“血清药理学”与“血浆药理学”

血清药理学实验中应注意凝血后离心制备血清 ,否则可能是“血浆药理学” ,尤其是在做一些含抗凝成分的中药时更是如此     

丹参酮ⅡA对C6胶质瘤细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用

目的：探讨丹参酮ⅡA对大鼠胶质瘤细胞株C6的增殖抑制作用及其作用机理。 方法： 应用MTT比色法检测不同浓度丹参酮ⅡA对C6细胞的增殖抑制，应用流式细胞仪观察丹参酮ⅡA对C6细胞周期的影响，应用琼脂糖凝胶电泳观察C6细胞DNA的变化，应用RT-PCR观察相关基因c-myc表达的变化。 结果： 丹参酮ⅡA对C6细胞增殖抑制作用呈剂量依赖性。细胞周期分析显示：用1.0 mg/L丹参酮ⅡA作用C6细胞，在作用72 h出现凋亡峰，凋亡细胞占细胞总数7.7%；用2.0 mg/L丹参酮ⅡA作用C6细胞，在作用72 h出现凋亡峰，凋亡细胞占细胞总数21.6%。琼脂糖凝胶电泳结果显示：一定剂量丹参酮ⅡA作用后，C6细胞具有明显的凋亡特征，细胞核DNA呈梯状降解。RT-PCR结果显示：随着丹参酮ⅡA作用剂量的增加，c-myc基因的表达被明显抑制。 结论： 丹参酮ⅡA对大鼠胶质瘤细胞系C6的增殖具有明显的抑制作用及诱导凋亡的作用，并对原癌基因c-myc的表达具有抑制作用。     

人参皂苷Rg1对脂多糖诱导的C6细胞株淀粉样前体蛋白和脑啡肽酶表达的影响

目的:为寻找治疗阿尔茨海默病的有效药物,探讨人参皂苷Rg1对脂多糖(LPS)诱导的C6细胞株淀粉样前体蛋白(APP)和脑啡肽酶(NEP)表达的影响。方法:应用MTT比色法检测一定剂量LPS(100 mg·L^-1)和不同浓度人参皂苷Rg1(2.5、5、10、20 μmol·L^-1)对C6细胞存活率的影响,应用RT-PCR观察细胞中APP、NEP表达的变化。结果:LPS作用于C6细胞株,C6细胞存活率下降,细胞内APP的表达增加,NEP的表达降低。人参皂苷Rg1能提高LPS处理的C6细胞存活率,使细胞内APP的表达降低,NEP的表达升高。结论:LPS造成细胞损伤和细胞内APP表达增加、NEP表达降低,人参皂苷Rg1对LPS造成的细胞毒性具有拮抗作用,可减弱LPS引起的细胞内APP表达增强,减轻LPS对细胞内NEP表达的抑制。     

沉默突触的激活机制及其功能意义

沉默突触（silent synapse）是指具有突触结构,但在生理情况下没有传递功能的突触。沉默突触在某些情况下能转变为功能性突触并能增加突触联系（即能与其他末梢形成新的突触）。突触功能与结构上的变化统称为突触的可塑性,它的这一性质与神经修复、记忆改善等过程密切相关。所以,研究沉默突触的形成、功能、激活机制等,意义重大。     

广东海风藤挥发油化学成分研究

用气相色谱－质谱法对广东海风藤药材挥发油进行化学成分分析，鉴定出了其中36个成分，并以归一化法测定了各个成分的百分含量。结果表明：广东习用海风藤药材和药典收载海风藤药材的挥发油化学成分有显著差别。     

原儿茶酸对M146L细胞APP mRNA表达的抑制作用

目的:探讨原儿茶酸对M146L细胞APP mRNA表达的影响,寻找潜在的具有抑制Aβ分泌的中药单体,以达到治疗阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)的目的。方法:体外培养稳定转染人类阿尔茨海默病β淀粉样蛋白前体(amyloidβ-protein precursor,APP)基因及突变型早老素1(prsenilin-1,PS1)基因的CHO(Chinese hamsterovary cells)细胞系(M146L),使之高效产生β淀粉样蛋白42(amyloidβ-protein,Aβ42),建立Aβ42过度表达的细胞模型。加入待筛选的药物原儿茶酸,用MTT比色法检测不同浓度的原儿茶酸(0.25、0.5、1.0、2.0 mmol/L)对M146L细胞的毒性作用,应用RT-PCR法检测原儿茶酸对M146L细胞APP mRNA表达的影响。结果:浓度0.25、0.5、1.0mmol/L的原儿茶酸对M146L细胞存活率无明显影响,不具有细胞毒性作用,对M146L细胞APP mRNA表达有抑制作用,并呈剂量依赖性。结论:一定剂量的原儿茶酸对M146L细胞APP mRNA表达有明显的抑制作用,其机制有待进一步研究。     

四妙散及其加减方对高尿酸合并高脂血症大鼠的影响及机理探讨

目的研究四妙散及其加减方对高尿酸合并高脂血症大鼠血清尿酸、血脂指标以及黄嘌呤氧化酶(XOD)、黄嘌呤脱氢酶(XDH)、超氧化物岐化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的影响。方法 SD大鼠40只,随机分为正常对照组、模型组、四妙散组(10g·kg~(-1),按生药量计)、四妙散加减方组(13g·kg~(-1),按生药量计),每组10只。采用腺嘌呤+氧嗪酸钾+高糖高脂饲料制备高尿酸合并高脂血症大鼠模型。给药30d,戊巴比妥钠麻醉,采血并分离血清测定尿酸(UA)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、总胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)的水平;取肝组织匀浆测定XOD、XDH、SOD活性及MDA含量,取肾组织匀浆测定SOD活性及MDA含量;取肾脏切片,HE染色观察肾组织形态。结果与模型组比较,四妙散及其加减方组大鼠血清代谢指标均有不同程度的改善;四妙散加减方能显著降低血清UA、CHO、TG水平(P0.05),升高HDL水平(P0.05),显著降低肝组织XOD、XDH水平(P0.05),显著升高肝、肾组织中SOD水平(P0.05),降低肝、肾组织中MDA含量(P0.05)。结论四妙散加减方具有降尿酸和降血脂的功效,其机制可能与其抑制XOD、XDH活性及增强SOD活性相关。     

大黄素甲醚对体外新生大鼠皮质神经元的营养作用

目的研究大黄素甲醚对新生大鼠皮质神经元的神经营养作用。方法体外以0.4%B27+DMEM/F12培养出生24h内的大鼠皮层神经元。采用NSE免疫细胞化学染色法进行神经元鉴定。分为溶媒对照组,大黄素甲醚(0.5、1、2、4μmol/L)组和碱性成纤维细胞生长因子bFGF(10 ng/mL)组。显微镜观察各组皮质神经元的形态,利用软件统计神经元平均突起长度;MTT法检测神经元的存活情况;RT-PCR检测MAP-2表达量。加入Trk受体抑制剂或腺苷受体抑制剂单独作用或与大黄素甲醚相互作用,检测突起长度变化。结果与溶媒对照组相比,培养3d后的大黄素甲醚1、2、4μmol/L剂量组均可延长神经元的存活时间,促进神经元突起生长,增加MAP-2 mRNA的表达量。加入Trk受体抑制剂能抑制大黄素甲醚对神经元的影响,而加入腺苷受体抑制剂则无影响。结论大黄素甲醚对新生大鼠皮层神经元具有神经营养作用。     

大黄素甲醚对新生大鼠皮质神经元营养作用的靶点研究

目的探讨大黄素甲醚(physcion,Phy)对新生大鼠皮质神经元营养作用的靶点。方法选用与神经营养作用相关的工具药酪氨酸激酶Trk受体抑制剂K252a、腺苷A2a受体抑制剂ZM241385及蛋白激酶C抑制剂G6976,实验设溶媒对照组、抑制剂组、Phy组、抑制剂+Phy组,四甲基偶氮唑蓝法分析各抑制剂对神经元存活的影响,倒置显微镜下观察神经元突起生长情况,Image-pro plus 6.0软件测量突起长度,分析各抑制剂能否拮抗Phy促进突起生长的作用,初步推断Phy对皮质神经元神经营养作用的靶点。结果溶媒(0.1%DMSO)对照组、K252a(100μmol/L)组、ZM241385(20 nmol/L)组和G6976(100μmol/L)组的神经元活性分别与空白对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.01)。K252a(100μmol/L)+Phy组神经元平均突起长度与Phy组比较,差异有统计学意义(P<0.01);而ZM241385(20 nmol/L)+Phy组、G6976(100μmol/L)+Phy组与Phy组比较,神经元平均突起长度差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 Phy对新生大鼠神经元的神经营养作用可被酪氨酸激酶Trk受体抑制剂K252a阻断,而腺苷A2a受体抑制剂ZM241385和蛋白激酶C抑制剂G6976的阻断作用则不明显,提示Phy神经营养作用的靶点可能是Trk受体,即Phy通过激动Trk受体而发挥神经营养作用的。