NMDA受体在发育过程中的表达及其生理意义

在脊椎动物的中枢神经系统中，谷氨酸是一种重要的兴奋性神经递质，它在脑中的众多功能是由不同的受体所介导的。谷氨酸受体可分为离子型（ｉｏｎｏｔｒｏｐｉｃ）和代谢型（ｍｅｔａｂｏｔｒｏｐｉｃ）两大类。离子型谷氨酸受体即为配体门控性离子通道（ｌｉｇａｎｄ－ｇ...     

脂质体作为钩端螺旋体抗原载体、佐剂的研究

自黄疸出血群赖型70091株钩体提取了红细胞致敏物(ESS)和脂多糖(L-LPS)两种抗原成分。将它们分别与脂质体组装,形成新的钩体免疫制剂。通过金地鼠的保护力试验和家兔的抗体反应的检测,研究两种抗原的免疫原性和脂质体的免疫增强作用。结果表明,DPPC:Chol:DCP 脂质体能显著增强ESS的免疫原性。单纯ESS在每只地鼠40μg剂量时,只获36.7％的存活率,而脂质体-ESS则达到96.6％,并且这一活性依赖于ESS与脂质体在结构上的组装。该制剂还能增强家兔的抗体反应。此外,经脂质体-ESS制剂保护的存活金地鼠作肾培养,未发现有钩体带菌者。在本实验条件下,无论用单纯的或与脂质体组装的钩体LPS,直接免疫金地鼠,均未获得良好的保护力;然而用L-LPS免疫的兔血清对金地鼠则有良好的被动保护作用。     

中国人语前非综合征性耳聋患者GJB2基因的突变分析

目的 分析中国人语前非综合征性耳聋（ＮＳＨＩ）患者ＧＪＢ２基因编码区的突变。方法 采取来自浙江地区４３个独立家系的４３例语前ＮＳＨＩ患者（包括隐性遗传和散发性）血样,用３对引物经聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增ＧＪＢ２基因,产物依次部分重叠覆盖全部编码区１～６８１ｂｐ片段;用单链构象多态性（ＳＳＣＰ）分析法进行突变筛选,部分异常带型的ＰＣＲ产物经Ｔ克隆、ＤＮＡ测序以明确突变方式;对有ＧＪＢ２基因突变的部     

N-甲基-D门冬氨酸受体复合物亚单位蛋白的组成及其在发育过程中表达的研究

本研究通过用重组DNA技术制备NMDA受体亚单位融合蛋白并免疫动物获得相应的特异性抗体,采用定量免疫印迹技术系统研究了大鼠、小鼠和人类不同脑区NMDA受体亚单位NR1、NR2A及NR2B在不同发育阶段的表达。并经免疫沉淀和定量免疫印迹分析,获得了有关天然NMDA受体亚单位组成的结果:成年大鼠皮层组织的主要受体亚型     

人细胞色素P450 1A1与谷胱甘肽S-转移酶的融合蛋白及其抗体的制备

采用融合蛋白技术原核表达CYP1A1（第241-381个氨基酸）与谷胱甘肽S-转移酶（GST）的融合蛋白作为抗原,用于制备CYP1A1多克隆抗体. 根据正反重组质粒pGEX/1A1表达的融合蛋白大小不同的原理,直接表达筛选得到正向重组质粒pGEX/1A1. 通过优化表达条件, 提高了目的蛋白的表达水平. 包涵体蛋白经制备型聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）分离, 获含纯化融合蛋白GST-1A1的PAGE凝胶. 直接用含GST-1A1的凝胶悬液免疫BALB/c小鼠,自腹水中获取CYP1A1多克隆抗体（1A1pAb）. 1A1pAb用切胶纯化的融合蛋白GST-2B6交叉吸收,蛋白A- Sepharose亲和层析柱来纯化. 用切胶纯化的融合蛋白GST-1A1及GST-2B6的免疫印迹反应初步鉴定1A1pAb的特异性. 纯化的1A1pAb对融合蛋白GST-1A1反应特异性较强,但仍对GST-2B6有弱交叉反应. 在实际应用中可根据反应强度来加以区分.     

人细胞色素P450 1A1与谷胱甘肽S-转移酶的融合蛋白及其抗体的制备

采用融合蛋白技术原核表达 CYP1 A1 (第 2 4 1- 381个氨基酸 )与谷胱甘肽 S-转移酶 (GST)的融合蛋白作为抗原 ,用于制备 CYP1 A1多克隆抗体 .根据正反重组质粒 p GEX/ 1 A1表达的融合蛋白大小不同的原理 ,直接表达筛选得到正向重组质粒p GEX/ 1 A1 .通过优化表达条件 ,提高了目的蛋白的表达水平 .包涵体蛋白经制备型聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)分离 ,获含纯化融合蛋白 GST- 1 A1的 PAGE凝胶 .直接用含 GST- 1 A1的凝胶悬液免疫 BALB/ c小鼠 ,自腹水中获取 CYP1 A1多克隆抗体 (1 A1 p Ab) . 1 A1 p Ab用切胶纯化的融合蛋白GST- 2 B6交叉吸收 ,蛋白 A- Sepharose亲和层析柱来纯化 .用切胶纯化的融合蛋白 GST- 1 A1及 GST-2 B6的免疫印迹反应初步鉴定 1 A1 p Ab的特异性 .纯化的 1 A1 p Ab对融合蛋白 GST- 1 A1反应特异性较强 ,但仍对 GST- 2 B6有弱交叉反应 .在实际应用中可根据反应强度来加以区分     

人脐血间充质干细胞尾静脉移植治疗扩张型心肌病

背景：体外研究表明人脐血间充质干细胞可分化为自律性跳动的心肌细胞,而经静脉移植人脐血间充质干细胞治疗扩张型心肌病心力衰竭的报道较少。 目的：探讨经尾静脉移植人脐血间充质干细胞对扩张型心肌病大鼠心肌结构、心功能的影响。 方法：Wistar大鼠通过腹腔注射阿霉素诱导扩张型心肌病模型,扩张型心肌病实验组于造模后8周经尾静脉移植人脐血间充质干细胞,扩张型心肌病对照组注射等量DMEM培养基。健康对照组不造模,于相同时间点注射等体积的生理盐水。 结果与结论：与健康对照组相比,扩张型心肌病组心功能明显受损,且扩张型心肌病实验组受损较扩张型心肌病对照组轻;移植的细胞有肌钙蛋白T的表达。结果提示人脐血间充质干细胞移植能促进扩张型心肌病大鼠心功能恢复,使心肌组织病变减轻。     

惊厥和亚惊厥剂量戊四唑对大鼠脑内NMDA受体亚单位蛋白表达的影响

目的:研究不同剂量戊四唑刺激对大脑皮层内N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体NR1、NR2A和NR2B 3种亚单位表达量的影响.方法:腹腔注射亚惊厥剂量(35 mg/kg)和惊厥剂量(50 mg/kg)的戊四唑,注射后不同时间点分离大脑皮层,用免疫印迹法检测NMDA受体NR1、NR2A、NR2B 3种亚单位的蛋白含量.结果:注射戊四唑亚惊厥剂量和惊厥剂量组大鼠的行为学差异非常显著(P＜0.001),但NMDA受体3种亚单位仅NR2A亚单位在1 h点有显著性增高,且惊厥剂量组NR2A的表达量比亚惊厥剂量组高(P＜0.05).惊厥剂量组NR2A和NR2B表达有先增加再降低然后恢复至正常水平的趋势,而NR1亚单位改变不明显.结论:戊四唑引起惊厥的机制可能与戊四唑首先影响NR2亚单位蛋白的表达,以调节NMDA受体的功能有关.     

乳腺癌延期手术的疗效分析(附90例病例分析)

乳腺癌延期手术的疗效分析（附９０例病例分析）湖南省肿瘤医院（４１０００６）周征宇罗建红李炳华女性乳腺癌的发病率近年有明显的上升趋势［１］，影响乳腺癌预后的因素甚多。我院１９８２年１月至１９８６年１２月间共收治可手术女性乳腺癌４５０例，其中延期手术病例...