腺相关病毒在基因治疗中的研究进展

基因治疗为人类一些疑难疾病的治疗带来了新的希望,但如何将外源基因高效导人靶细胞或机体,一直是人们渴望解决的问题。腺相关病毒(Adeno-associated Virus, AAV)属细小病毒科,是动物病毒中最小的一种真核病毒,在高效转导、稳定表达方面具有其他病毒载体所没有的优越性。在为人类基因治疗寻找一种理想载体的研究中,AAV受到广泛重视。近年来其基本生物学特性及应用研究均取得了较大进展。     

肝细胞生长因子对辐射后心肌细胞蛋白合成的保护作用

目的 研究肝细胞生长因子(HGF)对60Coγ射线照射体外培养的大鼠心肌细胞蛋白表达的影响.方法 体外培养新生大鼠心肌细胞,分为未照射组、单纯照射组、HGF处理照射组,照射组细胞分别用60Coγ射线20Gy单剂量照射心肌细胞,HGF处理的照射组在照射前3 h用终浓度为40ng/ml的HGF孵育.在照射后48 h:(1)用蛋白检测试剂盒检测各组心肌细胞中的总蛋白含量;(2)流式细胞仪检测各组的细胞周期变化;(3)带绿色荧光蛋白基因的腺病毒(AdGFP)感染各组心肌细胞,感染后48 h用流式细胞仪检测各组心肌细胞中所含的绿色荧光蛋白的荧光强度,间接比较各组心肌细胞中绿色荧光蛋白的生成量.结果 照射后48h,照射组心肌细胞中总蛋白含量较未照射组减低(P＜0.01),HGF处理的照射组心肌细胞中总蛋白含量较单纯照射组增高(P＜0.05).照射后96 h、感染AdGFP后48 h,照射组心肌细胞的绿色荧光强度明显弱于未照射组(P＜0.01),HGF处理的照射组心肌细胞的绿色荧光强度较单纯照射组增强(P＜0.01).结论 60Coγ射线单剂量照射抑制体外培养的心肌细胞蛋白合成,HGF可部分逆转60Coγ射线对心肌细胞蛋白生成的抑制作用.     

Exendin-4 通过PI3K/Akt 信号通路促进脂肪干细胞旁分泌细胞因子

目的探讨Exendin-4 促进脂肪来源干细胞（ADSCs）旁分泌细胞因子的机制。方法混合酶消化法提取和培养SD大鼠
腹股沟处的脂肪干细胞,使用流式细胞学检测有或无Exendin-4 处理后的第4 代ADSCs表面标记物,MTT法绘制0、1、5、10、
20 nm/L不同浓度Exendin-4下的ADSCs生长曲线;qPCR法检测不同浓度Exendin-4处理12 h后bFGF、VEGF、HGF、IGF-1的
表达变化。Western blotting和qPCR检测Exendin-4对于Akt通路的作用。同时添加通路阻断剂LY-294002,使用ELISA检测
Akt 通路阻断后Exendin-4 对于旁分泌蛋白的影响。结果分离培养的ADSCs 高表达CD29、CD90、CD105,低表达CD34、
CD45,并且能够多向分化为脂肪细胞、骨细胞,符合间充质干细胞的表型特点。Exendin-4处理后,不仅不会改变ADSCs的表
型,还能以浓度依赖方式促进ADSCs 在体外增殖（P<0.05）。不同浓度Exendin-4 处理ADSCs 12 h 后,旁分泌蛋白bFGF、
VEGF、HGF、IGF-1的表达量逐渐提高,其中10 nm/L Ex-4处理12 h可能为最佳处理浓度（P<0.05）。Western blotting和qPCR
提示Exendin-4 能够显著提高胞内Akt 的磷酸化水平,而给予LY-294002 后,磷酸化Akt 表达减弱,同时ADSCs培养液上清中
bFGF、VEGF、HGF、IGF-1的含量也明显降低（P<0.05）。结论短暂Exendin-4处理不会改变ADSCs表型,但能加强细胞的增殖
能力,且以剂量依赖方式促进干细胞旁分泌细胞因子bFGF、VEGF、HGF、IGF-1。10 nm/L可能为Exendin-4 最适促旁分泌浓
度,其扩大干细胞旁分泌的机制部分是通过激活PI3K/Akt信号通路来介导。
     

药物临床研究与应用氯吡格雷在急性冠状动脉综合征早期应用的临床研究

目的：探讨急性冠状动脉综合征(ACS)早期应用氯吡格雷75mg／d及氯吡格雷75mg／d加阿司匹林100mg／d的有效性及安全性。方法：将202例ACS患者随机单盲分为3组。A组(阿司匹林组)67例，首剂150mg／d，而后100mg／d；B组(氯吡格雷组)68例，首剂300mg／d，而后75gm／d；C组(氯吡格雷加阿司匹林组)67例，阿司匹林100mg／d，加氯吡格雷75mg／d，随访2年，观察住院期间及随访期间心脑血管事件发生情况，抗炎症因子，改善心功能及减少颈动脉内膜-中层厚度(IMT)作用、药物不良反应。结果：3组住院期间及随访2年中均能降低心脑事件发生，但住院期间反复发作心绞痛(AP)，心律失常，心力衰竭(HF)发生危险C组优于B组(但P&;gt;0．05)，优于A组(P&;lt;0．05)，而B组优于A组(但P&;gt;0．05)；随访2年中，复发性AP，再发生非致死性心肌梗死(MI)，心律失常、HF、需做经皮腔内冠状动脉介入术／冠脉旁路移植术(PCI／CABG)、因缺血发作需再住院等，C组明显比A组减少(P&;lt;0．05)。同时，3组治疗6周后，P-选择素、血纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)、D-二聚体、纤维蛋白原(FG)、超敏C-反应蛋白(hs—CRP)、均较治疗前明显降低(P&;lt;0．01)。而C组在降低上述5项炎症物作用优于B组(P&;lt;0．05)，优于A组(P&;lt;0．05)；B组作用优于A组，但P&;gt;0．05。3组治疗6周后，均较治疗前明显改善左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(VS)，二尖瓣快速充盈期和心房收缩期血流速度比(E／A)(3组P均&;lt;0．01)，上述3项指标改善C组优于A组(P&;lt;0．05)和B组(P&;gt;0．05)，B组优于A组(但P&;gt;0．05)；同时3组治疗1年和2年，均较治疗前明显减少颈内动脉(ICA)的IMT和颈总动脉(CCA)的IMT(P均&;lt;0．05-0．01)，上述作用C组优于A组(P&;lt;0．05)和B组(P&;lt;0．05)，而B组优于A组(但P&;gt;0.05)。3组不良反应均轻微。结论：ACS早期应用氯吡格雷75mg／d或氯吡格雷75mg／d加阿司匹林100mg／d且一直用2年，能明显减少住院和随访期心脑事件发生，明显抑制炎症因子，改善收缩／舒张功能，减少ICA／CCA IMT，且安全耐受性好，值得临床推广应用。     

肝细胞生长因子在大鼠心肌细胞放射损伤中的抗凋亡作用

目的 研究肝细胞生长因子(HGF)对60Co γ射线照射诱导的体外培养心肌细胞凋亡的保护作用.方法 体外培养新生Wistar大鼠心肌细胞,分为未照射组(A组)、单纯照射组(B组)、HGF(20ng/ml)处理照射组(C组)、HGF(40ng/ml)处理照射组(D组).B、C、D组分别用60Co γ射线20Gy单剂量照射心肌细胞,C、D组细胞在照射前3h分别用终浓度为20、40ng/ml的HGF孵育.照射后48h检测培养上清中的LDH浓度,用流式细胞仪检测心肌细胞生长周期及细胞凋亡率变化.结果 照射后48h,B、C、D组细胞培养上清中的LDH浓度较A组升高,C、D组的LDH浓度较B组下降;B、C、D组细胞生长周期较A组无明显变化,但凋亡细胞比例较A组升高,经HGF孵育的心肌细胞凋亡率则呈下降趋势.结论 60Co γ射线单剂量照射可造成体外培养的心肌细胞损伤,促进心肌细胞凋亡,HGF可抑制60Co γ射线对体外培养的大鼠心肌细胞的促凋亡作用,其机制仍需进一步研究.     

动脉粥样硬化性疾病与肿瘤发生的相关性及机制研究进展

动脉粥样硬化性疾病和肿瘤严重威胁人类健康.临床研究显示,动脉粥样硬化性疾病和肿瘤的发生显著相关,动脉粥样硬化患者中肿瘤的发生率高于非动脉粥样硬化者,同时,肿瘤人群中动脉粥样硬化性疾病的发生率亦显著高于非肿瘤人群.动脉粥样硬化性疾病和肿瘤看似是两个独立的疾病,但是在发病机制上存在不同水平的关联,二者不仅存在共同的危险因素...     

γ射线照射导致心肌细胞坏死性凋亡和线粒体损伤

目的 探讨γ射线照射引起的心肌细胞死亡方式及其线粒体损伤效应.方法 用60Coγ射线单次照射大鼠H9C2心肌细胞,按照射后时间分为照射后24,48和72 h组,按照射剂量分为细胞对照组及5,10和20 Gy组.用CCK-8试剂盒检测细胞存活率;APC-AnnexinⅤ/7AAD凋亡试剂盒检测细胞凋亡;Western印迹...     

急性心肌梗死患者急诊PCI术后无复流的危险因素分析

摘要：目的探讨急性心肌梗死（AMI）患者急诊PCI术后出现无复流的相关危险因素。方法发病在6 h以内,或12 h内仍有持
续胸痛的843名AMI患者给予急诊PCI,收集患者的临床、造影和介入治疗资料。PCI术后,根据TIMI血流分级和心肌显色分
级两项结果将病人分为两组,正常血流组和无复流组。比较这两组病人基本临床资料、造影结果和手术相关资料的差异,分析
AMI患者急诊PCI术后出现无复流的原因。结果急诊PCI术后无复流的发生率约为15.9%。通过单变量分析,既往MI病史、心
梗Killip分级、症状至PCI时间、术前IABP应用、术前TIMI分级、病变长度、血栓负荷程度、再灌注方法与急诊PCI术后发生无复
流有关(P<0.05 )。多变量Logistic回归模型认为,症状至PCI时间（OR：1.60;95% CI：1.02~2.73）、术前TIMI血流分级(OR：1.1;
95% CI：1.04~1.16)、病变血管长度(OR：1.40; 95% CI：1.19~1.69),血栓负荷程度(OR：2.02; 95% CI：1.47~2.76)可作为急诊PCI
术后无复流发生的独立危险因素。结论症状至PCI时间、术前TIMI血流分级、病变血管长度和血栓负荷程度可作为AMI患者
急诊PCI后发生无复流的独立预测因素。
     

体外反搏治疗冠心病15例临床观察

我院于1984年9月应用WFB—ⅡB型体外反搏器治疗冠心病15例,现将初步观察结果报告如下: 临床资料本组病例均按1980年第一届内科学术会议“冠心病诊断标准”筛选,(临床上均有典型心绞痛症状,心电图有缺血型ST-T改变),凡具有反搏的禁忌症者,如瓣膜病、