鸡胚法分离福建省甲型H1N1流感病毒及分离株特征

目的建立甲型H1N1流感病毒鸡胚分离方法,了解病毒分离株特征,为疫苗制备和开展实验室常规监测等奠定基础。方法呼吸道标本接种鸡胚尿囊腔;血凝(HA)法测定收获的尿囊液中病毒滴度;逆转录PCR法检测病毒亚型特异性。使用甲醛灭活鸡胚分离物,灭活效果采用鸡胚接种法评价。血凝抑制(HI)实验检测急性期和恢复期血清,评价检测病毒感染后的免疫应答情况。结果从13份患者的呼吸道标本中分离出12株甲型H1N1流感病毒。多数病毒可在第二次传代鸡胚中分离到。病毒分离株的血凝滴度较低,为1∶1～16。阳性分离物再次接种鸡胚无法显著提高其HA效价。同鸡和人"O"型红血球比较,使用豚鼠红细胞可得到更高的血凝滴度。1‰甲醛可在24h内完全灭活病毒,但同时病毒的HA效价显著降低。病毒感染后,恢复期的HI滴度较急性期有2～16倍升高,HI抗体4倍增长需要约3w时间。结论鸡胚分离可应用于甲型H1N1流感病毒的分离,病毒的HA滴度较低。尽管甲醛可迅速灭活病毒,但灭活后病毒抗原血凝效价难以维持。病毒感染后,特异性血凝抗体产生较慢,同时滴度较低。基层实验室采用豚鼠血球更适合于病毒的HA滴度测定。     

不同型别登革病毒融合外膜基因重组腺病毒的构建及表达

目的构建登革病毒1型和2型外膜蛋白(E蛋白)DⅢ区融合基因的重组腺病毒,在BHK-21细胞中表达。方法用PCR法扩增登革病毒1型和2型EDⅢ基因,依次克隆入pCDNA3.1(+),构建重组质粒pCDNA-D1/D2EDⅢ。以此为模板,扩增包含CMV启动子-D1/D2EDⅢ-BGHpA的表达片段,与pENTR4载体连接形成质粒pENTR4-D1/D2EDⅢ,与pAd/PL-DEST进行体外同源重组,形成重组腺病毒载体pAd-D1/D2EDⅢ,在293A细胞系中包装成具有感染性的重组腺病毒,进一步感染BHK-21细胞,用间接免疫荧光法和Westernblot法检测重组蛋白在细胞中的表达情况。结果重组腺病毒构建成功,转染293A细胞后获得2×109pfu/mL滴度的重组腺病毒,感染哺乳动物细胞后能够表达1型和2型EDⅢ区目的蛋白。结论不同型别融合基因的重组腺病毒表达载体能有效地表达相应型别的目的蛋白,为进一步构建单一的四价重组腺病毒应用于登革疫苗研究奠定基础。     

美国《Emerging infectious diseases》2006年第6期有关人兽共患病论文摘译

秘鲁和玻利维亚儿童体内共生的大肠杆菌多重耐药性研究；预防人兽间流感病毒感染；从鼠到猴．荷兰发生牛痘病毒传播；人和马中的西尼罗病毒感染；     

应用RT-nested-PCR检测犬唾液中狂犬病毒的初步研究

目的建立RT-nested-PCR方法,用于检测可疑狂犬唾液中的狂犬病毒,为狂犬病的快速诊断提供一种新思路。方法根据N基因的保守区序列设计2对引物,通过反应条件的优化,建立RT-nested-PCR的方法,以扩增狂犬病毒的N基因,并用该方法检测可疑狂犬唾液中的狂犬病毒。结果该方法的最小RNA检出量可达11.2fg,并具有较好的特异性和重复性。结论建立的RT-nested-PCR检测法,特异性强,敏感度高,结果可靠,操作便捷,值得推广应用。     

海产鱼类养殖场鼠害调查及控制初探

[目的]调查海产鱼类养殖场(鱼排)的鼠害情况及鱼排鼠类控制的研究。[方法]采用新鲜甘薯块和鼠笼法调查鱼排鼠类构成,鼠密度及灭鼠率;用毒鼠盒法,以溴敌隆大米毒饵灭鼠。[结果]鱼排鼠类全为褐家鼠,鼠密度9.8%。经两轮灭鼠,灭鼠率达到94.0%。     

无菌性脑膜炎暴发中病原学检测及埃柯30型肠道病毒的基因特征和分子进化分析

目的 了解引起福建省泉州地区2011年无菌性脑膜炎暴发疫情的埃柯30型肠道病毒(echovirus 30,ECHO30)病原及基因特征,分析基因变异情况及进化来源。 方法 对泉州市2011年无菌性脑膜炎暴发疫情中的临床样本采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(rRT-PCR)方法进行肠道病毒通用型、肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A组16型(Cox A16)核酸检测,随机选5份阳性样本进行肠道病毒VP1区核苷酸序列测定,将测序所得VP1序列用BLAST程序在GenBank上序列搜寻比对,确定其基因型, 并通过构建进化树分析其遗传进化规律。 结果 47份样本经rRT-PCR检测,有39份非EV71和Cox A16的其他肠道病毒核酸阳性, 5份阳性样本的肠道病毒VP1区核苷酸序列均为876 bp,且同源性最高,均大于98.9%,最高仅相差一个核苷酸,与它们具有较高同源性的均是ECHO30。与本次分离株亲缘关系最近的一组ECHO30分别是2008年河南省和浙江省的分离株,与中国台湾2001年无菌性脑炎分离株以及印度2011年分离株则距离较远;原型株Bastianni和20世纪90年代美国分离株和本次分离到的ECHO30毒株距离最远。 结论 2011年ECHO30在泉州地区发生一定程度的传播流行,并导致无菌性脑膜炎疫情的局部暴发流行,进化树分析表明本次分离株与国内近年ECHO30分离株亲缘关系较近,而与国外分离株则相对较远。     

美国《Emerging Infectious Diseases》2014年第4期有关人兽共患病论文摘译

P532 1997年3月-2011年5月非洲感染的与旅行相关疾病的区域差异／／Marc Mendelson，Pauline V．Han，Peter Vincent，等 为了解非洲不同地区感染的与旅行相关疾病的区域差异，我们采用监测网络数据库分析了14年间从非洲返回的患病旅客16893例。结果显示，到非洲北部的旅客最常见的是胃肠道疾病和狗咬伤。与其它地区相比，从撒哈拉以南地区返回的旅客中发热性疾病更常见。11名死亡旅客中有9个死于疟疾，     

弓形虫P30基因在大肠杆菌中的表达研究

将编码弓形虫主要表面膜抗原（Ｐ３０）基因插入原核表达载体ｐＧＥＭＥＸ１的Ｔ７启动子下游,构建的重组质粒ｐＧＥＭＥＸ１／Ｐ３０转入宿主菌Ｅ．ｃｏｌｉＢＬ２１（ＤＥ３）。用ＩＰＴＧ诱导Ｐ３０基因表达,ＳＤＳＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ实验表明重组子能够表达３０ｋＤ蛋白,表达产物可以和兔抗弓形虫阳性血清特异性结合,具有较好的免疫原性。     

福建省2013-2015年流感监测哨点医院工作质量评价

目的 评价福建省近年来流感监测哨点医院工作质量,进一步强化全省流感监测网络的管理工作.方法 从中国流感监测信息系统导出2013年至2015年福建省21家哨点医院上报告的流感样病例(ILI)监测数据,联合应用逼近理想解排序法(TOPSIS)和秩和比法(RSR)分析5项评价指标,对监测质量排序,由高到低分为A、B、C和D档.结果 评价表明,监测质量A、B、C、D档任意两个档次间的医院工作质量差异均有统计学意义(方差分析SNK法);3年来达到A、B档的医院由47.6％升至71.4％,连续保持A档的仅南平及厦门的部分哨点医院;大部分哨点医院的工作质量逐年提升,尤其是龙岩两家医院在2015年均达到A档;仍有个别哨点医院的监测质量下滑.结论 福建省流感监测哨点医院工作质量整体在提升,仍有部分医院的监测管理与督导须进一步强化.