脐血单个核细胞和脐带间充质干细胞治疗儿童孤独症的安全性与有效性

背景：目前国内外尚没有治疗儿童孤独症的金标准,康复治疗效果不佳。目的：评价脐血单个核细胞和脐带间充质干细胞治疗儿童孤独症的临床安全性和有效性。方法：37例儿童孤独症患者非随机分为脐血组、混合组和对照组。脐血组应用脐血单个核细胞加康复训练治疗;混合组联合应用脐血单个核细胞和脐带间充质干细胞加康复训练治疗;对照组单纯行康复训练治疗。脐血组和混合组患者在干细胞治疗前和首次治疗后1,2,6个月分别行相关指标实验室检查,并观察有无不良反应发生。3组患者在治疗前和首次治疗后1,2,6个月分别行儿童孤独症评定量表（CARS）和异常行为量表（ABC）评估。结果与结论：脐血组和混合组患者在干细胞治疗前和首次治疗后1,2,6个月相关指标实验室检查未发现有意义异常变化,干细胞治疗后无严重不良反应发生;根据CARS和ABC评分,3组治疗均有效,其疗效比较：混合组优于脐血组,脐血组优于对照组。     

人羊膜间充质干细胞移植对阿尔茨海默病转基因小鼠的行为学和β-淀粉样蛋白的影响

背景：研究发现APP基因与阿尔茨海默病发病密切相关。β-淀粉样蛋白是阿尔茨海默病患者脑内老年斑的主要成分，基因突变和外界环境的影响能破坏β-淀粉样蛋白的动态平衡，从而引发或加速阿尔茨海默病的产生和发展。 目的：探讨人羊膜间充质干细胞尾静脉移植对阿尔茨海默病转基因小鼠学习记忆能力及脑组织β-淀粉样蛋白表达的影响。 设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2008-05/10在郑州大学微生物学与免疫学教研室和河南省中医药治疗研究院完成。 材料：健康剖宫产产妇志愿捐献的羊膜，由郑州大学第一附属医院产科提供。APP转基因鼠29只，PCR技术鉴定转APP-基因小鼠9只，作为正常组；转APP+基因小鼠20只，随机分为细胞移植组、对照组，10只/组。 方法：无菌条件下体外分离培养人羊膜间充质干细胞，传至第3代将细胞浓度调整为1×109 L-1，经尾静脉注入0.5 mL至细胞移植组小鼠体内；对照组经尾静脉注入同体积的生理盐水；正常组小鼠不给予任何干预措施。 主要观察指标：采用Morris水迷宫测定小鼠逃避潜伏期、穿越平台次数及在平台象限的时间，刚果红染色观察小鼠脑组织内β-淀粉蛋白的表达。 结果：定位航行试验中，移植前与正常组比较，细胞移植组、对照组小鼠逃避潜伏期差异均有显著性意义（P < 0.05）；移植后2周细胞移植组小鼠逃避潜伏期与正常组基本相似（P > 0.05），但明显短于对照组（P < 0.05）。空间探索试验中，移植前后小鼠穿越平台次数及其在平台象限的时间3组间比较差异均无显著性意义（P > 0.05）。移植后1个月，正常组未见或仅见极少量的β-淀粉样蛋白沉积，细胞移植组淀粉样蛋白的沉积明显少于对照组。 结论：人羊膜间充质干细胞尾静脉移植能促进阿尔茨海默病转基因小鼠空间定位及学习记忆能力的提高，且减少小鼠脑内β-淀粉样蛋白的沉积。     

人羊膜间充质干细胞联合神经生长因子及纤维蛋白胶移植治疗大鼠脑损伤

背景：以往对间充质干细胞分化的报道多为体外培养，甚少涉及宿主体内间充质干细胞的分化及辅助因子对其分化的影响。 目的：探讨人羊膜间充质干细胞移植对脑损伤大鼠行为学和空间学习记忆能力的影响，以及神经生长因子、纤维蛋白胶在人羊膜间充质干细胞移植中的作用。 设计、时间及地点：细胞学体内对照观察，于2006-07/2007-01在郑州大学医学院完成。 材料：正常足月剖腹产胎儿的胎盘由郑州大学第一附属医院妇产科提供。Wistar大鼠90只，随机分为5组：假手术组、模型对照组、细胞移植组、细胞+神经生长因子组、细胞+纤维蛋白胶组，18只/组。 方法：无菌条件下钝性分离胎盘脐带面的羊膜，经胰酶消化制成单细胞悬液，贴壁法纯化扩增，传至第3代的人羊膜间充质干细胞备用。假手术组只开颅钻孔不进行硬膜外撞击，其余4组大鼠均采用自由落体硬膜外撞击法建立脑损伤模型。造模1 d后，模型对照组在损伤区分点注射生理盐水40 μL；细胞移植组注射含1×107个人羊膜间充质干细胞的等量生理盐水；细胞+神经生长因子组在细胞移植组基础上于造模后连续2周每日腹腔注射0.5 μg神经生长因子；细胞+纤维蛋白胶组注射人羊膜间充质干细胞与纤维蛋白胶混合液40 μL；假手术组不行细胞移植。 主要观察指标：行为学评分，Morris水迷宫检测潜伏期，脑组织切片免疫组化染色检测神经元特异性烯醇化酶和胶质纤维酸性蛋白的表达。 结果：移植后7 d，与模型对照组比较，细胞移植组、细胞+神经生长因子组、细胞+纤维蛋白胶组行为学评分均明显升高，但细胞移植组升高幅度明显低于后2组（F=155.322，P < 0.05）。移植后3周，与模型对照组比较，细胞移植组、细胞+神经生长因子组、细胞+纤维蛋白胶组潜伏期均明显缩短，但细胞移植组缩短幅度明显小于后2组（F=22.678，P < 0.05）。移植后4周，人羊膜间充质干细胞能够在大鼠损伤脑组织内分化，与神经生长因子、纤维蛋白胶混合移植可提高神经元特异性烯醇化酶和胶质纤维酸性蛋白的阳性表达率（F=705.406，F=424.884，P < 0.05）。 结论：人羊膜间充质干细胞可改善脑损伤大鼠行为能力及空间学习记忆能力，分化后能表达神经元特异性烯醇化酶和胶质纤维酸性蛋白，神经生长因子与纤维蛋白胶均可增强细胞移植治疗效果。     

干细胞移植治疗小儿脑瘫的临床疗效:40例报告

目的分析和总结应用脐带间充质干细胞对小儿脑瘫患者的运动功能疗效。方法常规检查后,随机筛选适合进行干细胞移植的脑瘫患儿40例,每隔一周进行1次,共四次为一个疗程的脐带间充质干细胞移植,移植方法包括静脉输注(1次)和腰椎穿刺蛛网膜下腔移植(3次);同时辅助常规神经营养药物和物理康复治疗,随访6个月至1年,平均8.5个月。应用小儿脑瘫粗大运动评价量表(GMFM-88),改良Ashworth法(肌张力评定)和SPSS对术前、术后患儿的粗大运动功能进行统计分析。结果一个干细胞移植治疗疗程结束后,患儿自身对比的粗大运动能力均得到不同程度提高。随访发现,患儿出院6个月后的各项运动指标也较出院时有明显改善。结论干细胞移植可不同程度改善脑瘫患儿的运动功能,其治疗机制有待进一步探讨。     

人脐带沃顿胶间充质干细胞与脑肿瘤干细胞的共培养**

背景：人脐带沃顿胶间充质干细胞满足了国际细胞治疗协会规定的间充质干细胞的特点,能够向骨、软骨、脂肪、肌肉、神经细胞诱导分化并支持其他干细胞的扩增,对免疫系统有良好的耐受性,对肿瘤有定向迁徙性。 目的：观察人脐带沃顿胶间充质干细胞与脑肿瘤干细胞体外共培养后,脑肿瘤干细胞的生物学变化。 方法：以原位法培养人脐带沃顿胶间充质干细胞,以酶消化法培养人脑肿瘤组织脑肿瘤干细胞,以细胞传代法获取第3代细胞。应用不添加任何生长因子的无血清培养基将两种细胞在24孔板中进行直接共培养。第3,7天应用流式细胞术检测细胞CD133表达;应用免疫荧光法检测贴壁细胞巢蛋白和胶质纤维酸性蛋白表达;将第3天离心所得的共培养上清液重悬第3代脑肿瘤干细胞并与正常培养悬浮的第3代脑肿瘤干细胞置入96孔板中,应用酶标仪检测两组细胞生长曲线的差异。 结果与结论：两种细胞共培养后在倒置显微镜下可见脑肿瘤干细胞球随着培养时间的增加出现分解、贴壁、分化现象;贴壁的脑肿瘤干细胞免疫荧光染色胶质纤维酸性蛋白和巢蛋白均阳性。恶性程度高的脑肿瘤组织培养的脑肿瘤干细胞表达CD133量越高,而与沃顿胶间充质干细胞共培养后随着时间的变化均出现CD133表达量降低。共培养3 d的上清液培养的脑肿瘤干细胞与正常培养基培养的脑肿瘤干细胞相比,增殖明显受到抑制。结果显示沃顿胶间充质干细胞与脑肿瘤干细胞体外共培养后可限制脑肿瘤干细胞表面标记物CD133的阳性率以及细胞增殖能力并促使其分化。     

顺铂腹腔温热化疗对SD大鼠空肠吻合口肌间神经元影响的研究

目的通过研究腹腔温热化疗（IHCP）对大鼠小肠吻合口周围的小肠神经系统中肌间神经元的影响,来探讨腹腔温热化疗临床应用价值及条件限制性。方法应用H＆E染色及硝酸铅神经染色及电镜技术观察神经细胞形态,细胞计数,RT—PCR法检测bFGFmRNA相对表达量。结果神经元细胞数平均水平第7天达最低后渐回升。bFGFmRNA表达量在第3天显著高于其他时间。对照组bFGFmRNA相对表达水平与腹腔温热灌注组、腹腔温热化疗组有显著性差异;术前温热灌注组bFGFmRNA相对表达水平与术后温热灌注组、术后温热化疗组有显著性差异。结论空肠吻合术后应用顺铂腹腔温热化疗不会影响吻合口周围神经元的再生。     

益口槟葛对金黄地鼠健康的影响研究

目的:研究连续嚼食基于葛根制备的槟榔风味咀嚼块益口槟葛4周对金黄地鼠的健康影响，评估益口槟葛的嚼食安全性。方法:将40只金黄地鼠随机分为4组，分别为空白对照组、葛根组、益口槟葛组和槟榔组，每组10只。空白组金黄地鼠用10%水合氯醛以3mL/kg剂量进行麻醉，以保证各组处理条件一致，其他实验组金黄地鼠在麻醉后将葛根、槟葛或槟榔(均切碎呈小颗粒状)塞至两颊，每2天1次，共持续给药4周。每两周用游标卡尺测金黄地鼠口腔开合度；第4周对各组金黄地鼠进行高架十字迷宫实验，评估葛根、益口槟葛和槟榔对金黄地鼠行为能力的影响；饲喂嚼食4周后，处死各组金黄地鼠，检测各主要脏器指数、肝转氨酶活性，评估其生理健康状况；取颊囊组织进行染色，并提取RNA,检测与口腔黏膜下纤维化有关的关键基因表达情况。结果:饲喂4周后，各实验组地鼠摄食量及体质量出现明显下降。槟榔组转氨酶显著升高，肾指数各组间无明显差异。各组地鼠颊囊无明显外观改变，开口度无明显差异，组织染色结果显示各咀嚼组出现一定的黏膜组织改变，槟榔组出现更明显的炎性细胞浸润。mRNA水平上的纤维化相关基因差异表达提示，槟榔咀嚼组出现一定的口腔黏膜下纤维化征兆，益...