利用果蝇模型研究帕金森病的发病机制

帕金森病（Parkinson′s disease PD)是发病率仅次于阿尔兹海默症的一类神经退行性疾病,其基本病理特征是黑质致密区多巴胺(DA)神经元变性伴胞浆内嗜酸性包涵体即Lewy小体形成,导致尾状核、壳核中DA含量减少及黑质纹状体通路破坏。迄今为止,导致多巴胺能神经元退变的原因仍不十分清楚。目前与家族性PD有关的基因位点已经发现了13个,其中鉴定并报道有突变的有6个：α-SYN(PARK1/4)、Parkin(PARK2)、UCHL1(PARK5)、PINK1(PARK6)、DJ-1(PARK7)和LRRK2(PARK8)。果蝇因其遗传学上的优势而被广泛地应用于人类疾病的研究。果蝇神经系统DA的合成与人类类似,同时果蝇的DA系统也参与了运动控制,因此,目前普遍认为,果蝇DA神经元的死亡导致运动功能障碍与PD发病的情况具有可比性。果蝇含有Parkin,PINK1、DJ-1和LRRK2等PD发病相关基因的同源基因,因此它是一种非常重要的PD模型。文中综述了目前以果蝇模型为主要方法研究PD发病机制的最新进展。     

NMDA受体NR2B亚单位特异性单克隆抗体的制备及人胚脑皮层NR2B蛋白表达的研究

目的：制备NMDA受体NR2B亚单位特异性单克隆抗体，并对人胚脑皮层NR2B的表达作免疫印迹分析。方法：制备NR2BC末端934～1457氨基酸与GST的融合蛋白，并以此作为免疫原，经常规杂交瘤技术制备单克隆抗体。用该抗体对不同周龄的人胚脑皮层的NR2B蛋白作免疫印迹分析。结果：本研究制备的NR2B单克隆抗体能特异地识别180kDa的NR2B蛋白，并首次发现人胚脑皮层NR2B亚单位蛋白的表达。结论：成功制备了NR2B特异的单克隆抗体；12周龄的人胚脑皮层组织已有NR2B的表达，表达量随胎龄增大而增高。     

毒物代谢酶CYP2E1基因多态性与慢性苯中毒易感性的关系

目的 探讨CYP2E1基因多态性与苯中毒遗传易感性的关系。方法 选取苯中毒组和苯接触组工人共142名,进行健康及生活方式(吸烟、饮酒等)调查、内科体检、外周血常规检验;PCR扩增基因DNA CYP2E1 5'端上游调节区RsaI、PstI位点以及第六内含子区DraI位点片断,限制性内切酶检测基因多态性;现场空气苯浓度测定。结果 苯中毒组男性携带c1／c2基因型者患慢性苯中毒的危险性为c1／c1型的3．5倍(95％ CI 1．010—12．382),携带CD基因型者患慢性苯中毒的危险性是DD基因型的4．0倍(95％ CI l．704—15．374)。男性携带c1／c2或CD联合基因型患慢性苯中毒的危险性为c1／c1 DD联合基因型的7．8—13倍。苯中毒组接苯工龄高于苯接触组,防护措施状况差于接触组,差异有显著性。饮酒、吸烟对CYP2E1有诱导或促进作用,本次观察尚未发现两组差异有显著性。结论 慢性苯中毒发生是基因—环境等多种因素作用的结果,男性携带c1／c2和CD基因型者发生慢性苯中毒的相对危险度增大,可能与性别、遗传、生理状况及生活方式等多种因素有关。苯作业场所的防护措施对工人的保护作用相当重要,接苯工龄越长,发生慢性苯中毒的危险性将增加。     

大鼠大脑中动脉闭塞后基底节NR1和NR2A及NR2B的表达

目的：探讨基底节区N－甲基－D天冬氨酸受体亚单位蛋白NR1、NR2A和NR2B在脑缺血时的表达与缺血时间的关系。方法：选择“栓线法”大鼠大脑中动脉闭塞（MCAO）模型,用定量免疫印迹技术测定局灶性脑缺血后不同时点基底节区NR1和NR2A及NR2B的表达。结果：因侧NR1在MCAO后1h表达明显下降,然后表达逐渐增加;NR2A在MCAO后1h为低水平表达,4－6h明显增加;NR2B以缺血后5h表达增加最明显。结论：3种亚单位蛋白的表达水平在一定范围内随缺血时间延长而增加,支持脑缺血半暗带理论。     

12－○－十四酰基咐拜醇－13－乙酸酯（TPA）诱导的NIH3T3细胞核原癌

本文采用快速印迹杂交（ｇｕｉｃｋｂｌｏｔ）和延续转录试验（ｔｕｎ－ｏｆｆｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｓｓａｙ）两种特异ｍＲＮＡ检测技术，在ＮＩＨ３Ｔ３细胞系观察到腺苷二磷酸核糖基转移酶（ＡＤＰＲＴ）的特异性抑制剂３－氨基苯甲酰胺（３ＡＢ）并不能阻断促癌物１２－Ｏ－十四酰基咐醇－１３－乙酸酯（ＴＰＡ）诱发的细胞周期依赖性的核原癌基因ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｍｙｃ和ｃ－ｍｙｂ的表达。这一结果直接表明，核原癌基因的表达和ＡＤＰ核糖化作用这两种核内生化事件在细胞周期中的时序是不相同的。     

人工牛黄甲硝唑胶囊联合云南白药治疗复发性口腔溃疡的临床观察

目的：观察人工牛黄甲硝唑胶囊联合云南白药治疗复发性口腔溃疡的临床效果。方法选取复发性口腔溃疡患者80例,随机分成2组,观察组给予人工牛黄甲硝唑胶囊口服及云南白药粉外用,对照组给予华素片含服。比较2组的临床疗效及平均愈合、平均症状消失和平均复发时间。结果观察组经治疗后溃疡愈合快,疼痛症状缓解明显,复发间隔时间延长,无不良反应,优于对照组（P<0.05）。结论人工牛黄甲硝唑胶囊联合云南白药治疗复发性口腔溃疡,内服加外用安全且疗效显著,值得在临床上进一步推广和应用。     

骨髓间充质干细胞对损伤心肌细胞的影响及与Wnt/β-catenin信号通路的关系

目的观察骨髓间充质干细胞(MSCs)在治疗损伤心肌细胞中的分子机制,明确Wnt/β-catenin信号通路是否在其发挥着作用。方法分离、鉴定并培养心肌细胞72 h后分为3组,A组为正常心肌细胞组、B组为阿霉素损伤组(1 mg/L阿霉素作用心肌细胞4 h建立)、C组为MSCs与损伤心肌细胞共培养组,继续培养72 h后,流式细胞仪检测心肌细胞凋亡,应用Western blot法检测β-catenin、c-Myc、p53蛋白的表达。结果阿霉素损伤组的心肌细胞凋亡率为(26.58±3.89)%,对照组为(0.74±0.65)%,MSCs与损伤心肌细胞共培养组为(7.72±0.90)%,差异有统计学意义(F=98.13,P0.001)。经两两比较发现,阿霉素损伤组的凋亡率高于对照组;而共培养组凋亡率低于阿霉素损伤组,差异均有统计学意义(P0.05)。阿霉素损伤组的β-catenin、c-Myc及p53蛋白表达水平均高于MSCs与损伤心肌细胞共培养组,两组间差异均有统计学意义(P均0.01);对照组上述3种蛋白表达不能测出。结论 MSCs可抑制阿霉素诱导的心肌细胞凋亡,其分子机制可能与Wnt/β-catenin通路的抑制有关。     

保留脾脏的胰体尾切除术26例临床分析

分析26例良性和交界性肿瘤而行保留脾脏的胰体尾切除术患者的临床资料, 其中18例行开放性保脾的胰体尾切除术, 8例行腹腔镜下保脾的胰体尾切除术;15例保留脾动静脉, 11例切断脾动静脉。术后7例(26.92%)发生胰瘘。无围术期死亡。结果表明, 对无法行摘除术的胰体尾良性和交界性肿瘤患者, 行开放或腹腔镜下保留脾脏的胰体尾切除术是安全可行的, 虽然手术难度大, 但仍是最佳选择。     

磷脂酶C在原发性高血压中的作用

目的 为提示磷脂酶Ｃ（ＰＬＣ）在原发性高血压的病理变化中的作用。方法 对原发性高血压组和正常对照组分别以抗牛磷酯酶Ｃ－β１（ＰＬＣ－β１）和磷脂Ｃ－γ（ＰＬＣ＿γ）单克隆抗体为探针，用免疫印迹方法测定人动脉血管平滑肌层中ＰＬＣ－β和ＰＬＣ－γ的相对含量。结果 人动脉平岂层中未检测到ＰＬＣ－β；能检出ＰＬＣ－γ１，但原发性高血压组与对照组比较ＰＬＣ－γ１的相对含量针显著性差异。结论这可能与应用抗高血