生肌调节因子和连接蛋白43基因诱导大鼠成纤维细胞分化为肌细胞实验研究

目的 探讨转染生肌调节因子(myoblast determination,MyoD)基因和连接蛋白43(Connexin,Cx43)基因的大鼠真皮成纤维细胞(dermal fibroblast,DFs)生物学功能的变化及MyoD和Cx43基因转染DFs细胞治疗心力衰竭的可行性.方法 采用Gateway技术,构建真核质粒表达载体,利用慢病毒(LV)表达系统,将大鼠MyoD cDNA和Cx43 eDNA转入大鼠成纤维细胞中,经Blasticidin筛选培养,通过RT-PCR,Western印迹法等方法检测MyoD及Cx43蛋白及mRNA表达情况,并且通过显微镜观察转染后生长情况,膜片钳技术检测离子电流变化.结果 RT-PCR,Western印迹法检测出MyoD及Cx43蛋白及相应mRNA表达,膜片钳检测到转染后钙离子电流,显微镜观察到基因转染筛选后培养1 W细胞的融合现象,并有多核肌管形成.结论 MyoD和Cx43基因转染使DFs分化为成肌细胞,为进一步研究基因治疗心力衰竭奠定基础.     

同期行肺叶切除和冠状动脉搭桥术三例报告

对肺部肿瘤合并缺血性心脏病的患者,过去多采用保守治疗,同期行肺叶切除和冠状动脉搭桥术,手术风险较大。为了探讨同时手术治疗这两种疾病的最佳方法,我们在1998年10月至2005年3月间同期施行肺叶切除和冠状动脉搭桥术4例,获得较好效果,现报告如下。     

肝素涂抹管道对内皮细胞激活的影响

目的 :观察肝素涂抹体外循环 (CPB)管道对内皮细胞激活的影响。方法 :16例双瓣膜替换术患者 ,随机分为对照组 (n =8)和肝素涂抹管道组 (n =8)。分别于麻醉后CPB前、CPB 3 0min、主动脉阻断开放后 3 0min、术后第 1天和第 2天采取患者无菌血浆 ,分别刺激培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC) ,测定人脐静脉内皮细胞上细胞间黏附分子 1(ICAM 1)的表达及其与中性粒细胞黏附率。结果 :CPB开始后不同时点血浆刺激人脐静脉内皮细胞上ICAM 1的表达明显增高 ,其中肝素涂抹管道组明显低于对照组 ,有显著性差异 (P <0 0 5 ) ;CPB复跳后 3 0min的血浆刺激人脐静脉内皮细胞后 ,与中性粒细胞的黏附率明显增加 ,而肝素涂抹管道组明显低于对照组 ,有显著性差异 (P <0 0 5 )。结论 :肝素涂抹管道可明显抑制内皮细胞的激活 ,这可能是其抗炎作用的机制之一。     

RhoA/ROCK信号通路在左心疾病致大鼠肺动脉高压模型中的作用

目的 探讨RhoA/ROCK信号通路在左心疾病相关的大鼠肺动脉高压模型中的表达水平和作用。 方法 3-4周龄健康雄性SD大鼠20只,体重90-100g,随机分为对照组（C组：n=10）、肺高压组（H组：n=10）。H组采用升主动脉固定缩窄术建造左心疾病相关肺动脉高压大鼠模型,C组大鼠行假手术处理（钛夹固定于血管旁纵隔组织而非升主动脉,其他所有手术操作同H组）,在建模后60天,对各组大鼠进行血流动力学（右心室收缩压、肺动脉压力）检测,处死大鼠并用PBS行在体心肺灌洗致双肺变白,左肺组织固定于4%多聚甲醛行病理切片以观察肺组织病理形态学变化、右肺组织冻存以备生物分子学检测（Rho激酶mRNA、RhoA mRNA、ET-A 受体mRNA）。结果 与C组相比,H组肺动脉压力、右心室收缩压明显增高(P<0.01),肺小动脉壁明显增厚,肺小动脉管腔狭窄甚至闭塞,管壁肥厚指数明显增大（P<0.01）;与C组相比,H组肺组织的Rho激酶mRNA表达水平明显增加,RhoA mRNA、ET-A 受体mRNA表达水平亦明显增加,差异均有统计学意义（P<0.01）。结论 采用升主动脉固定缩窄术成功建造了左心疾病相关肺动脉高压大鼠模型;与C组相比,H组肺小血管壁明显增厚,肺组织的Rho激酶mRNA、RhoA mRNA、ET-A受体 mRNA表达明显增高,该信号通路可能参与了左心疾病相关肺动脉高压的形成过程。     

慢性乙型肝炎病毒感染不同转归组患者BCL2L11、IL7R基因拷贝数的对比分析

目的检测慢性HBV感染不同疾病进展组患者BCL2L11、IL7R基因拷贝数,研究宿主遗传背景差异与疾病进展的关系。方法选择健康对照组20例,慢性HBV携带者组18例,慢性重型肝炎组32例和原发性肝癌组18例。提取外周血基因组DNA并利用Tanqman real-time PCR方法测定BCL2L11、IL7R的拷贝数。结果四组之间BCL2L11的基因拷贝数差异有统计学意义(P<0.05),而四组之间IL7R的基因拷贝数差异无统计学意义(P>0.05)。肝癌组BCL2L11拷贝数明显低于另三组(P<0.05);重肝组、携带组与对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论不同进展程度肝损害组间BCL2L11存在基因拷贝数变异(CNVs),但这些变异不是影响其基因表达的主要因素,因此不是影响慢性HBV感染过程中肝脏炎症程度的主要因素。     

基于正念减压的五行音乐疗法对鼻咽癌病人恐惧疾病进展及失志症候群的影响

[目的]评价基于正念减压的五行音乐疗法对鼻咽癌病人恐惧疾病进展及失志症候群的应用效果。[方法]采用目的抽样的方法,选取在山东省某三级甲等综合医院住院的118例鼻咽癌病人为研究对象,采用随机数字表法确定对照组及试验组,同一组别病人安置于同一病房,试验组和对照组各59例。对照组进行常规护理,试验组接受基于正念减压的五行音乐疗法干预,比较干预前后两组病人恐惧疾病进展及失志症状水平。[结果]干预后,试验组疾病恐惧水平及失志症状水平均低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。[结论]基于正念减压的五行音乐疗法能有效降低鼻咽癌病人疾病恐惧水平及减轻失志症状,改善负性情绪,减轻心理压力。     

MSC治疗小鼠OB模型排斥反应的作用研究

目的研究间充质干细胞（MSC）免疫抑制功能在治疗小鼠闭塞性细支气管炎（OB）中的作用。方法分离C57BL/6小鼠骨髓MSC,建立小鼠气管移植后OB反应模型,移植当天给予MSC,30 d后处死小鼠,移植气管HE染色,观察移植气管急性排斥反应的发生情况。并用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测移植排斥相关炎症因子的含量。结果 MSC治疗移植组与异系移植组相比,排斥反应得到缓解,与无排斥反应的同系移植对照组相似,移植气管管腔阻塞程度缓解。移植气管ELISA检测发现,MSC治疗移植组小鼠体内炎症因子IFN-g下降,而抑炎因子白细胞介素-10（IL-10）上升。结论 MSC能缓解小鼠气管移植后OB反应,并调节体内免疫状态,抑制炎症。     

闭塞性细支气管炎模型大鼠微小RNA差异表达谱分析

背景：目前对于气管移植后并发闭塞性细支气管炎尚无有效的治疗方法。miRNA分子水平机制的治疗策略在防治器官移植后并发症方面具有重要意义。 目的：分析大鼠原位气管移植模拟肺移植后发生闭塞性细支气管炎的微小RNA 表达谱变化。 方法：通过近交系大鼠原位气管移植,模拟建立肺移植闭塞性细支气管炎的动物模型并经病理学证实;通过微小 RNA芯片筛选出供体移植气管闭塞性细支气管炎组织中显著差异表达的微小 RNA,并选取差异表达显著的miR-146a、miR-155和miR-451进行相对定量研究,应用实时定量RT-PCR（RT-qPCR）法验证芯片结果的可靠性。 结果与结论：原位气管移植后4周经病理检查证实大鼠闭塞性细支气管炎模型成功建立。microarray检测获得29个与闭塞性细支气管炎相关的微小RNA,包括15个微小RNA表达显著上调,14个微小RNA表达显著下调,其中显著上调miR-146a、miR-155和显著下调miR-451的功能涉及免疫炎症反应等。提示微小RNA在肺移植后闭塞性细支气管炎病理进程中发挥着重要的调控作用。     

心衰手术：搭桥、修复的效果不亚于心脏移植

在我们日益老龄化的社会中，医学的进步延长了人类的寿命。但心力衰竭（下文简称“心衰”）的发病率逐年增长。据统计，全球心衰的年患病率目前为1％-5％o。而在超过75岁的人群中已达到40％。。让人遗憾的是。其中大部分患者在确诊后3年内相继离开人世。可以说心衰的死亡率已与恶性肿瘤相仿。而在心外科领域。心衰外科专科的出现，各种修补、重建术式的诞生，让许多高危心衰患者从中受益。     

缺氧过程中DADLE对心肌收缩力和收缩长度的影响

目的通过建立人心室肌缺氧模型，研究DADLE[delta opioid peptide（D—Ala2，D—Leu5）enkephalin]对心肌的保护作用。方法15例标本均来自体外循环心脏手术患者的心肌组织，将其随机分成两组：组1（6例），为单纯缺氧；组2（9例），为缺氧条件下加入DADLE。实验第一步：两组均给氧，将心肌条浸浴在连续充入氧气的Tyrode’s灌注液中；第二步：组1用氮气代替氧气、组2氮气加DADLE（10nmool）代替氧气。在相应的刺激频率下测量心肌收缩力和收缩长度的变化并衡量DADLE的心肌保护作用。结果缺氧条件下无论是否给予DADLE，不同刺激频率下的心肌收缩力和心肌收缩长度都明显低于给氧状态下相应值（P〈0．05）；给氧时，如果组1、组2在15、20、30、45、60、90和120次／分刺激频率下的心肌收缩力和收缩长度为100％，缺氧时组2在相对应刺激频率下心肌收缩力和收缩长度的百分比明显高于组1，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论DADLE在缺氧过程中对心肌收缩力和收缩长度有明显的影响，对心肌有一定的保护作用。