莫诺苷对SH-SY5Y神经细胞生长的影响及对过氧化氢诱导损伤的保护

目的研究从中药山茱萸分离提取的有效成分莫诺苷对人神经母细胞瘤株SY5Y生长的影响及对H2O2诱导SH-SY5Y细胞损伤的神经保护作用。方法对培养的SH-SY5Y细胞加入不同浓度的莫诺苷,以MTT代谢率为指标确定无毒范围以及莫诺苷促进神经细胞生长的最佳有效浓度;对培养的SH-SY5Y细胞加入最佳有效浓度的莫诺苷,观察MTT代谢率、细胞轴突长度及胞体面积、细胞计数的改变;H2O2500μmol/L诱导SH-SY5Y细胞损伤,加入不同浓度的莫诺苷及维生素E,以WesternBlotting检测神经生长因子（NGF）的表达。结果莫诺苷在10～100μmol/L浓度范围内均可增加SH-SY5Y细胞的存活率;培养的SH-SY5Y细胞分别加入10μmol/L莫诺苷,与正常对照组相比,莫诺苷组组MTT代谢率升高（P〈0.05）,细胞轴突长度显著增长（P〈0.001）,胞体面积明显增加（P〈0.01）,细胞计数增加（P〈0.05）;H2O2损伤后,莫诺苷组NGF的表达明显高于对照组（P〈0.01）。结论莫诺苷对SH-SY5Y细胞的生长有促进作用,并对H2O2诱导的损伤有神经保护作用。     

山茱萸环烯醚帖苷对全脑缺血沙土鼠海马神经元凋亡相关因子的影响

目的:观察山茱萸环烯醚萜苷(CIG)对全脑缺血沙土鼠海马CA1区凋亡细胞及Bcl-2、Cas-pase-3表达的影响,探讨CIG脑保护的可能机制。方法:采用双侧颈总动脉阻断5 min的全脑缺血/再灌注沙土鼠模型。缺血1周后,采用TUNEL法检测海马CA1区的凋亡细胞,免疫组织化学法检测Bcl-2、Caspase-3的表达情况。结果:CIG灌胃给药可以明显减少缺血沙土鼠海马CA1区的凋亡细胞,抑制Caspase-3表达,增强Bcl-2表达。结论:CIG具有拮抗神经元凋亡的作用,其机制可能与增强抗凋亡基因、抑制促凋亡基因的表达有关。     

莫诺苷抑制大鼠脑缺血再灌注模型皮层脂质过氧化作用的研究

目的 研究莫诺苷对大鼠脑缺血再灌注皮层脂质过氧化作用的影响.方法 用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,缺血30 min,再灌注72 h.以维生素E(VE)为阳性对照药,采用分光光度法检测脑组织中丙二醛变化.结果 与假手术组相比,模型组丙二醛含量明显增加(P<0.01);与模型组相比,莫诺苷30 mg/kg、90 mg/kg能够降低丙二醛含量(P<0.05),莫诺苷270 mg/kg能明显降低丙二醛含量(P<0.01);VE(35 mg/kg)能显著减少丙二醛的含量(P<0.001).结论 莫诺苷能通过抑制皮层脂质过氧化水平而发挥神经保护作用.     

药物稳定动脉粥样硬化易损斑块的研究进展

动脉粥样硬化(AS)是心脑血管疾病的共同病理基础,而斑块损伤以及随之发生的血栓形成则是此类疾病致残、致死的真正元凶,如何稳定AS易损斑块一直是临床研究的热点。但目前临床用药稳定AS易损斑块的证据仍很缺乏。他汀类等多种药物虽然有效,但其副作用不容忽视。中药多环节、多靶点治疗疾病且不良反应小的特点使其在稳定AS易损斑块方面具有潜在的治疗优势。本文对药物稳定易损斑块机制的研究进展作一综述。     

专题三、脑缺血、神经损伤及其药物治疗——山茱萸有效成分莫诺苷神经保护作用及机制研究

目的：研究从山茱萸提取分离得到的化合物莫诺苷体外神经保护作用和机制。方法：大孔树脂分离、硅胶柱层析得到莫诺苷，用H2O2损伤神经SY5Y细胞培养模型研究莫诺苷神经保护作用和机制。结果：1、莫诺苷确定结构实验：MS、13^C-NMR、1^H-NMR确定莫诺苷的结构，HPLC确定莫诺苷的含量大于90％。2、莫诺苷神经保护作用及机制实验：①对正常神经SY5Y细胞的作用：     

6-羟多巴胺诱导帕金森病大鼠模型行为学评价方法的探讨

目的：复制类帕金森病（Parkinson's disease,PD）大鼠模型并根据行为学检查结果对此模型进行较为全面的评价,以建立治疗此疾病的新型实验平台。方法：运用6-羟多巴胺（6-hydroxydopamine）单点定向注射黑质-纹状体的方法,损毁SD大鼠左侧中脑多巴胺能神经元,动物术后3周腹腔注射（ip）阿扑吗啡（apomorphine,APO）观察是否诱导动物向健侧旋转行为,复制PD模型。分别应用转棒实验和旷场实验分析测定动物的运动功能,应用肌电测试实验测定大鼠的震颤频率和幅度,并据此对动物模型进行评价和分类。结果：造模后,部分大鼠转棒实验在棒时间显著缩短,旷场实验横向跨格次数减少,出现运动功能障碍;肌电检测结果显示部分大鼠肌肉震颤频率和幅度均增加。结论：行为学测试为PD动物模型的评价以及进行不同类型的分组提供了实验依据。     

帕金森病的炎症及抗炎药物的研究进展

帕金森病是人类最常见的神经退行性运动障碍性疾病之一,其特征是中脑黑质致密部多巴胺能神经元变性丢失,纹状体内多巴胺水平降低,进而引起震颤、肌肉僵直、运动迟缓和姿势步态失调的症状。帕金森病的病理机制复杂,病因目前仍不清楚。但近年来,炎症反应在帕金森病中的作用引起人们的广泛关注,小胶质细胞的激活以及炎性因子的高表达参与帕金森病的发生、发展过程。应用抗炎药物延缓或阻止帕金森病的发生、发展已成为该领域新的研究热点。本文就帕金森病中的炎症机制以及抗炎药物的进展进行综述。     

环烯醚萜苷对大鼠脑梗死后NF-κB与凋亡调节因子Bcl-2/Bax表达变化的影响

目的观察光化学法诱导大鼠脑梗死形成过程中核转录因子(Nuc lear factor-kappa B,NF-κB)与凋亡调节因子Bax和Bc l-2表达的变化,并探讨山茱萸环烯醚萜苷(iridoid gly-coside,IG)对这一过程的影响。方法大鼠预先灌胃给药7d后,制作光化学致脑梗死模型,采用免疫组织化学法检测脑组织中NF-κB表达的变化,W estern b lot技术检测凋亡调节因子Bax和Bc l-2表达的变化。结果模型组与对照组相比,脑皮层内NF-κB和Bax蛋白表达增多,Bc l-2蛋白表达减少。与模型组相比,IG能够明显的减少NF-κB和Bax蛋白表达,增高Bc l-2蛋白的表达。结论IG可通过影响脑内NF-κB和凋亡调节基因的表达而发挥对脑梗死的治疗作用。     

莫诺苷抑制H2O2诱导的神经细胞凋亡

目的：研究莫诺苷对氧化应急诱导的神经细胞凋亡的影响。方法：培养的人神经母细胞瘤（SH-SY5Y）神经细胞加入莫诺苷（1，10，100μmol&#183;L^-1）预孵育24h，加入H2O2（500μmol&#183;L^-1）作用18h诱导产生氧化损伤，测定对细胞内超氧化物歧化酶（SOD）活性的影响；用Westernblot方法检测caspase-3，caspase-9，Bcl-2和Bax的表达。结果：莫诺苷（10，100μmol&#183;L^-1）抑制氧化损伤，与模型组相比，SOD活性分别增加了14％（P〈0．01）和11％（P〈0．05）；莫诺苷（1，10，100μmol&#183;L^-1）与模型组相比，caspase-3的含量分别减少了31％（P〈0．01），103％（P〈0．001）和95％（P〈0．001），caspase-9的含量分别减少了71％（P〈0．001），132％（P〈0．001）和37％（P〈0．05），Bcl-2分别增加了88％（P〈0．01），121％（P〈0．001）和60％（P〈0．01），对Bax没有影响。结论：莫诺苷可通过抗氧化作用抑制H2O2诱导的神经细胞凋亡，具有神经保护作用。