积、不同洗脱时间分别进行组合后,进行干血斑(DBS)样本洗脱液中抗体OD值测定分析,从而选出最适宜、最方便用于HIV抗体检测的DBS洗脱条件。结果室温与4℃条件下洗脱样本差异无统计学意义(P=0.979,P=0.704);不同洗脱液体积对样本洗脱的影响差异无统计学意义(P=0.183);洗脱液组分对低值(26)样本的洗脱效果有统计学意义(P=0.033),其中以含0.5‰Tween20的PBS对样本洗脱的影响更为显著(P=0.02,P=0.004);洗脱时间对中值(24)与低值(26)样本均有显著影响(P=0.00,P=0.00),其中4小时和6小时为显著差异分界点。670份临床已知样本的检测应用中,试剂盒现成Cutoff值计算判定阳性样本时,存在2.63%的假阳性,无假阴性。结论用于DBS中HIV抗体最佳洗脱条件为:用300μL含有0.5‰Tween20的PBS在室温下(24±2℃)洗脱4~6小时。试剂盒Cutoff值不适用于DBS样本结果判定,需进一步研究设定用于该方法的Cutoff值。     

HIV-1新发感染实验室检测能力的评估

目的评估各实验室利用限制性抗原亲和力酶联免疫试验(LAg-Avidity EIA)检测1型艾滋病病毒(HIV-1)新发感染的能力,提高我国HIV-1新发感染实验室检测的准确性。方法按照GB/T 27043-2012、CNASGL02:2014、CNAS-GL03:2015文件,选择8份临床样本,制备能力验证质控品并进行均一性和稳定性检验,分发给各实验室,组织实验室能力验证和进行结果分析。结果能力验证质控品均一性分析表明,各组质控品的CV值15%,单因素方差分析质控品无统计学差异;稳定性检验结果,各组质控品室温放置一周后,检测结果与均一性结果经t检验无差异。此次制备的能力验证样本均一性和稳定性良好,满足能力验证要求。参加能力验证的35家实验室,均按期回报结果,34家试剂盒内控有效,检测结果有效率97.14%;31家能够正确判定8支能力验证样品的感染状态,满意率88.57%,4家实验室误判1例样本;在正确判定能力验证样本的实验室中,有4家实验室各存在1例离群的ODn值。结论参加能力验证的多数实验室可以准确完成新发感染检测,但检测中仍存在一些问题,应加强对相关实验室的培训,提高各实验室HIV-1新发感染检测能力。     

HIV-1 CRF01-AE、CRF07/08-BC和B′构造病毒株体外适应性比较

目的构建NL4-3env-EGFP/DsRed2前病毒,观察中国主要流行的HIV-1 CRF01-AE?CRF07/08-BC和B′亚型构造病毒株体外适应性。方法 5份HIV-1B′,CRF07/08-BC,CRF01-AE亚型感染的干血斑样本和1份Zambia C亚型PBMC DNA样本,经单基因组扩增技术获得env全长基因,克隆、亚克隆、转染等步骤构建14个NL4-3env-EGFP/DsRed2前病毒,按顺序进行配对竞争实验,流式细胞仪定量检测被感染细胞的数量。结果 CRF01-AE亚型前病毒适应性最强,适应性值W1,其次为B′,Zambia C,CRF07-BC/CRF08-BC,P0.05。结论可利用NL4-3env-EGFP/DsRed2构造前病毒,通过竞争实验比较流行病毒株的体外适应性,推测env基因对适应性的影响。     

HIV-2感染的实验室检测与诊断

本文综述了国内外2型艾滋病病毒(HIV-2)感染的实验室检测与诊断,简介了美国HIV-2核酸检测临床应用,表明HIV-2核酸检测不仅能有效排除临床上很多不确定结果,还能有效解决抗原抗体检测中的假反应性和漏检问题.HIV-2核酸定量检测不仅是检测与治疗监测的重要手段,同时能够为临床提供HIV-2感染诊断依据.国内目前尚缺...     

HIV-1基因型耐药检测能力验证考核品的制备和评估

目的制备人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)基因型耐药检测能力验证考核品,并对其均匀性和稳定性进行评估。方法选取前期检测出的5个HIV-1阳性血浆样本,其中4个具有不同耐药位点,1个对药物敏感,提取HIV-1病毒RNA,经逆转录PCR和巢式PCR获得3 100bp的pol区基因;将目的基因与pMDTM19-T载体连接后进行基因克隆,从阳性菌液中提取回收重组质粒并测序鉴定,最后评估考核品的均匀性和稳定性。结果 5个目的基因扩增测序均成功,与载体连接后得到重组载体V1、V2、V3、V4、V5,梯度退火荧光PCR结果显示考核品退火温度为64.1℃;质粒稀释倍数≤10 000时,各个样本做荧光PCR的Ct值均小于30,因此,将每种质粒稀释10 000倍分装制成考核品;选择浓度不同的3个样本V1、V2和V3分别做均匀性检测,3组Ct值差异均无统计学意义(P>0.05),该考核品均匀性良好;选择V1、V2、V3做稳定性检测,结果显示该考核品至少可以在室温和4℃稳定保存20d,在-20℃和-80℃保存反复冻存5次后浓度均未发生明显变化,表明该考核品稳定性较好。结论本研究中用克隆载体制备的HIV-1基因型耐药检测能力验证考核品均匀性稳定性良好,是一种经济便捷的HIV-1基因型耐药检测考核品制备方法 。     

第四代HIV抗原抗体酶联检测试剂缩短HIV检测窗口期的研究

目的比较几种国内市售第4代和第3代HIV检测试剂盒检测HIV早期感染的能力。方法使用8套BBI公司HIV阳转血清盘（PRB924、930、940、942、943、944、946、948）和2套国家艾滋病参比实验室HIV阳转血清盘（2004XJ1727、20505217），分别用1种HIV抗原检测试剂盒、2种第4代HIV检测试剂盒和4种第3代HIV抗体检测试剂盒进行检测，分析它们对HIV早期感染的检出情况。结果在每套血清盘中，第4代试剂盒都比第3代试剂盒较早检出HIV感染，窗口期平均提前4～8d，但与抗原检测试剂盒相比要滞后2～4d。不同品牌试剂盒的检测能力有别。结论第4代HIV试剂盒可以缩短HIV检测的窗口期，对于诊断早期感染、保证血液安全等具有一定意义。