基于代谢组学技术的冠心病血瘀证不同进展阶段大鼠潜在生物标志物及代谢通路研究

目的通过超高效液相色谱-飞行时间质谱(UPLC-TOF/MS)的非靶向代谢组学方法探索冠心病血瘀证形成过程中大鼠心肌组织代谢特征,寻找潜在的生物标志物,为基于代谢组学的心肌保护相关治疗措施寻找有意义的靶点。方法取27只SD大鼠作为模型组制备冠心病血瘀证模型,另设空白组8只。模型组大鼠采用高脂饲料喂养+维生素D3灌胃+皮下注射异丙肾上腺素方法分3个阶段进行冠心病血瘀证模型的逐步制备。通过UPLC-TOF/MS技术获取大鼠心肌组织内源性小分子代谢物,利用SIMCA 14.1软件和MetaboAnalyst5.0软件进行组间差异性代谢物筛选及相关代谢通路分析,使用SPSS21.0对组间差异性代谢物进行定量分析,受试者工作特征(ROC)曲线评估特征代谢物临床诊断效能。结果筛选出磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、1-酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱、L-苯丙氨酸、牛磺酸共5种差异最为显著的潜在生物标志物,涉及甘油磷脂代谢,苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸的生物合成,苯丙氨酸代谢,牛磺酸和亚牛磺酸代谢4条主要差异代谢通路。ROC曲线分析显示,特征代谢物曲线下面积均大于0.7。结论冠心病血瘀证不同进展阶段大鼠心肌组织...     

冠心病心血瘀阻证患者血浆代谢组学的通路分析

目的探讨冠心病心血瘀阻证患者血浆代谢组学的通路。方法信号通路分析采用KEGG,代谢产物分子注释、相关的酶或转运蛋白及其相关性质分析采用HMDB,代谢产物路径可视化采用met PA网络软件。结果用Met PA分析的生物代谢通路显示,9个代谢产物参与了15条代谢路径。其中糖酵解和糖异生(Glycolysis or Gluconeogenesis)、丙酸代谢(Propanoate metabolism)、脂肪酸生物合成(Fatty acid biosynthesis)通路影响值P0.05。结论心血瘀阻证患者糖酵解和糖异生、丙酸代谢、脂肪酸生物合成通路参与其病理过程。     

柴胡疏肝散加减治疗慢性胆囊炎的Meta分析和试验序贯分析

目的：系统评价柴胡疏肝散加减较常规西药治疗慢性胆囊炎的临床疗效和安全性,为柴胡疏肝散的临床应用提供循证依据。方法：检索PubMed、Embase、The Cochrane Library、国家知识基础设施数据库(CNKI)、中国学术期刊数据库(CSPD)、中文科技期刊数据库(CCD)、中国生物医学文献数据库(CBM)等数据库,检索国内外发表的关于柴胡疏肝散加减治疗慢性胆囊炎的随机对照试验,时限从建库至2020年8月。由2位研究员按筛选标准独立甄选文献,提取资料及评价偏倚风险,运用Revman5.3软件开展Meta分析,Stata15.0软件评估发表偏倚评估,TSA0.9软件开展试验序贯分析(TSA),GRADE3.6软件评价证据质量。结果：纳入11项临床研究,共计样本量1 772例,涵盖观察组1 034例,对照组738例。1)Meta分析：相对于常规西药,柴胡疏肝散能提高慢性胆囊炎的临床治愈率(RR=1.35,95%CI为1.21～1.50,P<0.000 01)、临床总有效率(RR=1.17,95%CI为1.13～1.22,P<0.000 01),降低复发率(RR=0.0...     

加减养心通脉方干预对冠心病血瘀证亚型患者CTNNB1基因表达的影响及疗效观察

目的探讨加减养心通脉方对冠心病血瘀证亚型CTNNB1基因表达及临床疗效观察。方法选择符合冠心病血瘀证诊断标准患者23例,按胸痹血瘀证亚型诊断标准分成冠心病气虚血瘀证组7例、气滞血瘀证组8例和痰浊血瘀证组8例,进行为期1个月的加减养心通脉方的治疗,采用实时荧光定量PCR仪检测服药前后CTNNB1基因表达的变化,观察服药前后血脂血糖临床疗效的变化。结果治疗后不同证型的患者相比治疗前CTNNB1基因表达改变不明显,差异无统计学意义(P0.05);治疗后相比治疗前血糖值均有所下降,气虚血瘀组治疗前后血糖值改变差异有统计学意义(P0.05);不同证型的患者中TC、TG在治疗后,比治疗前值均有所下降,3组治疗前后TC值改变差异有统计学意义(P0.05);气滞血瘀证组、气虚血瘀证组TG改变有统计学意义(P0.05);不同证型患者的HDL、LDLC值在治疗后相比治疗前均有所下降,但差异无统计学意义(P0.05)。结论加减养心通脉方对冠心病血瘀证3个亚型(气虚、气滞、痰浊)CTNNB1基因表达无明显的调控作用,以方测证,说明CTNNB1基因的表达可能不是冠心病血瘀证的发病机制之一。但该方可以明显改善冠心病血瘀证亚型血糖及脂类异常,有较好的降脂和降糖作用。     

冠心病心血瘀阻证F1+2、SFMC的检测分析

目的 研究血浆凝血酶原片段1 +2(F1+2)、可溶性纤维蛋白的单体复合物(SFMC)在冠心病心血瘀阻证的表达水平.方法 选择冠心病心血瘀阻证患者26例、非心血瘀阻证患者30例,健康者28例,于清晨空腹采血后,采用ELISA法检测3组受试者F1+2、SFMC水平.结果 冠心病心血瘀阻证组F1+2、SFMC指标水平较冠心病非心血瘀阻证组、健康组显著增高,差异具有显著性(P＜0.01),F1+2、SFMC指标水平冠心病非心血瘀阻证组与健康组比较差异无显著性(P＞0.05).而冠心病组较健康组增高,差异具有显著性(P＜0.01).结论 冠心病心血瘀阻证组存在明显的血栓前状态.     

影响大鼠心梗模型存活率因素的实验研究

目的:研究影响大鼠心梗模型存活率的因素。方法:采用正交实验,以不同插管方式(经口插管,切开插管)、麻药(水合氯醛,乌拉坦)、是否采用利多卡因设计三因素两水平方案,观察大鼠插管后心率、术中死亡率、围手术期死亡率、总死亡率、室性心律失常放生率、发生室性心律失常大鼠死亡率、术后感染率。结果:插管方式是插管后心率、术中死亡率、总死亡率的主要因素,是否采用利多卡因是围手术期死亡的主要因素,不同麻醉剂是大鼠室性心律失常发生率的主要因素。发生室性心律失常大鼠与心率失常后死亡率有明显的相关性。水合氯醛麻醉与是否采用利多卡因是影响大鼠围手术期死亡率的主要因素。大鼠术后感染与不同插管方式,麻醉剂、利多卡因无关。结论:对于初作者采用气管切开插管、水合氯醛联合利多卡因是可以采用的试验方案。     

大鼠心血瘀阻证心肌组织代谢组学的研究

目的寻找心血瘀阻证大鼠心肌组织代谢产物谱,以及养心通脉方干预后表型的变化,分析大鼠心血瘀阻证心肌组织的代谢途径。方法采用结扎大鼠冠状动脉左前降支复制急性心肌梗死(AMI)心血瘀阻证模型,同时采用养心通脉方干预模型,运用GC-MS检测模型组、养心通脉方组、假手术组和空白对照组4组大鼠心肌组织代谢产物,每组8只,通过对不同组之间代谢产物含量的变化进行主成分分析、偏最小二乘法分析。结果主成分分析:四组样本主成分得分分析,模型组、养心通脉方组与正常组、假手术组分聚于椭圆形散点图的3个区域。因子载荷图显示模型组甘氨酸、延胡索酸、苹果酸、谷氨酸、葡萄糖、磷酸、吡喃半乳糖、赖氨酸发生了改变。偏最小二乘法分析:PLS回归模型显示,模型组与养心通脉方组存在明显的线性关系,证明模型建立是合理的。药物干预与甘氨酸、苹果酸、谷氨酸、葡萄糖高度正相关,与尿素、琥珀酸高度相关,与赖氨酸负相关。按照VIP值依次排列各变量与药物干预的密切度依次是苹果酸、谷氨酸、甘氨酸、葡萄糖、延胡索酸、尿素、半乳糖、酪氨酸、乳酸、丙氨酸。差异性分析:明显变化的代谢产物差异性分析表明,甘氨酸等10种代谢产物在模型组中显著下降,与正常组比较差异有统计学意义(P<0.01)。药物干预后甘氨酸、延胡索酸、苹果酸、谷氨酸、半乳糖、葡萄糖、酪氨酸、尿素、乳酸、丙氨酸等含量增加与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01)。其中苹果酸、谷氨酸、酪氨酸、尿素上升幅度较小,与正常组比较差异仍有统计学意义。赖氨酸经药物干预后均数显示有轻度下降,但与模型组比较差异无统计学意义。大鼠AMI心血瘀阻证与心肌组织代谢产物苹果酸、谷氨酸、甘氨酸、葡萄糖、延胡索酸、尿素、吡喃半乳糖、乳酸、丙氨酸、酪氨酸等含量的改变密切相关。结论心肌组织代谢产物谱显示AMI心血瘀阻证代谢途径与缺氧后的糖代谢紊乱密切相关,养心通脉方可以有效干预这一过程。     

冠心病血瘀证遗传相关的差异基因筛选及其功能路径分析

目的 探讨冠心病(coronary heart disease,CHD)血瘀证遗传相关的差异基因功能及目标通路。方法 以家系CHD血瘀证者(A组)及家系CHD非血瘀证者(B组)、家系非CHD血瘀证者(C组)、家系健康人(D组)、非家系CHD血瘀证者(E组)、非家系健康人(F组)为研究对象,应用基因芯片技术比较A组与B、C、D、E组,以及D组与F组的差异基因表达谱;通过基因本体论(gene ontology,GO)分析阐释差异基因的分子功能;通过BioCarta及KEGG网站寻找差异基因所在通路,应用超几何分布统计学方法分析筛选出有意义的目标通路,并用实时荧光定量RT PCR对差异基因进行验证。结果 (1)通过对基因芯片数据的筛选(差异倍数≥3),发现家系CHD血瘀证差异基因表达主要涉及趋化因子、白介素细胞因子、补体系统、基质金属蛋白酶系、成纤维细胞生长因子、内皮细胞黏附因子等。(2)通过相关差异基因(P<0.05)GO分析,找到与CHD血瘀证相关的差异基因的分子功能。(3)经过BioCarta及KEGG通路分析,发现家系CHD血瘀证与遗传相关的差异基因中差异有统计学意义(P<0.05)的目标通路主要涉及到炎症、斑块形成、内皮损伤等方面。经实时荧光定量RT-PCR反应验证了基因芯片准确可靠。结论 CHD血瘀证遗传相关的差异基因与炎症、斑块形成及血管内皮损伤密切相关。     

心血瘀阻证研究思路探讨

证候是中医学的核心内容,也是现阶段研究的难点,本文通过病证结合、动物模型、系统生物学、医学模式等方面的论述展望下阶段心血瘀阻证研究思路。     

肾安汤对原发性肾病综合征肾小管的影响

原发性肾病综合征(PNS)系临床常见疾病,其发展和预后不仅与肾小球本身的损害有关,与肾小管间质病变(TIL)也密切相关,而肾小管上皮细胞在肾间质病变的发生和进展中起着重要的作用[1].目前影响肾小管的药物少见报道,为此我们采用肾安汤对PNS患者肾小管的影响进行了临床观察,现报道如下.