抗CD25单克隆抗体对肾移植受者CD4~+ CD25~(high)调节性T细胞的影响

目的 评价抗CD25单克隆抗体对肾移植受者术后早期CD4~+ CD25~(high)调节性T细胞(CD4~+ CD25~(high)Treg)的影响.方法 2007年2-9月接受初次亲属活体供肾移植的受者41例,根据是否使用抗CD25单克隆抗体(商品名daclizumab)分为抗体组(21例)和对照组(20例).其中抗体组在肾移植术前2h及术后第14天分别给予抗CD25单抗各50mg.在移植前及移植后第13、17、60天分别留取肝素抗凝外周血15ml.应用流式细胞仪测定两组受者外周血CD4~+T细胞和CD4~+ CD25~(high)Treg比例的变化,半定量RTPCR检测CD25 mRNA的表达变化.结果 肾移植术后13、17、60d抗体组的CD25~+ T细胞占CD4~+ T细胞的比例(20%±8%、13%±7%、24%±9%)低于对照组(45%±6%、41%±5%、40%±6%),差异有统计学意义(P<0.05).抗体组术后第17天CD4~+ CD25~(high)Treg占CD4~+ T细胞的比例为4.40%±0.26%,明显低于对照组(8.56%±0.36%,P<0.01);而术后13、60d抗体组CD4~+ CD25~(high)Treg所占比例分别为7.00%±0.47%、3.75%±0.19%,与对照组(分别为8.04%±0.32%、3.66%±0.31%)比较差异无统计学意义(P>0.05).抗体组CD25 mRNA相对表达水平在给予第二次抗体前(术后第13天)为1.65±0.22,术后第17天为1.84±0.27,两者间差异无统计学意义(P>0.05).对照组术后第17天CD25 mRNA相对表达水平为1.70±0.23,与抗体组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 两剂共100mg抗CD25单抗仅一过性地降低CD4~+ CD25~(high)Treg,不会影响其活化扩增,无损于术后早期的免疫耐受诱导及维持.     

肾移植受者BK病毒感染情况分析

目的比较同时期亲属活体供肾移植(LD)受者与尸体供肾移植(DD)受者BK病毒的感染情况。方法纳入2015年1月至2019年8月期间解放军总医院第八医学中心器官移植研究所实施的实体器官肾移植受者911例,采用实时荧光定量PCR对肾移植受者尿液和外周血中的BK病毒DNA水平进行监测,根据供体来源不同分为LD组255例和DD组656例;比较LD组与DD组的BK病毒感染情况,探讨不同来源的供体对肾移植受者BK病毒感染的影响。结果所有研究对象BK病毒感染尿液检出率为13.06%(119/911),血液检出率为2.96%(27/911);肾移植术后BK病毒尿液检出率高于血液检出率(P<0.000 1);LD组中BK病毒感染尿液检出率为9.02%(23/255),明显低于同期DD组的14.63%(96/656),差异有统计学意义(χ2=5.097,P=0.012);LD组BK病毒感染血液检出率为0.78%(2/255),明显低于DD组的3.81%(25/656),差异有统计学意义(χ2=5.849,P=0.007)。结论不同来源的实体器官肾移植受者BK病毒感染率差异较大,DD来源的肾移植受者B...     

单细胞测序技术在肾移植领域的进展和前景

肾移植是治疗终末期肾病最有效的方法,但依然面临着许多难以解决的问题,其中移植排斥反应和移植术后感染依然是影响肾移植受者生存最主要的因素。免疫系统在移植排斥和移植感染中均发挥着至关重要的作用,但是其相关机制尚未完全阐明。单细胞测序技术的发展为解析移植排斥及感染过程中复杂的免疫调控网络提供了有效的技术方法,并将推动对移植免疫应答机制以及移植感染机制更为全面而深刻的理解。     

常用免疫抑制剂对Tfr细胞和Breg细胞的作用研究

目的  探讨常用免疫抑制剂对滤泡调节性T细胞(Tfr细胞)和调节性B细胞(Breg细胞)的作用。 方法  收集6例健康志愿者的外周血(每例5 mL), 采用人淋巴细胞分离液分离出淋巴细胞进行培养, 将细胞分为对照组(未加入免疫抑制剂)、环孢素组(250 ng/mL)、他克莫司组(10 ng/mL)和西罗莫司组(10 ng/mL), 分别用相应免疫抑制剂刺激48 h。用流式细胞仪检测各组淋巴细胞中Breg细胞和Tfr细胞的比例; 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组上清液中白细胞介素(IL)-21的含量。结果  与对照组比较, 环孢素组、他克莫司组和西罗莫司组淋巴细胞中Breg细胞的比例均升高, 差异均有统计学意义(均为P < 0.05);环孢素组和他克莫司组淋巴细胞中Tfr细胞比例均升高, 差异均有统计学意义(均为P < 0.05);西罗莫司组淋巴细胞中Tfr细胞比例下降, 差异亦有统计学意义(P < 0.05)。ELISA检测结果显示, 与对照组比较, 环孢素组和他克莫司组上清液中IL-21含量均下降, 差异均有统计学意义(均为P < 0.05);西罗莫司对IL-21分泌的影响不大, 差异无统计学意义(P > 0.05)。结论 环孢素和他克莫司具有抑制B细胞免疫反应的作用。     

肾移植免疫抑制剂研究进展

肾移植是终末期肾病的有效替代治疗方法,新型免疫抑制剂的应用极大提高了肾移植受者的存活率。新型免疫抑制剂的广泛应用促进了免疫抑制方案的改善和优化,术后急性排斥反应发生率不断降低和移植物短期存活率不断提高验证了免疫抑制剂发展的巨大成功。然而,其伴随的不良反应也逐渐显现。如何正确、高效、合理地应用免疫抑制剂是临床医师面临的新挑战。现从以T淋巴细胞为靶点的免疫抑制剂、以B淋巴细胞为靶点的免疫抑制剂、以补体为靶点的免疫抑制剂、以细胞因子为靶点的免疫抑制剂、以混合多克隆抗体为靶点的免疫抑制剂以及以多种细胞为靶点的免疫抑制剂的种类及机制等做一综述,从而为免疫抑制剂的选择应用提供理论基础。     

肺炎及上呼吸道感染患者血清氨基末端脑钠素前体与心肌酶谱测定的临床意义

目的：测定肺炎、上呼吸道感染患者血清中氨基末端脑钠素前体（NT-proBNP）、心肌酶谱水平，探讨其临床意义。方法：利用OLYMPUS AU600生化分析仪测定患者和对照组血清中心肌酶谱水平，在ANALYTICSE170光电免疫发光仪上对血清NT-proBNP的含量进行检测。结果：（1）肺炎组血清中NT-proBNP含量较对照组明显升高（P〈0，01），异常率为85，63％；心肌酶谱水平较对照组明显升高（P〈0，01），异常率按照LDH-L、CK、AST、HBDH、CK-MB依次降低，分别为48，28％、37，93％、30，05％、25，12％、15，76％。（2）上呼吸道感染组血清中NT-proBNP含量较对照组有所升高（P〈0.05），心肌酶谱中仅CK水平高于对照组（P〈0，05），AST、LDH-L、CK-MB水平无明显改变．异常率按照LDH-L、CK、HBDH、AST、CK-MB依次降低，分别为21，32％、15．85％、11．37％、10．23％、5．96％。结论：肺炎患者存在一定程度的心肌损伤，心肌酶谱升高是普遍的，可能是由病原体感染产生的毒素及疾病造成的组织缺氧引起．并不一定都是心肌炎或心肌损害所致，不排除其他器官组织的损害。上呼吸道感染患者心肌损伤较肺炎患者轻．可能同时发生骨骼肌的损伤。     

人类主要相容性抗原G的生物学功能与临床移植免疫

人类主要相容性抗原G是非经典人类主要相容性抗原Ⅰ类分子,其免疫抑制特性在临床中显示出两种相反的角色,在妊娠、移植状态下,它的表达下调了机体对胎儿、移植物的免疫反应,起保护作用;在肿瘤和病毒感染时,它的保护作用使得肿瘤细胞和病毒感染细胞逃避免疫系统的抗肿瘤、抗感染,对机体造成了危害。因此,在人类主要相容性抗原G未来的治疗应用中,应当基于两条思路：在器官移植、妊娠障碍方向,通过上调人类主要相容性抗原G及其衍生物的表达并增强其功能,创造一个免疫耐受的微环境,适于移植物、胎儿等的存活和发挥功能。相反,在肿瘤和病毒侵染细胞方向,需要打破肿瘤和病毒的免疫逃逸,对其进行免疫清除,通过RNA干扰封闭人类主要相容性抗原G的表达,或者通过使用人类主要相容性抗原G抗体中和其功能的发挥,毁灭肿瘤和病毒体内存活环境。     

器官移植受者外周血中人巨细胞病毒pp67-mRNA的RT-PCR检测

目的：探讨使用RT-PCR的方法对人巨细胞病毒pp67-mRNA检测的可行性。方法：对38例肾移植受者的外周血样本共68份分别进行免疫荧光技术检测pp65抗原和RT-PCR技术检测人巨细胞病毒pp67-mRNA。结果：在7例受者外周血中的13份外周血样本中检出pp65抗原阳性，并有1例诊断为HCMV病；在3例受者外周血中的3份外周血样本中检出pp67-mRNA阳性，其中包括2例受者的2份样本pp65抗原同时检出为阳性并有1例诊断为CMV病。结论：pp65抗原和pp67-mRNA检测结果不具有同一性，不能使用pp67-mRNA检测取代pp65抗原的检测。使用RT-PCR可以对人巨细胞病毒pp67-mRNA作出定性的判断。     

特异性体液免疫与传染性非典型肺炎患者病情的关系研究

目的：研究传染性非典型肺炎患者特异性体液免疫与其病情的关系。方法：采用间接酶联免疫法和双抗原夹心法检测不同病情SARS患者血清中特异性抗体。结果：间接法重症组SARS患者IgG的效价比轻症组高2．9倍，IgM的效价比轻症组高1．7倍；双抗原夹心法重症组SARS患者特异性抗体的效价比轻症组高2．6倍。可见两种血清学方法的检测结果均是重症组血清特异性抗体的效价显著高于轻症组；间接法重症组SARS患者IgG的阳性检出率比轻症组高58．2％，IgM高22．1％；双抗原夹心法重症组SARS患者特异性抗体阳性检出率比轻症组高53.9％。结论：SARS重症组血清特异性抗体效价显著高于轻症组；重症组血清特异性抗体阳性检出率显著高于轻症组。     

移植肾切除标本中C4d表达分析

目的 检测C4d在难治性排斥反应移植肾组织中的表达情况,分析体液免疫参与难治性排斥反应与移植肾长期存活的相关性.方法 以40例难治性排斥反应致移植肾切除患者为研究组(A组),20例移植术后因移植肾功能一过性异常行穿刺活检患者作为对照组(B组);应用C4d多克隆抗体对移植肾组织的石蜡切片行免疫组织化学染色,检测C4d在切除移植肾中的表达情况,分析2组标本中C4d的表达差异.结果 A组中检测到C4d阳性17例(42.5%),17例C4d阳性患者中存活时间＜5年的移植肾12例(70.6%),明显多于存活时间＞5年者的阳性数(5例,29.4%);B组中C4d阳性2例(10.0%),2组比较P=0.024.A组中受者男28例,女12例;年龄27～67岁,平均(39±10)岁;冷缺血时间6～12 min,热缺血时间170～720 min;免疫抑制方案为吗替麦考酚酯加环孢素加糖皮质激素19例、吗替麦考酚酯加他克莫司加糖皮质激素7例、硫唑嘌呤加环孢素加糖皮质激素14例;二次移植4例;31例术后仍有高血压.经t检验与X2检验,以上各因素与移植.肾C4d的阳性沉积无明显相关(P＞0.05).结论 体液免疫参与的难治性排斥反应是影响移植物长期存活的危险因素.