鼠艾滋病模型血浆病毒载量荧光定量PCR检测方法的建立

目的建立鼠艾滋病模型血浆病毒载量荧光定量聚合酶链（PCR）检测方法。方法将体外合成的鼠艾滋病病毒（FLV）核糖核酸（RNA）标准品稀释为10个浓度梯度，进行逆转录，PCR荧光定量检测，经批内与批间差异分析。再以PCR荧光定量检测不同倍数FLV脾悬液FLV拷贝数及相应被注射小鼠模型的血浆病毒载量，计算脾指数。结果研究设计的荧光定量PCR方法能检测到20—2×10^8copiesFLVRNA逆转录反应体系，在5个注射的FLV拷贝数范围内，血浆病毒载量与脾指数均不与初始注射的FLV拷贝数成正比，二者亦不呈现平行关系。结论研究采用的FLV荧光定量PCR方法敏感性好，特异性强，重现性好，显著提高FLV病毒的检测水平。     

鼠艾滋病病毒荧光定量PCR标准品RNA的构建

目的合成构建鼠艾滋病病毒(FLV)荧光定量检测标准品,明确核糖核酸(RNA)标准品体外合成的基本原则。方法通过序列对比,找到FLV最为保守的区段作为RNA标准品的合成目标,进行逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增,克隆于T载体,测序,设计带有T7启动子的引物,PCR扩增,将所得的PCR产物凝胶回收纯化,用T7RNA聚合酶进行体外合成RNA,最后用PCR和电泳检测验证。结果成功合成了FLV荧光定量PCR标准品。结论FLV荧光定量标准品的成功合成必须遵守以下4条基本原则:①选择保守序列;②设计引物时将潜在的终止密码或起始密码排除在PCR目标产物之外;③将启动子(如T7启动子)挂在适当的引物上,保证所合成的RNA模板与所要定量检测的RNA模板一致,而不是互补;④合成RNA后必须检测,以保证不含其他RNA或者未消化完的DNA。     

SIV感染CEM×174细胞后CTLA-4、FOXP3、ID OmRNA的变化

目的观察SIV感染CEM×174细胞后CTLA-4、FOXP3、IDOmRNA表达水平的动态变化。方法以SIVmac251感染接种CEM×174细胞,收集感染后12h-216h共8个时间点及正常未感染细胞,提取细胞RNA,进行RNA逆转录荧光定量PCR检测。结果随着SIVmRNA的升高,CTLA-4、FOXP3、IDO三者mRNA均显著升高;SIVmRNA、CTLA-4mRNA到观察结束时（216h）达到最高值,而FOXP3、IDO则是在168h时mRNA达到最高值,在216h时有所回落。结论被SIV感染的细胞中部分促进免疫激活和抑制免疫的免疫调节因子表达均显著升高,提示免疫紊乱是AIDS的一个重要发病机制。     

鼠艾滋病病毒荧光定量PCR标准品RNA的构建

目的合成构建鼠艾滋病病毒（FLV）荧光定量检测标准品,明确核糖核酸（RNA）标准品体外合成的基本原则。方法通过序列对比,找到FLV最为保守的区段作为RNA标准品的合成目标,进行逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）扩增,克隆于T载体,测序,设计带有T7启动子的引物,PCR扩增,将所得的PCR产物凝胶回收纯化,用T7RNA聚合酶进行体外合成RNA,最后用PCR和电泳检测验证。结果成功合成了FLV荧光定量PCR标准品。结论FLV荧光定量标准品的成功合成必须遵守以下4条基本原则：①选择保守序列;②设计引物时将潜在的终止密码或起始密码排除在PCR目标产物之外;③将启动子（如T7启动子）挂在适当的引物上,保证所合成的RNA模板与所要定量检测的RNA模板一致,而不是互补;④合成RNA后必须检测,以保证不含其他RNA或者未消化完的DNA。     

第四届世界中西医结合大会在天津召开

第四届世界中西医结合大会于2012年10月20～22日在天津召开。大会由中国中西医结合学会主办,天津市中西医结合研究院、天津市中西医结合学会和天津市中西医结合医院(南开医院)联合承办,支持单位包括中国科学技术协会、国家中医药管理局、天津医科大学、天津中医药大学、天津市中医药研究院和天士力医药集团有限公司等。