慢性阻塞性肺疾病患者红细胞膜脂质代谢的测定

慢性阻塞性肺疾病患者红细胞膜脂质代谢的测定肖庆忠陈涛陈柏铭陈顺存对慢性阻塞性肺疾病（ＣＯＰＤ）患者红细胞膜（ＲＢＣｍ）及血浆总胆固醇（Ｔ－ｃｈ）、载脂蛋白（ＡＰｏ）Ａ１、Ｂ１００进行测定分析，并同５５名健康人作对照。参照Ｄｏｄｇｅ和Ｐｅａｒｓｏｎ［１...     

麝香组分诱导成年大鼠骨髓间质干细胞体外定向分化为神经元样细胞的能力

【目的】探讨麝香组分体外诱导成年大鼠骨髓间质干细胞 (adultratbonemarrowmesenchymalstemcells,rBMM SCs)定向分化为神经元样细胞的能力。【方法】分别采用含麝香多肽或麝香酮的L DMEM培养基体外定向诱导第 5代至 10代的rBMMSCs,并分别应用相差显微镜观察神经元样细胞和免疫细胞组化检测神经元样细胞所表达的神经干细胞特异性标志 (nestin)、神经元特异性标志 [神经元特异性烯醇化酶 (neuronspecificenolase ,NSE)和神经丝蛋白 (neurofilament ,NF) ]及星形胶质细胞特异性标志 [胶质纤维酸性蛋白 (gliafiberacidprotein ,GFAP) ],并进行神经元样细胞记数分析。【结果】成年大鼠BMMSCs在加入含麝香多肽的无血清L DMEM培养基诱导后 ,发现细胞胞体收缩 ,突起伸出 ,形似神经元 ;免疫组化显示诱导出的神经元样细胞NSE、NF、nestin表达阳性 ,GFAP阴性。神经元样细胞记数分析发现 :rBMMSCs经过麝香多肽诱导后 ,NSE 神经元样细胞和NF H 神经元样细胞的比例分别高达 93 5和 88 2 %;而用含麝香酮的无血清L DMEM培养基却无上述变化。【结论】麝香多肽能在体外诱导rBMMSCs定向分化为神经元样细胞 ,而麝香酮却无此能力。从而可为神经组织工程和临床上各类神经疾病的神经移植及细胞替代治疗提供大量的种子细胞     

常见院内分离革兰阴性细菌分布及耐药性监测

目的　了解医院感染常见革兰阴性细菌分布变迁和耐药情况。方法　 2 0 0 1年 7月至 2 0 0 3年 2月该院临床分离菌用Kirby -Bauer法进行药物敏感试验 ,并按美国临床实验标准委员会 2 0 0 0年判断标准进行判断。结果　共分离出革兰阴性菌为 6 0 8株 ,前 3位细菌依次是 :大肠埃希菌占 35 9%、铜绿假单胞菌占 2 0 2 %、肺炎克雷伯菌占 15 8%。耐药性分析显示 :革兰阴性杆菌对临床常用抗生素的耐药率最低为亚胺培南 (0～ 4 2 6 % ) ,最高为奈啶酸 (4 3 5 %～ 10 0 % ) ,大部分细菌呈多重耐药。临床分离菌中产超广谱 β内酰胺酶 (ESBLs)菌株的检出率分别为 :大肠埃希菌为 2 9 8%、肺炎克雷伯菌为 39 6 %、铜绿假单胞菌为 5 7%、阴沟肠杆菌为 4 0 0 %、鲍曼不动杆菌为9 1%、奇异变形杆菌为 14 7%、嗜麦芽窄食单胞菌为 17 4 %。产ESBLs菌株对 2 3种临床常用抗菌药物的耐药率均显著高于不产ESBLs菌株。结论　细菌耐药性仍是目前临床最为严重的问题 ,需要各有关部门共同商讨有效对策。     

慢性阻塞性肺病红细胞膜和血浆胆固醇,脂蛋白（a）改变的探讨

对慢性阻塞性肺病（COPD）患者红细胞膜（RBCm）及总胆固醇（T—ch）脂蛋白（a）［Lp（a）］进行测试分析，并同55名健康人作对照比较。结果显示：慢性阻塞性肺病患者RBCm的T－ch、Ip（a）明显高于健康组（P＜0．001）；血浆Lp（a）明显高于健康组（P＜0．05）。作者还同时测定了血浆镁离子（Mg2+）、尿酸门则含量，结果显示：慢性阻塞性肺气肿、慢性肺源性。脏病患者M乡明显降低，而UA明显升高（P＜0．05），慢性支气管炎组无显著性差异。从而提示COPD病人存在脂蛋白、Mg2+、UA的代谢紊乱。     

天麻诱导骨髓间质干细胞分化为神经元样细胞的实验研究

目的：探讨天麻对体外定向诱导大鼠骨髓间质干细胞(MSC)分化为神经元样细胞的影响：方法：通过贴壁法分离大鼠MSC,体外扩增培养。中药天麻定向诱导分化为类神经元样细胞光镜下观察细胞形态,免疫细胞化学法检测神经细胞特异性抗原标志物神经原烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、巢蛋白(Nestin)。结果：大鼠MSC可通过贴壁法成功分离并可在体外大量扩增。天麻诱导2h后大部分可分化为神经元样细胞,出现胞体和突起,免疫细胞化学染色NSE、Nestin呈阳性,GFAP阴性。结论：大鼠MSC可诱导分化为神经元样细胞。     

中药诱导大鼠骨髓间质干细胞分化的实验

背景体外定向诱导分化可使骨髓间质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)转化为成骨细胞、脂肪细胞、软骨、肌肉细胞、神经元样细胞等,而中药是否能对大鼠骨髓间质干细胞有诱导分化作用呢?目的研究SD大鼠MSCs体外扩增培养及用中药定向诱导分化为神经元样细胞的功效.设计以细胞为研究对象,重复观察测量,探索性研究.单位一所医学院病理生理学教研室.材料实验用骨髓取自经检验健康的SD雄性大鼠.方法通过贴壁法分离大鼠MSCs,体外扩增培养,流式细胞仪检测其表面抗原表达,多种中药成分定向诱导MSCs分化为神经元样细胞.光镜下观察细胞形态,免疫细胞化学法检测神经细胞特异性抗原标志.主要观察指标①MSCs分离和扩增结果.②MSCs表面抗原及神经元样细胞鉴定结果.结果大鼠MSCs可通过贴壁法成功分离并可在体外大量扩增.流式细胞仪检测结果显示CD14,D11α,D34,D38,D45,D80,D86为阴性,D29,D44,D90,D105,D166呈阳性.黄芪、天麻、人参、当归、脑新舒、人参蜂王浆等多种中药诱导1～3 h后大部分MSCs转变为神经元样细胞,出现胞体和突起,免疫细胞化学染色神经元特异性烯醇酶、巢蛋白呈阳性,胶质纤维酸性蛋白阴性.结论SD大鼠骨髓间质干细胞是具多向分化潜能的细胞,具有较强的增殖、自我更新能力.在适宜的诱导条件下,可以分化为神经元样细胞.     

广州地区52株流感嗜血杆菌对6种抗生素体外抗菌活性分析-Etest法

目的调查广州地区流感嗜血杆菌对6种抗生素的体外活性,以了解广州地区流感嗜血杆菌的耐药性并指导临床合理使用抗生素. 方法采用Etest法测定从呼吸道感染标本中分离到的52株流感嗜血杆菌对6种抗生素药敏试验. 结果流感嗜血杆菌对6种抗生素的体外药敏结果依次为:头孢噻肟MIC900.023 mg/L、MIC500.016 mg/L;左氧氟沙星MIC900.064 mg/L、MIC500.032 mg/L;亚胺培南MIC901.5 mg/L、MIC500.5 mg/L;阿奇霉素MIC904 mg/L、MIC503 mg/L;氯霉素MIC900.75 mg/L、MIC500.38 mg/L;氨苄西林MIC90256 mg/L、MIC500.5 mg/L. 结论广州地区流感嗜血杆菌对头孢噻肟、左氧氟沙星、氯霉素、亚胺培南、阿奇霉素的耐药率低,其可作为临床治疗流感嗜血杆菌感染的首选药物,而对氨苄西林的耐药率较高,其作为临床治疗流感嗜血杆菌首选药物的传统地位受到了严重挑战.     

单纯疱疹病毒荧光标记单克隆抗体的制备及临床应用

目的：为了了解所制备的单纯疱疹病毒荧光标记单克隆抗体的临床应用价值。方法：本研究利用杂交瘤技术制备了多株抗单纯疱疹病毒型共有及型特异性单克隆抗体（6B3－2－5、，Da5,5B4-6)，并通过BALB／C鼠体内诱生制备了较大量的单抗，经去脂澄清处理，利用辛酸－硫酸铵二步法纯化了单抗，经SDS－PAGE及薄层扫描分析显示其纯度，在pH9.0-9.5条件下，采用低温袋内透析法标记了单抗5H4－6及6B3－2－5，然后经透析及SephedexG-50柱去除游离荧光素，标记单抗采用直接免疫荧光法（DFA）检测各类临床标本110份及正常标本26份，并与间接免疫荧光法（IFA）及组织培养分离法作了初步比较，结果：1．纯化后的各单抗在解链状态下为二条链，一条为轻链，分子量各为20．6KD（5B4－6），24．6KD（6D3－2－5）及26．1KD（Da5)，一条为重链，分子量各为57．8KD（5B4－6），54．8KD（6B3－2－5）及52．7KD（Da5)，由此推算出其单抗分子量各为157KD，159KD，158KD，纯化回收率各为43．77％，47．21％及38．8％，2．标记单抗F／P值各为1．4及1．46，利用（DFA）法测定其效价各为1：32及1：16，。6．DFA与IFA的符合率达100％，而以组织培养法为“金标准”，其敏感性，特异性，阳性预测值及阴性预测值各为94％，95％，94％及95％，结论：这些单抗具有较好的应用价值。值得进一步研究及开发应用。     

供者源性的骨髓间质干细胞对急性移植物抗宿主病的影响

目的:采用大鼠骨髓移植模型探讨共移植供者源性的骨髓间质干细胞(MSCs)对骨髓移植后急性移植物抗宿主病(GVHD)的影响。方法:体外培养Fisher344大鼠骨髓间质干细胞,扩增至第5代用于移植。建立大鼠异基因急性GVHD模型(F344→Wistar)。受者Wistar大鼠采用致死性全身照射预处理,当天移植F344大鼠骨髓细胞和脾细胞。实验组则移植F344大鼠骨髓细胞、脾细胞和第5代的MSCs。观察各组移植后急性GVHD的发生时间、发病率和存活时间。结果:共移植MSCs推迟急性GVHD的发病时间,延长该组的存活时间,但无法完全消除急性GVHD的发生。结论:MSCs在体内具有免疫抑制功能,供者来源的MSCs在不使用免疫抑制剂情况下,可推迟急性GVHD的发病时间和延长受者的存活时间。     

广州地区呼吸道感染产超广谱β-内酰胺酶基因分型研究

目的：调查广州地区下呼吸道感染产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的分离率及各种基因型的流行分布。方法：收集广州地区13家医院2000-10～2001-12临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌共714株．采用美国临床实验室标准化委员会规定的ESBL表型筛选和确证试验确定ESBL的发生率、PCR扩增对产。ESBL菌初步分型，然后对部分PCR扩增阳性产物测序．序列分析进一步确定基因型。结果：大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBL分离率分别为58．1％和40．1％；TEM型161株(49．8％)，均为TEM-1型．CTX-M型107株(33．1％)．SHV型141株(43．6％)。结论：CTX-M型和SHV型是广州地区下呼吸道感染产ESBL大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中流行的基因型。