过表达FAF1基因慢病毒构建及对人胃癌细胞凋亡影响

目的：构建过表达FAs相关因子1（fas-associatedfactorl,FAF1）基因的慢病毒载体,探讨其对胃癌细胞凋亡的影响。方法：RT-PCR法扩增FAF1cDNA,亚克隆至GV218质粒中,经酶切及DNA测序鉴定正确以后,把含有FAF1基因的重组质粒与pHelper1．0和pHelper2．0载体质粒转染至293T细胞包装慢病毒。用包装好的慢病毒感染人胃癌细胞HGD27,RealtimePCR和蛋白质印迹法检测转染前后FAF1基因和蛋白的表达,流式细胞仪检测细胞凋亡的改变。结果：FAF1基因扩增产物长度为1996bp,酶切及测序结果鉴定GV218-FAF1质粒构建正确,成功包装的慢病毒滴度为2×10^8TU／mL。HGC-27细胞转染FAF1过表达慢病毒48h后,细胞形态由长梭形变得不规则。过表达FAF1慢病毒转染组FAF1基因mRNA表达水平2．436±0．538,是阴性对照组1．086±0．226的2．24倍,P〈0．001;是空载转染组1．182±0．381的2．06倍,P〈0．001。过表达FAF1慢病毒转染组FAF1蛋白相对表达水平1.515±0．377,显著高于阴性对照组的0,P〈0．001;也显著高于空载转染组的0,P〈0．001。过表达FAF1慢病毒转染组凋亡率（84．66±5．92）％显著高于阴性对照组的（4．60±3．80）％,P〈0．001;也显著高于空载转染组的（7．32±3．82）％,P〈0．001。结论：成功构建并鉴定FAF1基因过表达慢病毒载体,FAF1基因表达上调使胃癌细胞凋亡增加。     

联合检测血清GP73和AFP对原发性肝癌诊断价值的探讨

目的:探讨血清高尔基体糖蛋白(GP73)对原发性肝癌的诊断价值,分析GP73和甲胎蛋白(AFP)联合检测对原发性肝癌诊断的临床意义。方法:应用双抗体夹心酶联免疫定量测定方法,检测144例原发性肝细胞癌、50例肝硬化、100例乙型肝炎、50例其他恶性肿瘤、26例肝良性肿瘤、84例HBV携带者和50名健康体检者血清中GP73的浓度,应用临床电化学发光法测定AFP作为参照。结果:原发性肝细胞癌患者血清GP73水平明显高于肝硬化、乙型肝炎、其他恶性肿瘤、肝良性肿瘤、HBV携带者和正常人对照组,P<0.05。通过ROC曲线设定GP73浓度,GP73为64ng/mL作为肝癌诊断的临界值切点(cut-off)时,GP73检测原发性肝细胞癌的敏感度和特异度达到最高,分别为83.3%和88.3%。在原发性肝细胞癌组,GP73诊断肝癌的敏感度和特异度与AFP比较差异有统计学意义(83.3%vs 72.2%,88.3%vs 76.7%),P<0.05;GP73+AFP联合检测可使敏感性提高到94.4%,特异性为65.6%。结论:GP73诊断原发性肝细胞癌有较好的敏感性和特异性,而GP73与AFP联合检测的敏感性比单项检测均高。联合检测血清中的GP73和AFP可提高原发性肝细胞癌的诊断价值。     

原发性肝癌REIC/Dkk-3基因mRNA低表达及其意义

原发性肝细胞癌是我国常见的恶性肿瘤之一，病死率很高。Tsuji等从几种永生细胞系中发现一段新的REIC／Dkk-3基因序列表达明显下调，而在正常细胞系中表达正常，提示REIC／Dkk-3可能是一种新的抑癌基因。为探讨REIC／Dkk-3基因表达与人肝细胞癌的关系，本研究应用荧光定量逆转录聚合酶链反应（FQ—RT—PCR）对肝细胞癌癌灶及癌旁组织中REIC／Dkk-3基因mRNA的表达进行了定量检测，以探讨REIC／Dkk-3基因与肝癌发生发展、病理分型及肿瘤生物学行为之间的关系。     

新型复方含氯消毒剂安全性毒理实验的观察

目的为确保新型复方含氯消毒剂安全性 ,进行相应的毒理学评价。方法采用小鼠急性经口和吸入毒性试验 ,家兔完整和破损皮肤刺激试验 ,家兔急性眼刺激试验 ,小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验。结果小鼠急性口服LD50>5000mg/kgBW和吸入LC502h>10000mg/m3,消毒剂应用液的5倍浓度对家兔完整和破损皮肤、眼睛均属无刺激性。小鼠骨髓微核试验结果为阴性 ,PCE/NCE>1。结论该消毒剂在一定条件使用对人是安全的     

大肠癌端粒酶活性的意义及其与人端粒酶催化亚基表达的相关性

目的 :研究大肠癌组织中端粒酶活性在大肠癌发生发展中的作用及其与人端粒酶催化亚基 (h TERT)表达的相关性。方法 :运用 PCR- TRAP- EL ISA及免疫组织化学方法 (免疫组化法 )对 30例大肠癌及相应的癌旁组织、正常大肠组织及 2 0例大肠腺瘤性息肉组织中端粒酶活性和 h TERT表达进行检测。结果 :1端粒酶在大肠癌组织中的阳性表达明显高于癌旁组织、正常大肠黏膜及大肠腺瘤性息肉 (P<0 .0 5 ) ;2大肠癌组织端粒酶与淋巴结转移关系密切 ,伴淋巴结转移大肠癌端粒酶阳性表达率明显高于无淋巴结转移者 (P <0 .0 1 ) ;3相关分析显示端粒酶活性与 h TERT表达存在相关性 (P <0 .0 5 )。结论 :端粒酶在大肠癌的发生发展过程中可能起着重要作用 ,h TERT的表达与端粒酶活性密切相关     

大肠癌与端粒酶活性相关性的研究

目的　探讨端粒酶活性在大肠癌发生、发展以及浸润转移中的意义。方法　应用端粒重复扩增 (TRAP)及免疫组织化学法对 30例大肠癌、癌旁组织、正常大肠组织及 2 0例大肠腺瘤性息肉组织端粒酶活性、端粒酶催化亚基蛋白 (hTERT)的表达进行检测。结果　端粒酶活性在癌组织中检出率明显高于其他组织 (P <0 .0 5) ;大肠癌组织端粒酶活性与淋巴结是否有转移之间关系密切 ,伴淋巴结转移大肠癌端粒酶阳性表达率明显高于无淋巴结转移者 (P <0 .0 5)。结论　端粒酶活性与大肠癌的发生发展以及浸润转移密切相关 ,检测端粒酶活性对临床预测大肠癌淋巴结转移趋势、评价恶性程度和判断预后均有重要意义     

负载肿瘤抗原的树突状细胞疫苗诱导CTL的抗肿瘤效应

目的:探讨负载肿瘤抗原的树突状细胞(DC)疫苗诱导的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的体外杀瘤作用及对荷瘤小鼠的治疗作用.方法:体外培养的小鼠骨髓树突状细胞用小鼠结肠腺癌细胞株CT26细胞抗原冲击致敏制备负载肿瘤抗原的DC疫苗;负载肿瘤抗原的DC疫苗激活同源T淋巴细胞产生细胞毒性T淋巴细胞(CTL),采用乳酸脱氢酶(LDH) 4 h释放法检测CTL在体外对CT26细胞的杀伤活性;建立CT26荷瘤小鼠模型,应用CTL治疗荷瘤小鼠,观察肿瘤大小和小鼠存活期.结果:负载CT26肿瘤抗原的DC疫苗能够诱导T细胞增殖分化为肿瘤特异CTL,该CTL对CT26细胞有高效而强烈的杀伤作用,杀伤率为(83.95±11.25)%,而对B16细胞、3LL Lewis 细胞无明显杀伤作用,杀伤率分别为(12.75±5.36)%和(11.38±4.57)%.应用CTL治疗荷瘤小鼠能显著抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长,延长荷瘤小鼠存活期.结论:负载肿瘤抗原的DC疫苗能够诱导高效而特异的CTL杀瘤活性并能治疗荷瘤小鼠.提示负载肿瘤抗原的DC疫苗诱导的CTL可能在肿瘤的免疫治疗中发挥重要作用.     

探讨如何培养创新型的医学生

创新是一个国家进步的动力。创新的重要性已被广泛认识,我国及其他许多国家已把国家的创新能力提高到重要战略位置来考虑[1,2]。一个国家的未来,它在世界上的社会和经济地位,将很大程度取决于它的创新能力。在创新能力处于世界领先位置的美国,极为重视保持住这一优势。认为创新能力的下降,将会丧失它的环球经济领导地位,降低美国人民的生活水平[3]。一个国家的创新能力由两个关键的方面的组成,一个是具有创新能力的人才,一个是具有激发创新能力的环境。无疑,创新型人才的培养,大学是一个主要的培养场所。创新教育一直以来就是素质教育的重要组成部分,加强大学生创新能力和综合素质教育,就是为了培养高层次的创新型人才。在深化教育改革,全面推进素质教育的过程中,突出学生创新能力的培养,积极探索培养高素质创新型人才的途径和方法,具有重要的现实意义。1培养大学生创新性的重要性和必要性2001年6月,中共中央、国务院颁布了《关于深化教育改革全面推进素质教育的决定》以后,素质教育更是被逐渐提升为党和国家的重大决策。中国经济和社会的发展已到了一个新的阶段,以往以资源消耗型、劳动密集型为主的生产企业,已逐渐丧失优势。要想保持我国经济的增长和繁荣,提高人民...     

早期胃癌的内镜诊断及治疗进展

早期胃癌的内镜诊断及治疗进展葛莲英（广西医科大学附属肿瘤医院内镜室南宁５３００２１）早期胃癌是指癌细胞浸润局限于胃粘膜下层，而不管其浸润范围及有否淋巴结转移。近几年来，由于内镜的发展和普及，使得早期胃癌的发现率愈来愈高，有的国家甚至高达５０％［１］。...     

人胃癌组织FAF1 mRNA和蛋白表达研究

目的:探讨FAF1表达在人胃癌发生发展中的作用。方法:应用实时荧光定量PCR(FQ-RT-PCR)和免疫组化方法,对40例胃癌患者癌组织、癌旁组织及相对正常组织中FAF1mRNA和蛋白的表达进行分析。结果:FAF1mRNA在胃癌组织中的表达水平(0.27±0.12),明显低于在癌旁组织(0.40±0.06)及正常组织(0.48±0.08)中的表达水平(P<0.01),而在癌旁组织中的表达水平明显低于正常组织中的表达水平(P<0.01)。胃癌组织的FAF1蛋白的阳性表达率(37.50%)明显低于癌旁组织(62.50%,P<0.05)和正常组织(72.50%,P<0.01)。结论:FAF1表达的减少在胃癌的发生发展过程中起着重要作用。