改良左旋支结扎法微创小型猪急性心肌梗死模型建立与评估

目的 应用改良的左冠状动脉回旋支结扎方法联合微创手术,制备小型猪急性心肌梗死模型,评估其有效性和稳定性,并探讨其在科研应用中的意义。方法 选择3月龄巴马香猪25头,麻醉下行气管插管呼吸机辅助通气,微创开胸结扎左旋支中段,建立急性心肌梗死模型。并于术前、术后1 h、4周行心脏超声评估模型动物的心脏功能,术后4周处死动物,取心脏行TTC染色评估梗死面积及病理变化,统计死亡率和死亡原因。结果 结扎术后1 h和4周后心脏功能较术前均明显降低,EF值由（64.2±4.6）%分别降至（48.2±5.3）%和（49.7±6.1）%（P<0.01）,左心室侧壁室壁厚度变薄,胶原增生。梗死后1 h室颤率17.3%,梗死面积为（19.2±3）%。结论 应用改良的左冠状动脉回旋支结扎方法联合微创手术能够建立稳定的猪心肌梗死模型,具有手术创伤小、模型稳定和死亡率低等特点,为相关研究提供了经济、理想的动物模型。     

T细胞亚群在心室重构中的作用研究进展

心室重构是多种心脏疾病最终进展为心力衰竭的主要原因。大量研究表明炎症反应在心室重构的发生和发展中发挥重要作用。最近的研究发现T细胞介导的慢性炎症反应与心室重构的发生密切相关。本文主要对T淋巴细胞亚群在心室重构中作用研究进展进行综述。     

吸入和静脉应用盐酸戊乙奎醚对油酸诱导大鼠急性肺损伤的影响

目的观察雾化吸入和静脉应用盐酸戊乙奎醚对油酸诱导大鼠急性肺损伤(ALI)的影响。方法采用静脉注射油酸复制ALI大鼠模型。将40只SD大鼠随机均分为四组:空白对照组(Ⅰ组)、ALI组(Ⅱ组)、盐酸戊乙奎醚雾化吸入组(Ⅲ组)和盐酸戊乙奎醚静脉注射组(Ⅳ组)。每隔60分钟记录大鼠BP、肺动脉压(PAP),并检验动脉及混合静脉血气。注射油酸240min后检测支气管肺泡灌洗液(BALF)蛋白定量、肺髓过氧化物酶(MPO)活性。结果Ⅲ、Ⅳ组较之Ⅱ组能够缓解由注射油酸引起的PAP升高和PaO2/FiO2下降,Ⅲ组缓解更为明显(P<0.05)。Ⅲ、Ⅳ组BALF蛋白定量、白细胞计数和肺MPO活性均比Ⅱ组降低,Ⅲ组降低更为明显(P<0.05)。结论盐酸戊乙奎醚雾化吸入较静脉注射更能缓解油酸引起的ALI。     

膦甲酸钠联合贺普丁抗病毒治疗慢性乙型肝炎临床观察

目的：观察膦甲酸钠（可耐）及其与贺普丁联合抗病毒治疗慢性乙肝的疗效。方法：选择慢性乙型肝炎（CHB）130例，其中可耐、贺普丁组各50例，可耐和贺普丁联合治疗组30例。用药方法为可耐组：可耐2．4g 5%葡萄糖150ml静脉点滴，每天2次，共2周，然后用5％葡萄糖150ml 可耐2．4g静脉点滴，每天1次，共4周，总疗程42d；贺普丁组：贺普丁0．1g，每天1次，疗程1年；联合治疗组；先用可耐42d，方法同可耐组，然后用贺普丁0．1g，每天1次，疗程1年。结束后随访12个月。结果：（1）3组ALT均有明显下降，联合治疗组治疗9，12个月时与可耐、贺普丁单用组比较，ALT下降明显（P＜0．001）。（2）HBeAg阴转率可耐组和联合治疗组优于贺普丁组。而联合治疗组在治疗9，12个月时HBeAg阴转率更高（50％），与贺普丁单用组比较，P＜0．01,只是 与可耐组比较无统计学意义（P＞0．05）。（3）HBV DNA阴转率贺普丁组与联合组相似（P＞0．05），而明显优于可耐组（P＜0．001）。结果：膦甲酸钠具有较好的抑制乙型肝炎病毒复制的效果及改善肝功能的作用，与贺普丁联合应用有互补作用，提高CHB抗病毒治疗的效果，为临床CHB抗病毒治疗提供了新的方法。     

大鼠肺移植后闭塞性细支气管炎模型的改进

肺移植已成为终末期肺疾病唯一有效的治疗方法,但是闭塞性细支气管炎(OB)却是肺移植后长期存活的主要障碍[1].目前用于OB研究的大鼠动物模型主要是采用同种异体气管腹腔大网膜包埋或皮下移植的方法.我们对原有动物模型的制作方法加以改进,采用大鼠同种异体气管原位移植,建立了一种更接近临床的OB实验模型.     

可植入式心室辅助装置动物模型的建立

目的研究频谱水泡浴加饮用对小鼠免疫功能的影响。方法SPF级雌性KM小鼠分3组,A组为小鼠频谱水泡浴45min／d加饮频谱水;B组为小鼠频谱水泡浴45min／d;对照组为小鼠自来水泡浴45min／d。实验30d后进行小鼠脾淋巴细胞转化试验、迟发型变态反应实验、血清溶血素测定、碳廓清试验、NK细胞活性测定、抗体生成细胞检测。结果小鼠脾淋巴细胞转化试验和NK细胞活性测定,A组与对照组、B组与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）;小鼠碳廓清试验,A组与B组、A组与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）;其余实验各组间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。表明频谱水泡浴加饮用、频谱水泡浴均能提高淋巴细胞的转化能力,具有提高小鼠NK细胞活性的作用：频谱水泡浴加饮用能增强小鼠单核巨噬细胞的吞噬功能。结论频谱水泡浴、频谱水泡浴加饮用均对小鼠的非特异性免疫和特异性细胞免疫反应有一定的促进作用,且频谱水泡浴加饮用比单纯的频谱水泡浴对小鼠免疫功能的增强效果更好。但对体液免及作用不明显。     

肺移植后闭塞性细支气管炎综合征的危险因素与发病机制

闭塞性细支气管炎综合征（bronchiolitis obliterans syndrome, BOS）是影响肺移植术后长期存活的最主?⒎⒅ⅲ壹忧棵庖咭种坪涂寡字瘟菩Ч患选７我浦埠蟮贾卤杖韵钢苎鬃酆险鞯幕粕婕懊庖吆头敲庖咭蛩仄舳郎掀ぁ⑾赴饣省⑿律芗傲馨凸芟低车慕行运鹕擞胍斐Ｔ錾厮埽纬啥裥匝贰Ｆ渲心谠葱悦庖呤堑贾孪钢鼙杖头⒄刮狟OS的主要致病因素,但各种感染或化学损伤可能导致激活树突状细胞的危险信号释放,从而激发排斥反应。因此,降低非依赖同种异体免疫因素的风险与治疗免疫排斥同样重要。     

体外循环血浆对体外培养人脐静脉血管内皮细胞钙池操纵的钙通道电流的影响

目的探讨经体外循环（cardiopulmonary bypass,CPB）后人体炎性血浆对体外培养的人脐静脉血管内皮细胞（Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVECs）的钙池操纵的钙通道电流（store—operated Ca^2＋ currents,Isoc）的影响。方法CPB后血浆采自我科心血管外科手术患者,患者均知情同意。将已培养好的HUVECs按所加入的血浆不同分为4组,每组6例：即组Ⅰ（加入CPB刚开始0min时血浆的对照组）、组Ⅱ（加入CPB后25min的血浆）、组Ⅲ（加入CPB后50min的血浆）及组Ⅳ（加入CPB后50min含左旋精氨酸的血浆）。应用全细胞膜片钳记录技术测定并观察各组HUVECs的Isoc变化。结果在HUVECs上可记录到Isoc;当钳制电位为-100mV时,组Ⅰ-组Ⅳ中HUVECs的Isoc分别为（-302．38±35．13）pA、（-388．59±58．66）pA、（-577．04±93．69）pA及（-365．42±34．79）pA,各组比较差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）,其中组Ⅳ明显低于组Ⅲ（P〈0．01）。结论CPB后人体炎性血浆可增强血管内皮细胞的钙通道电流,左旋精氨酸可减轻此作用,这对于进一步深入研究CPB围术期血管内皮细胞钙超载的发生机制和防治具有重要意义。     

大鼠真皮成纤维细胞肌肉转录调节因子基因转染后生物学特性观察

背景：利用转基因技术诱导皮肤真皮成纤维细胞分化为特殊器官组织功能的前驱细胞具有重要意义。 目的：观察肌肉转录调节因子（myogenic determination，MyoD）基因转染对大鼠真皮成纤维细胞生物学特性的影响。 设计、时间及地点：单一样本观察，细胞基因工程学实验，于2005-01/2007-02在同济大学附属东方医院心胸外科和细胞治疗室完成。 材料：清洁级雄性SD大鼠6只，购自上海西普尔-必凯实验动物有限公司。Ⅱ型胶原蛋白酶为GIBCO公司产品，稻瘟菌素粉剂为美国Promega公司产品，慢病毒载体pLenti6/V5-DEST为Invitrogen公司产品，BrdU为美国Sigma公司产品。 方法：无菌条件下切取大鼠腹侧全层皮肤，采用200 IU/mL的Ⅱ型胶原蛋白酶在4 ℃下解离大鼠皮肤真皮组织，组织块培养法获取贴壁的真皮成纤维细胞，待生长近融合状态时传代扩增。取传至第3~6代细胞，利用携带MyoD cDNA的真核表达载体pLenti6/V5-DEST-MyoD进行转染，经终浓度为50 mg/L稻瘟菌素筛选后，挑选转基因单克隆细胞传代培养，向细胞培养液中加入10 μmol/L BrdU于37 ℃条件下孵育48 h。 主要观察指标：细胞形态学观察，免疫细胞化学染色鉴定，体外BrdU标记情况。 结果：体外分离培养的真皮成纤维细胞纯度高，形态良好，生长增殖功能正常，转染后经稻瘟菌素筛选2周即可见克隆形成。光镜下真皮成纤维细胞免疫细胞化学染色后波形蛋白呈阳性表达，转染MyoD基因后肌动蛋白亦呈阳性表达。 10 μmol/L BrdU孵育48 h的标记率> 98%，且连续传代5次后仍可检测到BrdU阳性细胞。 结论：真核表达载体成功介导MyoD基因转染体外分离培养的大鼠真皮成纤维细胞，并诱导其转化为具有潜在功能的类骨骼肌细胞，可在体外稳定生长扩增。     

体外循环围术期监测心肌肌钙蛋白T、超敏C反应蛋白、细胞因子及补体变化的临床意义

目的 探讨在体外循环（cardiopulmonary bypass，CPB）下心脏手术围术期动态检测血清心肌肌钙蛋白T（cTnT）、超敏C反应蛋白（hs-CRP）、细胞因子（CK）和补体C3、C4水平的临床意义。方法 选择20例行CPB和10例非CPB心脏手术患者．分别于术前、术后即刻、24h、48h和72h测定其血清cTnT、hs-CRP、促炎CK（TNF-α、IL-6、IL，8）和抗炎CK（IL-2、IL-10）以及补体C3、C4的水平；同时记录机械通气时间、ICU在室时间及术后住院时间。结果 对照组和CPB组术前cTnT和hs-CRP的测定结果均在正常范围内。CPB组术后即刻、24h、48h和72h各时相cTnT均显著性增高，其中以术后即刻增高最为显著（P〈0．01），术后72h以后趋于正常；hs-CRP于术后24h开始显著性增高，至72h后逐渐降低（P〈0．01）。CPB组患者血清补体C3水平在术后即刻显著低于术前水平，术后48h恢复并显著高于术前水平（P〈O．01）；血清补体C。水平在术后即刻显著低于术前水平．术后72h恢复并显著高于术前水平（P〈0．01）。CPB组患者血清TNF-α水平于术后即刻明显增加并持续到术后24h，而后逐渐下降至术后48h恢复到术前水平；血清IL-6水平在术后24h出现高峰，术后48h后降至术前水平；血清IL-8于术后即刻明显增加．术后24h达高峰，并持续到术后72h；血清IL-2水平于CPB术后即刻明显增加，于术后24h基本恢复至术前水平；血清IL-10水平亦于CPB术后即刻逐渐升高，至术后24h达峰值．在术后48h仍较高。结论 CPB围术期动态监测cTnT、hs-CRP、促炎和抗炎CK、补体C3、C4水平的变化，对加强CPB术后病人的监护具有十分重要的指导意义。