苦杏仁苷对二甲基亚硝胺诱导的大鼠肝纤维化的防治作用

目的：探讨苦杏仁苷对二甲基亚硝胺（DMN）诱导的大鼠肝纤维化的防治作用。方法：采用Wistar雄性大鼠,以腹腔注射DMN诱导大鼠肝纤维化模型。在造模4周后,将造模大鼠按体重分层随机分为模型组、苦杏仁苷组及对照药秋水仙碱组,每组10只,灌胃用药两周后取材。观察检测以下指标：①末次体重、肝脾比值;②肝组织羟脯氨酸含量;③肝功能指标：血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、门冬氨酸氨基转移酶（AST）、谷胺酰转肽酶（GGT）活性;白蛋白（Alb）、总胆红素（TBil）含量;④肝组织天狼星红染色及HE染色;⑤肝组织脂质过氧化指标：超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、还原型谷胱甘肽（GSH）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）。结果：①模型组大鼠肝组织羟脯氨酸含量与正常组相比显著升高（P〈0.01）;与模型组相比,苦杏仁苷及秋水仙碱治疗组大鼠肝组织羟脯氨酸含量显著降低（P〈0.01）;②天狼星红染色显示模型组大鼠窦周胶原沉积明显,肝小叶间形成较厚汇管区和中央静脉间的纤维间隔,可见较多完整的假小叶,HE染色结果显示模型组大鼠肝细胞水肿明显,汇管区结缔组织有不同程度增生,肝组织中有炎性细胞浸润,窦壁细胞增生明显;苦杏仁苷治疗组和秋水仙碱对照组与模型组相比炎症缓解、胶原纤维增生程度分期显著降低（P〈0.05）;③模型组大鼠血清ALT、AST、GGT活性及TBil含量显著升高,Alb含量显著降低（P〈0.01）;苦杏仁苷组与秋水仙碱组大鼠血清ALT、AST活性显著降低（P〈0.01或P〈0.05）;④与正常组比较,模型组大鼠肝组织SOD活性、GSH含量及GSH-Px活性显著降低,MDA含量显著升高（P〈0.05）;苦杏仁苷能显著升高模型大鼠肝组织GSH活性（P〈0.05）,秋水仙碱则能显著升高GSH、GSH-Px活性。结论：苦杏仁苷对DMN诱导的大鼠肝纤维化有显著改善作用。     

IFN-γ治疗慢性乙型肝炎肝纤维化临床疗效观察

目的观察干扰素(IFN-γ)治疗慢性乙型肝炎肝纤维化临床疗效.方法选择31例(男30/女1)符合慢性乙型肝炎肝纤维化诊断的病例,肌注IFN-γ针剂,用药及其后随访各6个月,用药前后肝组织病理学变化盲法观察诊断为主要评价依据,结合用药前后临床症状和体征、病毒学和肝功能、肝脏B超探查及血清纤维化指标测定,通过用药和随访期间心电图、肾功能和血液常规、尿常规定期检查以观察IFN-γ的疗效和不良反应.结果用药后肝纤维化分期改善率为30%(9/30),血清HA含量的改善(下降至正常值上限以下)率14.2%(3/21).用药前血清总胆红素值正常或轻度升高者疗效较好.IFN-γ有一定的副反应(发热和血白细胞一过性下降,发生率分别为50%和3.23%).结论 IFN-γ对慢性肝炎肝纤维化有一定的改善效果.用药前血清胆红素值高低是影响IFN-γ抗肝纤维化疗效的主要因素,IFN-γ有一定的副反应.     

四氯化碳蒸熏法致肝细胞急性损伤时的功能变化及扶正化瘀方药物血清的调节作用

目的:研究体外急性损伤肝细胞的功能变化和扶正化瘀方药物血清的调节作用。方法:采用四氯化碳蒸熏法造成体外原代培养大鼠肝细胞急性肝损伤,检测其释放ALT、AST活性,分泌白蛋白及细胞内外胶原生成率的变化,同时通过添加体内给药后分离的药物血清,观察扶正化瘀方对急性损伤肝细胞病理变化的影响。结果:CCl_4体外急性损伤肝细胞后,其培养液中ALT、AST活性及胶原生成率显著升高,增殖能力明显降低,Alb变化不明显,扶正化瘀方药物血清能显著促进损伤肝细胞的增殖,有效地抑制损伤肝细胞培养上清波中ALT、AST活性,抑制损伤肝细胞的胶原生成率。结论:在急性损伤肝细胞状态,胶原合成已被启动,扶正化瘀方适当剂量具有保护肝细胞、抑制胶原生成的作用。     

不同治则中药诱导SMMC-7721人肝癌细胞分化的研究(摘要)

目的:探讨中医阴阳治则理论在肝癌细胞分化中的作用与意义。方法:采用口服给药后分离药物血清的方法,制备不同扶正治法代表药物(养阴:北沙参、天冬;益气:黄芪、白术、温阳:附子、肉桂;补肾:虫草菌丝,仙灵脾)的药物血清,观察其对SMMC-7721人肝癌细胞增殖(MTT法),甲胎蛋白、白蛋白(ELISA法)的分泌量及细胞内cAMP     

加强脂肪肝的中医药治疗研究

脂肪性肝病（fatty liverdisease,FLD）简称脂肪肝,是一种病变主体在肝小叶,以肝细胞弥漫性大泡性脂肪变为主的临床病理综合征。目前认为FLD由遗传-环境-代谢应激相关因素所致,通常分酒精性和非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）两大类。其中NAFLD是近年来尤为重视的一个研究领域,其原因主要在于生活水平的提高和生活方式的改变而出现患病率较大幅度的提高,以及对其传统的“预后良好”认识发生了改变。如有报道,上海市成人脂肪肝患病率为17．3％,非酒精性脂肪肝、酒精性脂肪肝患病率分别为15．35％、0．79％;国外1515例肥胖相关性脂肪肝肝活检荟萃分析显示5％～63％有炎症,29％有肝纤维化,3％有肝硬化。因此可以说,脂肪性肝病的防治是我国肝病防治领域面临的新挑战。     

祛湿化瘀方对游离脂肪酸诱导的HepG2细胞脂肪沉积和TNF-α分泌的抑制作用

目的 研究祛湿化瘀方对体外肝脂毒性模型脂肪沉积和肿瘤坏死因子α（tumornecrosis factor α,TNF-α）分泌的影响,以进一步探究该方防治脂肪肝的作用机理。方法复制游离脂肪酸（freefattyacid,FFA）诱导的HepG2细胞脂肪变性和TNF-α分泌脂毒性模型。设正常组、模型组和不同浓度药物血清组。分别观察上清中TNF-α含量,细胞内甘油三酯（triglyceride,TG）含量,细胞油红染色和电镜超微结构变化,细胞TNF-α蛋白表达及其基因表达。结果FFA刺激24h后,模型组细胞内脂肪沉积明显,其TG含量显著高于正常组（P〈0．01）,同时上清中TNF-α含量、细胞内TNF-α的蛋白表达及其mRNA表达显著增强。而10％药物血清组细胞内TG含量及上清中TNF-α含量显著低于模型组（均P〈0．01）,其脂肪沉积、细胞内TNF-α的蛋白表达及其mRNA表达也明显轻于模型组。结论祛湿化瘀方对游离脂肪酸诱导的HepG2细胞脂肪沉积和TNF-α分泌有显著的抑制作用。     

祛湿化瘀方通过调节AMPK活性改善高脂饮食诱导的实验性脂肪肝肝脏脂肪代谢

目的:研究祛湿化瘀方对高脂饮食诱导的大鼠脂肪肝AMPK蛋白活性及其相关脂肪代谢靶蛋白活性的影响,以探讨该方防治实验性脂肪肝的作用机制。方法:采用高脂饲料饮食诱导大鼠脂肪肝模型,造模大鼠给予高脂饮食4周后,按随机数字表随机分为模型组及祛湿化瘀方组,分别灌胃给予饮用水及中药祛湿化瘀方4周。实验8周末取材后观察:1)肝组织三酰甘油(Triglyceride,TG)、游离脂肪酸(Free Fatty Acid,FFA)含量,2)肝组织病理变化(HE染色、油红染色),3)肝组织腺苷酸活化的蛋白激酶(AMP-Activated K inase,AMPK)及磷酸化AMPK、肝组织总蛋白及核蛋白固醇调节元件结合蛋白-1c(Sterol Regulatory Element Binding Protein-1c、SREBP-1c)、肝组织总蛋白及核蛋白碳水化合物反应元件结合蛋白(Carbohydrate Response Element Binding Protein、ChREBP)含量、肝组织乙酰辅酶A羧化酶(Acety1 Co A Carboxylase,ACCase)及磷酸化ACC蛋白含量,4)肝组织AMPKα1、AMPKα2、SREBP-1、ACCα、SREBP-1c及ChREBP基因表达水平。结果:1)模型组肝组织TG、FFA含量显著升高,肝组织出现明显大泡样脂肪变性;模型组肝组织AMPK蛋白磷酸化水平降低、核蛋白SREBP-1与ChREBP表达增加、ACC蛋白磷酸化水平降低蛋白活性升高。2)祛湿化瘀方组肝组织TG、FFA含量较模型组显著降低,肝组织炎症及脂肪变性程度减轻;祛湿化瘀方能显著升高肝组织AMPK、ACC蛋白磷酸化水平、降低核蛋白SREBP-1及ChREBP含量。结论:祛湿化瘀方通过调节AMPK活性及其相关靶蛋白活性改善高脂饮食诱导的大鼠脂肪肝肝脂肪代谢,这可能是该方有效防治实验性脂肪肝的重要作用机制之一。     

CCl4急性肝损伤肝SOD,MDA的动态变化及扶正化瘀方对其影响

目的：观察急性肝损伤时肝ＳＯＤ、ＭＤＡ的动态变化及扶正化瘀方（３１９方）抗肝损伤作用。方法：四氯化碳诱导大鼠急性肝损伤，检测各组损伤后２４ｈ、４８ｈ、７２ｈ的肝组织ＳＯＤ活性、ＭＤＡ含量及血肖ＡＬＴ、ＡＳＴ活性。结果：（１）损伤后ＳＯＤ活性下降，以４８ｈ为最低点，与ＡＬＴ呈负相关；（２）ＭＤＡ含量呈先低后高的变化；（３）扶正化瘀方可提高ＳＯＤ活性，降低ＭＤＡ含量。结论：生肝损伤时肝ＳＯＤ、ＭＤＡ水     

胆管上皮细胞增生在胆管结扎大鼠胆汁性肝纤维化形成中的作用

目的 研究胆管上皮细胞(biliary epithelia cells,BECs)增生在胆管结扎(bile duct ligation,BDL)大鼠胆汁性肝纤维化形成中的作用.方法 BDL的方法制作大鼠胆汁性肝纤维化模型,5周后杀鼠取材,观察内容包括大鼠血清总胆红素(TBlL)、总胆汁酸(TBA),肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量,组织病理学,免疫组织化学观测Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)、Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)、层粘蛋白(LN)、纤连蛋白(FN)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA);肝组织片激光显微切割(LCM)获取BECs,实时荧光定量PCR检测BECs表达Procollagen α1(Ⅳ)、血小板衍生生长因子B(PDGF-B)、结缔组织生长因子(CTGF)及转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA.结果 1、胆管结扎模型大鼠血清TBiL和TBA含量均值分别为假手术组大鼠的22倍和3倍(P＜0.01);模型组大鼠肝组织Hyp含量是假手术组的4倍(P＜0.01);2、模型组大鼠BECs增生非常显著,肝实质细胞比例显著减少;3、模型组大鼠在增生胆管周围的LM表达显著增加;FN不但在肝窦内有阳性染色,还强烈地表达于增生的胆管周围;肝窦壁的Col Ⅰ阳性染色增强,增殖的BECs周围未见明显阳性染色;肝窦壁ColⅣ表达未见明显变化,但强烈表达于增殖的BECs周围的基底膜上;α-SMA阳性染色见于汇管区周围的肌成纤维细胞上,且这些肌成纤维细胞常常围绕在增生的胆管上皮细胞周围.4、模型组大鼠BECs的Procol α1(Ⅳ)、PDGF-B、TGF-β1及CTGF的mRNA表达量均显著增加(与假手术组比较,均为P＜0.001).结论 BECs增生是BDL大鼠胆汁性肝纤维化的启动因素和中心病理环节,抑制胆管上皮细胞的异常增生及其细胞生物学病理变化应是抗胆汁性肝纤维化治疗学研究的主要目标.     

第16次全国中西医结合肝病学术会议纪要

第16次全国中西医结合肝病学术会议于2007年8月16-18日在浙江省宁波市顺利召开。本次大会由中国中西医结合学会肝病专业委员会主办,由浙江省中西医结合学会、上海中医药大学肝病研究所、宁波市肝病医院承办。大会共有参会论文267篇,其中大会专题报告12篇,大会报告16篇,壁报交流