TNF-α体外介导小鼠肝细胞凋亡和坏死

目的探讨TNF-α在体外作用于小鼠肝细胞时肝细胞所发生的病理及生化改变.方法采用原位灌洗法分离小鼠肝细胞,体外培养后分别加入TNF-α,GalN和GalN/TNF-α 5,10,20和30 h后,观察其形态学改变,测定培养上清液ALT和AST,抽提肝组织DNA,琼脂糖凝胶电泳观察生化学性质改变.结果 TNF-α单独作用于培养肝细胞,无肝细胞凋亡和坏死,经GalN致敏后,TNF-α可诱导大量肝细胞凋亡,早期(10 h)为凋亡,随后(20 h以后)出现肝细胞坏死,其程度随培养时间延长和药物剂量的增加而明显.单独使用GalN也可造成肝细胞凋亡和坏死,但程度较GalN/TNF-α合用轻.结论 TNF-α可诱导肝细胞凋亡和坏死,但须有肝细胞转录过程的抑制.     

蛋白转导域蛋白转运研究进展

蛋白转导域（protein transduction domain,PTD）是一种很有前景的蛋白转运工具,体内和体外实验显示其可以有效的将外源性蛋白转运入细胞内,已有多种方法用于改建PTD,证实PTD变体具有同样的蛋白转导特性。现就PTD的蛋白转运研究进展进行综述。     

重型颅脑损伤并发肺部感染的病原菌及耐药性分析

目的 研究重型颅脑损伤并发肺部感染的病原菌及其耐药性,以指导临床用药.方法 对141例重型颅脑损伤患者进行痰培养及药物敏感试验,对耐药情况进行分析.结果 共分离出病原菌228株,其中革兰阴性(G-)菌144株,占63.2%,前4住依次为铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌及大肠埃希菌;革兰阳性(G+)菌60株,占26.3%,均为金黄色葡萄球菌;真菌以白色念珠菌为主,共24株,占10.5%.药敏结果显示多数细菌对抗生素多重耐药.结论 重型颅脑损伤合并肺部感染病原菌多为多重耐药菌株,临床上应加强病原菌培养及耐药性监测,合理使用抗生素,并采取有效措施以减少院内感染的发生.     

乙肝病毒核心抗原强制泛素化DNA疫苗的构建

目的构建乙型肝炎病毒核心抗原（HBcAg）强制泛素（Ub）化的DNA疫苗表达质粒。方法以BALB/c小鼠肝脏mRNA为模板,RT-PCR扩增Ub单体基因片段,并将其羧基端第76位氨基酸突变为丙氨酸;以HBVpADR为模板,PCR扩增HBcAg基因片段,并根据N末端法则将其第1位氨基酸突变为精氨酸;利用重组PCR技术拼接Ub-HBcAg融合基因,纯化后连接pUCm-T载体,酶切鉴定正确后将Ub-HBcAg片段插入真核表达质粒pcDNA3.1（-）,构建重组真核表达质粒Ub-HBcAg-pcDNA3.1（-）,并行酶切鉴定和基因测序。结果构建的HBcAg强制Ub化融合基因DNA疫苗经基因测序证实目的基因插入方向正确,突变与预期相符;其余基因序列与GenBank发布序列完全一致。结论成功构建了HBcAg强制Ub化融合基因DNA疫苗。     

PD-1及其配体在慢性乙肝免疫中的作用

HBV特异性T淋巴细胞功能低下与HBV逃避免疫是造成HBV慢性持续感染的原因,T淋巴细胞功能状态决定了病毒是被清除,或是持续感染。T淋巴细胞异常表达某些免疫分子与慢性乙肝（CHB）的发生、发展过程有关。PD-1为近年发现的CD28家族新成员,因其独特的生物学功能而备受关注,已发现其在慢性乙肝免疫应答过程中发挥重要作用,但其具体免疫机制尚需进-步研究。     

乙型肝炎患者血清视黄醇结合蛋白与前白蛋白的变化及临床意义

目的 探讨血清视黄醇结合蛋白(RBP)与前白蛋白(PA)在乙型肝炎患者中的变化及临床意义.方法 采用免疫透射比浊法分别检测178例乙型肝炎患者和35名健康成年人的血清RBP与PA水平,并进行相关统计分析.结果 除慢性轻度肝炎组外,其他各组乙型肝炎患者血清RBP与PA水平均显著低于正常对照组(P<0.01).血清RBP的异常率均高于同组血清PA与白蛋白(ALB)的异常率(P<0.05).重型乙型肝炎死亡组血清RBP与队水平均显著低于存活组(P<0.01).血清RBP与PA水平呈正相关(r=0.728,P<0.01).血清RBP、队与ALB水平之间亦呈正相关(r1=0.597,r2=0.516,均P<0.01).结论 血清RBP和PA水平与肝功能损害程度相关.随肝功能损害程度的加重,两者的血清水平逐渐下降.可以作为反映肝功能损害程度的指标,且RBP的半衰期明显短于PA,比PA能更灵敏、更快速、更特异地反映肝功能的变化.     

树突细胞的成熟状态和慢性病毒性肝炎

树突细胞 (dendriticcells,DC)是体内最强的提呈细胞 ,能诱导T细胞定向分化为Th1或Th2 ,在其成熟过程中伴随着表面分子的种类和数量 ,细胞功能及迁移能力等方面的变化而变化 ,并受多种因素的调节。本文就此及DC在慢性病毒性肝炎发生和临床上的作用进行综述。     

肺外结核

肺外结核是指发生于肺部以外全身其他脏器的结核,是结核病疫情的重要组成部分。近年来,由于耐药结核病、人类免疫缺陷病(HIV)合并结核分枝杆菌感染和大规模人口流动等问题的出现,结核病疫情呈增多趋势。据世界卫生组织报     

KLF6、Sp1蛋白在肝癌、肝硬化组织中的表达及意义

目的研究转录因子KLF6、Sp1在人肝细胞癌与肝硬化组织中的表达和意义。探讨KLF6、Sp1在肝癌、肝硬化中发生发展的作用机制及KLF6与Sp1之间的相关性。方法用免疫组化法对51例肝癌组织、35例癌旁肝硬化组织、10例良性病变而切除的正常肝组织转录因子KLF6、Sp1进行蛋白检测。结果KLF6、Sp1蛋白在肝癌组织表达率高于癌旁肝硬化组织，正常肝组织中全部呈阴性表达（P〈0．001）。结论KLF6、Sp1蛋白过表达在肝细胞癌、肝硬化的发生发展中可能起重要作用，在肝硬化组织中KLF6与Sp1具有正相关性。     

粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子质粒对小鼠树突状细胞前体的体内诱导研究

目的 观察粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)表达质粒体内转染对小鼠髓源性树突状细胞(DC)前体的诱导作用,为探索乙型肝炎新的免疫治疗提供研究基础.方法 30只BALB/c小鼠随机分为对照组、100μg剂量组和200 μg剂量组,注射1周,分离骨骼肌,抽提RNA,利用RT-PCR观察反转录水平;分离小鼠骨髓细胞,并以重组小鼠粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)和重组小鼠白细胞介素-4(rmIL-4)诱导培养DC,倒置显微镜下观察其形态,并做扫描电镜检测.ELISA法检测小鼠血清中的GM-CSF表达量,流式细胞仪检测其表面分子(CD80,CD86,MHC-Ⅱ,CD11c)表达情况.结果 体内转染后,ELISA检测血清中GM-CSF表达量,与对照组比较,100 μg组和200 μg组表达量均有明显升高(P＜0.01);流式细胞仪检测显示100 μg组和200 μg组CD11c和MHC-Ⅱ类分子表达较对照组明显升高(P＜0.01),CD80和CD86有所升高(P＜0.05).结论 GM-CSF质粒体内注射可以明显刺激诱导小鼠髓源性DC前体的增殖,增强DC的抗原提呈作用.