miR-29a调控IRS1促进肝门部胆管癌细胞增殖的机制研究

目的检测miR-29a在肝门部胆管癌(hilar cholangiocarcinoma,HCCA)中的表达情况,探讨其在HCCA发生、发展中的作用。方法收集30对HCCA组织及癌旁正常组织标本,实时荧光定量PCR法检测miR-29a表达;利用生物信息学软件预测其靶基因,并进一步采用双荧光素酶报告基因法和分子生物学实验进行验证;选取HCCA细胞株FRH0201,采用CCK-8法和流式细胞仪分别检测miR-29a/IRS1对HCCA细胞增殖及周期的影响。结果与癌旁正常组织相比,HCCA组织中miR-29a表达明显下调(P0.05);在肿瘤细胞株FRH0201中上调miR-29a表达后可抑制肿瘤细胞增殖,引起G_0/G_1期阻滞,而上调IRS1表达可有效逆转这一现象。结论 HCCA中miR-29a显著低表达,并可能通过靶向调控IRS1引起HCCA细胞异常增殖和周期阻滞。     

胰腺癌PANC1细胞microRNA-217靶基因ANLN的鉴定

目的 通过实验验证ANLN为microRNA-217(miR-217)的靶基因.方法 使用生物学软件预测miR-217调控的靶基因可能为ANLN.设计并合成mR-217结合的ANLN及突变型ANLN(mutANLN)序列,将其PCR扩增的片段插入表达质粒psiCHECK-2,构建重组质粒psiCHECK-2-ANLN及psiCHECK-2-mutANLN.采用脂质体法将2个重组质粒单独或分别与miR-217、miR-217 inhibitor及与人同源性远的miRNA序列(NC)、NC inhibitor共转染胰腺癌PANC1细胞,采用双荧光素酶报告系统检测荧光素酶活性,采用蛋白质印迹法检测ANLN蛋白的表达.结果 转染psiCHECK-2-ANLN、psiCHECK-2-ANLN+miR-217、psiCHECK-2-ANLN+miR-217 inhibitor、psiCHECK-2-ANLN+NC、psiCHECK-2-ANLN+ NC inhibitor各组间的荧光素酶活性分别为2.221±0.188、0.769±0.061、3.764±0.371、2.265±0.201、2.242 ±0.018,差异有统计学意义(F =77.405,P＜0.01),但psiCHECK-2-ANLN组、psiCHECK-2-ANLN+ NC组及psiCHECK-2-ANLN+ NC inhibitor组两两比较差异无统计学意义,而psiCHECK-2-ANLN+ miR-217组的荧光素酶活性较这3组明显下降,psiCHECK-2-ANLN+miR-217inhibitor组活性较其他4组明显升高(P值均＜0.01).转染psiCHECK-2-mutANLN各组间荧光素酶活性差异无统计学意义(P=0.053).psiCHECK-2-ANLN+ miR-217共转染组PANC1细胞的ANLN蛋白表达水平较单纯转染psiCHECK4-ANLN组细胞的ANLN蛋白表达明显下调.结论 在胰腺癌中,ANLN可能是miR-217的直接靶基因.     

肝癌肝移植前经肝动脉化学药物栓塞的临床研究

肝移植作为对某些肝癌病人的一种有效的治疗手段日益受到重视[1].但由于肝移植病人的逐渐增加和肝脏供体的短缺,使术前等待时间越来越长,导致很多病人在等待移植期间因病情恶化而失去了肝移植机会.     

93例胰十二指肠切除术的临床分析

９３例胰十二指肠切除术的临床分析广东省人民医院肝胆外科（５１００８０）简志祥，刘子贤１９３５年Ｗｈｉｐｐｌｅ氏首次报道胰十二指肠切除术，由于胰瘘的发生率较高，１９４４年Ｃｈｉｌｄ氏作了改良并提出空肠残胰套式吻合重建消化道，使胰瘘明显下降。胰十二指肠切...     

完全腹腔镜与传统开腹肝切除术的临床对照研究

目的:对比腹腔镜肝切除和开腹肝切除两种方法的优缺点.方法:回顾性分析2007年9月至2011年9月以来在广州医学院第五附属医院和广东省人民医院肝胆胰外科行肝切除术并符合本研究条件的患者112例,其中41例(36.6％)行完全腹腔镜肝切除术、71例(63.4％)行开腹肝切除术,比较两组的手术时间、术中出血量、切口长度、术后住院时闻、术后并发症和腹腔镜肝癌切除的可行性.结果:腹腔镜组与开腹组的手术切口长度和术后住院时间差异均有显著统计学意义.而在手术时间、术中平均出血量、切缘距肿瘤边缘的距离、术后并发症和肝癌患者术后1年复发率的比较差异无统计学意义(P＞0.05).腹腔镜组与开腹组均无严重并发症发生.结论:有条件地选择合适病例进行完全腹腔镜下肝部分切除术是安全、有效、可行的方法,并且具有创伤小、术后康复快等特点.腹腔镜肝切除同样适用肝癌患者.     

三维可视化技术在腹腔镜胰体尾囊性肿瘤切除中的临床应用

目的探讨三维可视化技术对腹腔镜胰体尾部囊性肿瘤切除的应用价值。方法对2009年12月~2011年3月收治的6例
胰体尾部囊性肿瘤患者的临床资料进行回顾性分析。采集全部患者的64排螺旋CT的原始扫描数据集,通过自适应区域生长
算法对CT序列图像进行图像程序分割和自动提取,再采用方驰华教授研发的图像处理软件对图像数据进行三维重建,根据重
建的图形制定具体的手术入路（trocar位置）、手术方式等。结果三维重建后的胰体尾部肿瘤与邻近脏器的三维结构清楚,特别
是肿瘤与脾动静脉以及脾门的关系明晰。所有患者均行腹腔镜下胰体尾切除,无围手术期死亡;在保脾方面,除1例因为是黏
液性囊腺癌而行胰体尾+脾切除外,其余5例均保留脾脏,保脾率为83.3%（5/6）;术后并发症方面,胰瘘发生率33.3%（2/6）,无手
术后出血。平均住院天数12 d。结论腹腔镜下胰体尾切除具有手术创伤小,术后恢复快、保脾率高等优点;胰腺CT数据三维
重建对腹腔镜下胰体尾肿瘤切除的个体化手术方案制定有很大的应用价值。
     

靶向血管内皮生长因子基因的微小RNA真核表达载体的构建***

背景：有研究表明微小RNA及潜在靶基因在肝癌中起重要作用,但具体机制仍不清楚。 目的：构建靶向血管内皮生长因子基因微小RNA真核表达载体,评估其转染人肝癌细胞株HepG2后血管内皮生长因子基因的干扰效果。 方法：根据血管内皮生长因子序列设计合成4对微小RNA不同干扰片段,克隆到pcDNA6.2-GW/EmGFP-微小RNA真核表达载体上,测序分析鉴定插入序列的完整性;并将其转染至HepG-2细胞株中。采用实时荧光定量聚合酶链式反应分析血管内皮生长因子微小RNA干扰效果,蛋白印迹技术测定重组体对血管内皮生长因子基因蛋白表达情况。 结果与结论：构建的4组重组体插入片段的碱基序列完全正确,重组体能干扰肝癌细胞HepG2细胞血管内皮因子基因的表达,4组重组体基因的mRNA的表达水平和蛋白表达水平与阴性对照组相比明显降低(P < 0.05),其中血管内皮生长因子微小RNA-3表达水平最低,抑制率87%。结果证实,实验成功构建血管内皮生长因子微小RNA表达载体,在体外能有效抑制HepG2细胞血管内皮生长因子基因表达。关键词：血管内皮生长因子;微小RNA;肝癌;肝细胞;抑制;基因表达;组织工程 缩略语注释：VEGF: vascular endothelialcell growth factor,血管内皮生长因子 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.15.017     

外科感染防治部分指南解读

外科感染的防治一直是外科临床的重点,是改善外科病人治疗效果的关键环节。尽管国内外提出多个针对外科感染（尤其是手术部位感染）的防治指南,但外科感染的发生率并没有明显变化。目前,国内外指南关于预防感染的各方面,如血糖、术中体温、皮肤消毒、切口保护器、无菌灌洗、抗菌缝线、预防性抗生素使用等,均明确提出了实施方案,然而具体内容各有不同,其中部分指南根据最新循证医学证据进行了更新。     

GPC3在原发性肝细胞性肝癌根治术后早期复发中的表达及意义

目的:探讨磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)在肝细胞性肝癌根治术后早期复发中的表达及其意义.方法:57例施行肝癌根治术的病例入选本研究,根据其复发倾向分为早期复发组及非早期复发组.免疫组化法和实时荧光定量PCR法分别检测GPC3的表达.结果:免疫组化法和实时荧光定量PCR法均提示GPC3高表达于早期复发组.单因素分析显示肝硬化、GPC3表达、肿瘤直径、血管侵犯和ALT(P<0.05)是肝癌根治术后早期复发的危险因素;logistic多因素回归分析显示GPC3,肿瘤直径和血管侵犯是肝癌根治术后早期复发的独立危险因素.结论:GPC3其高表达有可能增加复发风险.     

腹腔镜下肝切除的临床研究

目的:探讨总结腹腔镜肝切除术的临床应用体会.方法:回顾分析广东省人民医院肝胆外科室2007年9月至2009年12月在全气腹条件下行腹腔镜肝切除术23例,其中15例行肝局部切除术,7例行肝左外叶切除术.结果:23例成功地在完全腹腔镜下完成手术,平均手术时间120 min,平均出血量140 mL,术后未发生严重并发症,术后平均住院9.4 d.术后随访无局部复发或腹壁戳孔种植性转移.结论:在掌握好适应证的前提下,腹腔镜肝切除术是安全可行的,有较高的临床应用价值.