中药热毒清抗单纯疱疹病毒、巨细胞病毒、柯萨奇病毒的实验研究

采用组织培养技术测定了中药热毒清在不同的细胞内对单纯疱疹病毒（ＨＳＶ－Ⅰ）、巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）、柯萨奇病毒Ｂ （ＣＯＸＢ３） 的抑制作用。结果表明５ ｇ／Ｌ浓度的热毒清能有效抑制ＨＳＶ－Ⅰ在Ｖｅｒｏ 细胞内繁殖, ２０ ｇ／Ｌ的热毒清能有效抑制ＨＣＭＶ 在人胚肺纤维母细胞内繁殖, 两者的治疗指数 （ＴＩ） ＝ ４。但５ ｇ／Ｌ浓度的热毒清未能抑制ＣＯＸＢ３在Ｖｅｒｏ 细胞内繁殖, 其ＴＩ＜ １。动物实验结果表明, 昆明种小鼠体内给４ ｇ／ （ｋｇ·ｄ） 的热毒清能抑制ＨＳＶ－Ⅰ在小鼠体内增殖, 对病毒的抑制率为６０     

联用单磷酸阿糖腺苷和病毒唑抑制呼吸道合胞病毒的作用

目的 研究联用单磷酸阿糖腺苷（Ara-AMP)和病毒唑对呼吸道合胞病毒（RSV）的抑制作用。方法 用细胞培养法,采用Vero细胞先感染病毒2h后给药法观察细胞病变（CPE）。结果 当Ara-AMP和病毒唑均以100μg/ml联用时,对RSV的抑制呈最大协同作用,当两者均以3．125μg/ml联用时,表现出最小协同作用,两药联用的治疗指数（TI）为32,部分抑制浓度（FIC）值为0．25,小于0．75。结论 联用Ara-AMP和病毒唑对RSV的抑制呈显著协同作用。     

腺苷酸转位酶诱导自身免疫性心肌病小鼠的异常T细胞受体信号通路

目的：通过研究T细胞信号分子的表达, 探讨自身免疫性扩张型心肌病发生的分子机制。 方法： 以线粒体腺苷酸转位酶（ANT）合成肽免疫液免疫Balb/c小鼠，建立自身免疫性扩张型心肌病动物模型（DCM组），运用实时荧光定量PCR法检测其T细胞内P56lck的表达, 流式细胞术检测其Th细胞内IFN-γ和IL-4的含量, ELISA法检测其血清抗ANT自身抗体水平, 免疫组化法观察其T细胞表面CD45的表达。以不含ANT合成肽免疫液免疫小鼠作为对照组（control），试验期6个月。 结果： DCM组小鼠P56lck的基因表达(1 369.51±874.05 vs 47.93±10.21, P<0.01)、IFN-γ和IL-4的百分含量(尤其是IL-4)（8.27±1.29 vs 5.58±0.59, P<0.01; 9.93±1.53 vs 2.05±0.21, P<0.01）、抗ANT自身抗体的水平（0.105±0.015 vs 0.006±0.002, P<0.01）、CD45的表达强度(0.154±0.021 vs 0.026±0.008, P<0.01)均明显高于对照组。 结论： 异常的T细胞受体信号转导通路在ANT肽诱导扩张型心肌病发生中起着重要作用。     

抗CD4单抗干预实验鼠自身免疫性心肌病的T细胞信号转导机制(英文)

目的：探讨抗L3T4单克隆抗体对BALB/c小鼠实验性自身免疫性心肌病的治疗作用及T细胞信号转导机制。方法：以ADP/ATP载体肽免疫小鼠建立自身免疫性心肌病模型。3个月后，向小鼠体内注入抗L3T4单抗，以清除CD4+T细胞，并以无关抗体为对照。通过实时荧光定量PCR检测小鼠T细胞中信号分子（p56lck、p59fyn和Zap-70）和细胞因子（IFN-γ、IL-2和IL-4）的表达；通过免疫组化技术分析各组小鼠T细胞内CD45的表达。结果：给予抗L3T4单抗治疗的DCM小鼠T细胞内信号分子（p56lck、p59fyn和Zap-70）和细胞因子（IFN-γ、IL-2和IL-4）表达均减少，CD45的表达也明显减少。相反，以无关抗体免疫小鼠并不能对其产生保护作用，T细胞信号分子、CD45和细胞因子的表达也不被抑制。结论：抗L3T4单抗可以抑制ADP/ATP载体肽诱导的小鼠DCM过程中的T细胞信号分子和细胞因子的表达，可能起到治疗作用。     

不同阶段应用抗L3T4单抗干预治疗对心肌病小鼠细胞因子的影响

目的： 研究不同阶段应用抗L3T4单抗对心肌病小鼠Th1/Th2亚群及血清和心肌组织中细胞因子的影响，探讨抗L3T4单抗治疗自身免疫性心肌病的机制。方法: 用含有人线粒体ADP/ATP载体肽的免疫液免疫近交系BALB/c小鼠建立类扩张型心肌病模型（心肌病组）；以不含肽免疫液免疫小鼠作为对照组；在用ADP/ATP载体肽免疫小鼠的前1 d连续3 d以400 μg抗L3T4单抗免疫小鼠获得早期治疗组；心肌病组小鼠于第4个月初始连续3 d给予抗L3T4单抗治疗获得中期治疗组，单抗使用方法同早期治疗组。运用3色荧光标记流式细胞术检测小鼠脾脏中Th1/Th2的百分含量；以ELISA法检测其血清中IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6和TNF-α水平；实时荧光定量PCR法检测其心肌细胞因子基因表达。 结果: 早期治疗组Th1及Th2亚群明显低于心肌病组；中期治疗组Th1相关细胞因子水平高于心肌病组，Th2水平介于心肌病组和早期治疗组之间。早期治疗组IFN-γ和IL-6与对照组相近，IL-2和TNF-α均高于对照组和心肌病组，IL-4介于前两组之间且与它们均有显著差异；中期治疗组IFN-γ和IL-2水平介于对照组和心肌病组之间，IL-6和IL-4明显低于心肌病组。 结论: 不同阶段应用抗L3T4单抗能够阻断或减轻系统性和局部细胞因子的生成，早期治疗较中期治疗对细胞因子的抑制作用更显著。     

慢性乙型肝炎抗病毒治疗的研究进展

抗病毒治疗是慢性病毒性乙型肝炎治疗的核心问题之一。本文就慢性病毒性乙型肝炎抗病毒药物的研究进展、联合治疗的现状以及目前抗病毒治疗存在的问题和可能的对策作一综述。     

Experimental Study on AT1-receptor-peptide-induced Myocardial Immune Damage in Rat

The role of autoimmune reaction has more andmore drawn attention in cardiovascular diseases.Itisautoantibodies,against G- protein- coupled cardiovas-cular receptors such as M2 - muscarinic andβ1 - adren-ergic receptors and against ADP/ATP carrier,thatplay an important role in dilated cardiomyopathy( DCM) ,displaying non- desensitized agonist- like ac-tivity[1— 4 ] .There is a lot of research evidence thatimmune alterationscan contribute to the pathogenesisof hypertension[5] .Autoantibodi…     

中国人Uroplakin Ⅱ基因的克隆及其真核表达载体构建

目的 克隆中国人UroplakinⅡ基因并构建其真核表达载体。方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法从1例GⅢ/T_3N_0M_0膀胱移行上皮癌(TCC)标本中扩增UroplakinⅡ全长cDNA后进行核酸序列分析,并构建其真核表达载体;重组子瞬时转染UroplakinⅡ基因缺陷型TCC EJ细胞株72h后,RT-PCR法检测癌细胞UroplakinⅡ表达水平。结果 成功克隆了中国人UroplakinⅡ全长cDNA(555 bp),与国外报道的序列同源性高达100％。真核表达载体pcDNA-UPⅡ转染EJ细胞后,癌细胞UroplakinⅡmRNA水平显著增高(P<0.01)。结论 从中国人TCC组织中克隆出UroplakinⅡ基因,为深入研究UroplakinⅡ基因在TCC生物学行为中的作用及其靶向生物治疗策略奠定了基础。     

黄芪对病毒性心肌炎心脏细胞因子mRNA表达的影响

目的 :研究黄芪治疗病毒性心肌炎 (VMC)对心脏组织白细胞介素 2 (IL 2 )mRNA、肿瘤坏死因子 α(TNF α)mRNA及白细胞介素 10 (IL 10 )mRNA表达的影响 ,探讨其治疗VMC的免疫调节作用机制。方法 :6 0只小鼠随机分成 4组 ,其中黄芪治疗组以黄芪口服液灌胃 ,0 .2ml/次 ,2次 /d ,共 10d。采用半定量RT PCR方法检测所有存活小鼠心脏组织中细胞因子mRNA表达情况。结果 :与病毒对照组比较 ,应用黄芪治疗后 ,VMC小鼠心脏组织中IL 2mRNA与TNF αmRNA表达下降 (P <0 .0 5 ) ,而IL 10mRNA表达则升高 (P <0 .0 5 )。结论 :黄芪通过改变细胞因子在心脏组织的表达而发挥其治疗VMC的有益的免疫调节作用。     

Analysis of Specific Th1/Th2 Helper Cell Responses and IgG Subtype Antibodies in Anti-CD4 Monoclonal Antibody Treated Mice with Autoimmune Cardiomyopathy

The cytokine repertoire of ADP/ATP carrier-specific humoral immune responses and the cytokine-dependent anti-ADP/ATP carrier antibody IgG subclasses were examined in a cohort of ADP/ATP carrier-immunized BALB/c mice treated with anti-CD4 monoclonal antibody. Eighteen male BALB/c mice （6–8 weeks old） were randomized into 3 groups： dilated cardiomyopathy （DCM） group, DCM-tolerance （Tol） group and control group. The mice in DCM group were immunized with the peptides derived from human ADP/ATP carrier protein for 6 months and mice in the control group were sham-immunized, while the mice in DCM-Tol group were immunized with ADP/ATP carrier protein and anti-CD4 McAb simultaneously. Serum autoantibody against ADP/ATP carrier and IgG subclasses were measured by ELISA, intracellular cytokines IFN-γ and IL-4 of Th cells were moni- tored with flow cytometry, and splenic T cell cytokines IFN-γ, IL-2, IL-4 and IL-6 were detected by using real-time fluorescent quantitative PCR. The results showed that the autoantibody against ADP/ATP carrier was found in all mice in DCM group, and the antibody level, serum IgG1 and IgG2a subclasses, cytokines in T cells and Th cells were all elevated in DCM group, as compared with those in control group （P〈0.01）. On the other hand, in DCM-Tol group, the autoantibody level and contents of all the cytokines were significantly different from those in DCM group （P〈0.01）, and were close to those in control group. And the levels of IgG1, IgG2a, IgG2b and IgG3 were influenced, to varying degrees, by anti-CD4 McAb as compared with those in DCM group. All these four types of IgG subclasses were substantially decreased in DCM-Tol group as compared with DCM group. It is concluded that the treatment with anti-CD4 McAb could prevent the activation of T cells, reverse the abnormal secretion of cytokines and the imbalance between Th1/Th2 cell subsets and abnormal production of autoantibody against ADP/ATP carrier, and eventually avoid myocardial injuries.